Defekt hämatopoetischer Stammzellen bei Aplastischer Anämie: quantitative Untersuchung durch Grenzverdünnungsanalyse in der Knochenmark-Langzeitkultur
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1995
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
I.
LISTE
DER
VERWENDETEN
ABKUERZUNGEN
5
1.
EINLEITUNG
1.1.
APLASTISCHE
ANAEMIE
7
1.2.
HAEMATOPOETISCHE
STAMMZELLE
8
1.2.1.
KOLONIE-ASSAYS
10
1.2.2.
KNOCHENMARK-LANGZEITKULTUR
11
1.2.3.
COBBLESTONE
AREA
FORMING
CELL
"
(CAFC)
UND
12
YYLONGTERM
CULTURE-INITIIATING
CELL
"
(LTC-IC)
1.3.
QUANTIFIZIERUNG
VON
PROGENITORZELLEN
MITTELS
13
GRENZVERDUENNUNGSANALYSE
1.4.
FRAGESTELLUNG
DER
VORLIEGENDEN
ARBEIT
14
2.
PATIENTEN,
MATERIAL
UND
METHODEN
2.1.
PATIENTEN
15
2.2.
ZELLAUFBEREITUNG
18
2.3.
RHODAMINE-123-FAERBUNG
UND
SEPARATION
18
2.4.
KULTURMEDIUM
19
2.5.
STROMA-LAYER
19
2.6.
KNOCHENMARK-LANGZEITKULTUR
20
2.7.
FREQUENZBERECHNUNG
DER
CAFC
MITTELS
21
GRENZVERDUENNUNGSANALYSE
2.8.
PROGENITOR-ASSAYS
24
2.8.1.
GRANULOZYTEN-MAKROPHAGEN-PROGENITOR-ASSAY
24
2.8.2.
ERYTHROZYTEN-PROGENITOR-ASSAYS
25
2.9.
STATISTISCHE
METHODEN
25
2.9.1.
CAFC-FREQUENZBERECHNUNG
25
2.9.2.
MITTELWERTE
25
2.9.3.
STATISTISCHE
TESTS
25
2.10.
VERSUCHSABLAUF
DER MODIFIZIERTEN
KNOCHENMARK
27
LANGZEITKULTUR
3.
ERGEBNISSE
3.1.
KNOCHENMARK-LANGZEITKULTUREN
28
3.2.
ZELLSEPARATION
32
3.3.
UEBERPRUEFUNG
DER
BEDINGUNGEN
FUER
DIE
34
GRENZVERDUENNUNGSANALYSE
3.4.
COBBLESTONE-AREA-FORMING-CELL-FREQUENZEN
41
3.5.
CAFC-FREQUENZEN
BEI
PATIENTEN
MIT
48
MYELODYSPLASTISCHEM
SYNDROM
3.6.
ANTI-LYMPHOZYTEN-GLOBULIN
IN
DER
KNOCHENMARK
49
LANGZEITKULTUR
4.
DISKUSSION
4.1.
STAMMZELLDEFEKT
BEI
DER
APLASTISCHEN
ANAEMIE
51
4.1.1.
KLINISCHE
HINWEISE
51
4.1.2.
ERGEBNISSE
VON
IN-VITRO
UNTERSUCHUNGEN
52
4.2.
VOREXPERIMENTE
UND
METHODISCHES
VORGEHEN
53
4.3.
DIE
ANWENDUNG
DER
GRENZVERDUENNUNGSANALYSE
IN
DER
55
KNOCHENMARK-LANGZEITKULTUR
4.4.
ZELLSEPARATION
56
4.5
BEDEUTUNG
DER
ERMITTELTEN
CAFC-FREQUENZEN
58
4.6.
KORRELATION
DER
CAFC-FREQUENZEN
MIT
KLINISCHEN
DATEN
61
DER
PATIENTEN
4.7.
AUSBLICK:
MOEGLICHKEITEN
DER
ANWENDUNG
DER
ETABLIERTEN
64
METHODE
5.
ZUSAMMENFASSUNG
66
6.
LITERATURVERZEICHNIS
68
7.
DANKSAGUNG
75 |
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