Charakterisierung des ras-induzierten T1-Proteins der Maus:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1995
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
I
ZUSAMMENFASSUNG
1
II
ABKUERZUNGEN
2
III
EINLEITUNG
4
IV
MATERIAL
8
1.
GERAETE
UND
MATERIALIEN
8
2.
CHEMIKALIEN
9
3.
RADIOCHEMIKALIEN
10
4.
KITS
10
5.
ANTISEREN
10
6.
ZELLINIEN
11
V
METHODEN
12
1.
ZELLKULTURBEDINGUNGEN
12
1.1
ANZUCHT
VON
ZELLEN
12
1.2.
PASSAGIEREN
13
1.3.
EINFRIEREN
VON
ZELLEN
14
2.
T1
EXPRESSION
MITTELS
EINES
REKOMBINANTEN
VACCINIAVIRUS
14
3.
EINENGEN
VON
ZELLKULTURUEBERSTAENDEN
IN
AMICON
FILTERZELLEN
14
4.
PROTEINBESTIMMUNG
15
4.1.
BESTIMMUNG
MIT
AMIDOSCHWARZ
15
4.2.
BESTIMMUNG
NACH
BRADFORD
16
5.
HERSTELLUNG
DER
ANTI-T1-ANTIKOERPER
16
6.
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
16
7.
WESTEMBLOT-ANALYSE
18
7.1.
TRANSFER
DER
PROTEINE
AUF
NYLONMEMBRAN
18
7.2.
IMMUNOLOGISCHER
NACHWEIS
18
8.
SILBERFAERBUNG
VON
PROTEINGELEN
19
9.
CROSSLINKING
VON
PROTEINEN
20
10.
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
ZELLEN
UND
PROTEINEXTRAKTION
20
11.
PULS-CHASE-MARKIERUNGEN
21
12.
MATRIXEXTRAKTION
21
13.
IMMUNPRAEZIPITATION
22
14.
EINSATZ
VON
GLYKOSIDASEN
23
15.
LEKTIN
BINDUNGSSTUDIEN
23
15.1.
GLYCAN
DIFFERENTIATION
KIT
23
15.2.
PROTEINANREICHERUNG
UEBER
LEKTINE
24
16.
IL-1
BINDUNGSSTUDIEN
25
16.1.
DOTBLOT-TECHNIK
25
16.2.
HYBRIDISIERUNG
MIT
[
125
J1-IL-1
26
17.
RNS-ISOLIERUNG
26
18.
GELELEKTROPHORESE
VON
RIBONUKLEINSAEUREN
27
19.
NORTHEMBLOT-ANALYSE
29
19.1.
TRANSFER
VON
RNS
AUF
EINE
MEMBRAN
29
19.2.
RANDOM
PRIMING-MARKIERUNG
VON
DNS-SONDEN
29
19.3.
HYBRIDISIERUNG
DER
MEMBRANGEBUNDENEN
RNS-PROBEN
30
VI
ERGEBNISSE
32
1.
BIOCHEMISCHE
CHARAKTERISIERUNG
DES
T1-PROTEINS
DER
MAUS
32
1.1.
IDENTIFIZIERUNG
DES
T1-PROTEINS
IN
FIBROBLASTEN
32
1.2.
STABILITAET
DES
T1
-PROTEINS
IN
DER
ZELLKULTUR
35
1.3.
BINDUNG
AN
DIE
EXTRAZELLULAERE
MATRIX
36
1.4.
GLYKOSYLIERUNG
36
1.4.1.
WIRKUNG
VON
GLYKOSYLIERUNGSINHIBITOREN
36
1.4.2.
BEHANDLUNG
MIT
GLYKOSIDASEN
38
2.
REINIGUNG
DES
T1-PROTEINS
39
2.1.
AUSWAHL
DES
EXPRESSIONSSYSTEMS
39
2.2.
BINDUNGSSTUDIEN
UND
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
40
2.2.1.
VORVERSUCHE
ZUR
BINDUNG
VON
T1
40
2.2.2.
ANREICHERUNG
DES
T
1
-PROTEINS
43
3.
FUNKTION
48
3.1.
FUNKTION
IM
IMMUNBEREICH
48
3.1.1.
T1
-
EIN
IL-1-BINDENDES
PROTEIN?
48
3.1.2.
T1
-
EIN
B15R-BINDENDES
PROTEIN?
51
3.2.
FUNKTION
BEI
ZELLDIFFERENZIERUNGSVORGAENGEN
53
3.2.1.
T1
-
EIN
TUMOR
ODER
DIFFERENZIERUNGSMARKER?
53
3.2.1.1.
T1-EXPRESSION
IN
TUMOREN
53
3.2.1.2.
T1-EXPRESSION
BEI
DIFFERENZIERUNGSVORGAENGEN
54
VII
DISKUSSION
57
1.
DIE
BIOCHEMISCHEN
EIGENSCHAFTEN
DES
T1-PROTEINS
DER
MAUS
57
2.
DIE
REINIGUNG
DES
T1-PROTEINS
59
3.
DIE
FUNKTION
DES
T
1
-PROTEINS
60
3.1.
FUNKTIONEN
IM
IMMUNBEREICH
60
3.2.
FUNKTIONEN
WAEHREND
DER
DIFFERENZIERUNG
61
4.
DAS
MEMBRANGEBUNDENE
T1
-PROTEIN
63
5.
AUSBLICK
65
VIII
LITERATURVERZEICHNIS
66
IX
ANHANG
71
1.
DANKSAGUNG
71
2.
TABELLARISCHER
LEBENSLAUF
72 |
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