Methodische Entwicklung von ELISA-Tests zur Messung von IgA-, IgA1- und IgA2-Antikörpern gegen Gliadin im humanen Serum und ihre Anwendung im Rahmen der Diagnostk und Verlaufsbeobachtung bei Zöliakie:
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INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG 1
1.1. KRANKHEITSBILD DER ZOELIAKIE 1
1.1.1. DEFINITION UND HAEUFIGKEIT 1
1.1.2. KLINIK 1
1.1.3. KOMPLIKATIONEN 2
1.1.4. GENETISCHE FAKTOREN 2
1.1.5. ASSOZIATION MIT ANDEREN KRANKHEITEN 2
1.1.6. THERAPIE 3
1.2. AETIOLOGIE UND PATHOGENESE DER ZOELIAKIE 3
1.2.1. ZOELIAKIEAUSLOESENDE PROLAMINE 3
1.2.2. INTESTINALES IMMUNSYSTEM 4
1.2.3. IMMUNOLOGISCHE HYPOTHESE 6
1.2.4. ANDERE HYPOTHESEN 7
1.3. DIAGNOSTIK BEI ZOELIAKIE G
1.3.1. BIOPSIE DER DUENNDARMMUKOSA 8
1.3.2. MESSUNG VON ANTIKOERPERN 9
1.3.2 1. AGA IM SERUM 9
1.3.2.2. ANDERE ANTIKOERPER IM SERUM BEI ZOELIAKIE: AEMA UND ARA 14
1.3.3. ANDERE DIAGNOSTIKMETHODEN 15
2. AUFGABENSTELLUNG 16
3. MATERIAL, METHODEN, PATIENTEN 17
3.1. PRINZIP DES EIA 17
3.2. MATERIAL 18
3.2.1. MIKROTITERPLATTEN 18
3.2.2. GLIADIN 18
3.2.3. LOESUNGEN 19
3.2.4. ANTIKOERPER 20
3.3. METHODEN 21
3.3.1. BESCHICHTUNG DER MIKROTITERPLATTEN 21
3.3.2. ARBEITSABLAUF DER ANTIKOERPERBESTIMMUNG MIT EINEM ELISA 21
3.3.3. DURCHFUEHRUNG DER AGA-MESSUNG IN PATIENTENSEREN MIT DEN
AUFGEBAUTEN TESTS 22
3.4. PATIENTEN 23
3.5. METHODEN ZUR STATISTISCHEN AUSWERTUNG 26
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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4. ERGEBNISSE 27
4.1. METHODISCHE ENTWICKLUNG VON ELISA-TESTS ZUR AGA-MESSUNG 27
4.1.1. IGG-AGA IM KANINCHENSERUM 27
4.1.11. BESCHICHTUNG UND FIXIERUNG 27
4.1.12. INKUBATIONSZEIT DES ANTISERUMS UND DAUER DES WASCHVORGANGS 28
4.1.1.3. INKUBATIONSZEIT DES 2. ANTIKOERPERS 31
4.1.14. INTRAASSAY 32
4.1.15. RESULTIERENDE VORSCHRIFT ZUR MESSUNG VON IGG-AGA IM
KANINCHENSERUM 3 2
4.1.2. IGA-AGA IN HUMANEN SEREN 33
4.1.2.1. VERDUENNUNGSREIHEN ZWEIER SEREN 33
4.1.2.2. BESTIMMUNG EINES GEEIGNETEN POSITIVEN UND NEGATIVEN STANDARDS
34
4.1.2.3. OPTIMIERUNG DER FAERBEDAUER 35
4.1.2.4. RESULTIERENDE VORSCHRIFT ZUR MESSUNG VON IGA-AGA IM HUMANEN
SERUM 35
4.1.3. IGAJ- UND IGA
2
-AGA IN HUMANEN SEREN 36
4.1.31. VERDUENNUNGSREIHE DES 2. ANTIKOERPERS 36
4.1.3.2. VERDUENNUNGSREIHE ZWEIER SEREN, WEITERE TESTVERAENDERUNGEN ZUR
OPTIMIERUNG 37
4.1.33. RESULTIERENDE VORSCHRIFT ZUR MESSUNG VON IGAJ- UND IGA
2
-AGA
IM HUMANEN SERUM 39
4.2. ANWENDUNG DER AUFGEBAUTEN ELISA-TESTS ZUR AGA-MESSUNG IN HUMANEN
SEREN 40
4.2.1. IGA-AGA-MESSUNG 40
4.2.2. VERHAELTNIS VON IGG-AGA ZU IGA-AGA 41
4.2.3. IGAJ-AGA-MESSUNG 44
4.2.4. IGA
2
-AGA-MESSUNG 46
4.2.5. VERHAELTNIS VON IGAJ-AGA ZU IGA
2
*AGA 47
4.2.6. VERHAELTNIS VON IGA-AGA ZU IGAJ-, IGA
2
- UND IGAJ+ IGA
2
-AGA 50
4.2.7. EINFLUSS DES ALTERS DER PATIENTEN 52
4.2.8. UNTERSUCHUNG DES ANTIKOERPERVERLAUFS BEI EINER
GLIADIN-DUENNDARMPERFUSION 54
5. DISKUSSION 56
5.1. ENTWICKLUNG VON ELISA-TESTS 56
5.2. VERHALTEN DER IGA-AGA IM VERGLEICH ZU IGG-AGA 57
5.3. IGAJ - UND IGA
2
-AGA 60
5.4. GLIADIN-DUENNDARMPERFUSION 64
6. ZUSAMMENFASSUNG 66
7. ANHANG 69
8. LITERATURVERZEICHNIS
71 |
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