Bestimmung von Hypoxanthin und Xanthin in biologischen Flüssigkeiten: Optimierung der Präanalytik von Plasma und Urin und einer isokratischen HPLC-Methode zur routinemäßigen Anwendung
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1995
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INHALTSVERZEICHNIS
I.
EINLEITUNG
.
5
LA.
PATHOBIOCHEMIE
DER
VERAENDERUNGEN
VON
HYPOXANTHIN
/
XANTHIN
-
-
KONZENTRATIONEN
.
5
-1.
ANGEBORENE
STOFFWECHSELDEFEKTE
UND
DEREN
BEFUND
-
KONSTELLATIONEN
.
5
-
HYPERURIKAEMIE
.
5
-
HYPOXANTHIN
-
PHOSPHO
-
RIBOSYL
-
TRANSFERASE
-
DEFEKT
.
6
-
PHOSPHO
-
RIBOSYL
-
PYROPHOSPHAT
-
SYNTHETASE
-
UEBERAKTIVITAET
.
6
-
XANTHIN
-
OXIDASE
-
MANGEL
.
7
-
MOLYBDEN
-
KOFAKTOR
-
MANGEL
.
7
-
MYOADENYLAT
-
DEAMINASE
-
MANGEL
.
8
-
2.
HYPOXIE
/
ASPHYXIE
BEI
NEUGEBORENEN
.
10
-
LITERATURUEBERSICHT
.
10
-
HUMANES
PLASMA
.
10
-
HUMANER
URIN
.
10
-
LIQUOR
IN
TIERMODELLEN
.
11
-
HUMANER
LIQUOR
.
11
-
HUMANES
NABELSCHNURBLUT
.
11
-
3.
VERAENDERTE
WERTE
BEI
PATHOLOGISCHEN
VERAENDERUNGEN
IM
BEREICH
DES
ZNS
.
12
IB.
LITERATURUEBERSICHT
ZU
PRAEANALYTIK
UND
BISHERIGEN
ANALYSENMETHODEN
VON
HYPOXANTHIN
UND
XANTHIN
IN
BIOLOGISCHEN
PROBEN
.
13
-
PROBENVORBEREITUNG
IM
LIQUOR
.
13
-
PROBENVORBEREITUNG
IM
PLASMA
.
13
-
PROBENVORBEREITUNG
URIN
.
14
-
HPLC
-
METHODEN
.
14
-
ALLGEMEINE
GRUNDLAGEN
.
14
-
LITERATURUEBERSICHT
.
14
II.
BESTEHENDE
PROBLEME
BEI
DER
ROUTINEMAESSIGEN
BESTIMMUNG
VON
HYPOXANTHIN
UND
XANTHIN
IN
BIOLOGISCHEN
PROBEN
.
17
-
PRAEANALYTISCHE
SCHWIERIGKEITEN:
ANSTIEG
VON
HYPOXANTHIN
IM
VOLLBLUT
NACH
DER
PROBENGEWINNUNG
.
17
-
AUFWAND
BEI
DER
VERWENDUNG
VON
GRADIENTENELUTIONSMETHODEN
.
17
-
FEHLENDE
GRUNDDATEN
ZU
VERAENDERUNGEN
VON
HYPOXANTHIN
-
UND
XANTHIN
-
WERTEN
IM
LIQUOR
BEI
ERKRANKUNGEN
IM
BEREICH
DES
ZNS
.
17
III.
EIGENE
ZIELSETZUNGEN
.
19
-1.
ENTWICKLUNG
EINER
ZUR
ROUTINEMAESSIGEN
APPLIKATION
UND
ZU
SCREENING
-
ZWECKEN
GEEIGNETEN
ISOKRATISCHEN
HPLC
-
METHODE
.
19
-2.
UEBERPRUEFUNG
DER
HYPOXANTHIN
-
UND
XANTHINWERTE
IM
VOLLBLUT
NACH
DER
PROBENGEWINNUNG
IM
ZEITLICHEN
VERLAUF
.
19
-3.
UNTERSUCHUNG
VON
300
LIQUORPROBEN
UEBER
EINEN
ZEITRAUM
VON
10
MONATEN,
ZUORDNUNG
ZU
KRANKHEITSBILDEM
DES
ZNS
SOWIE
ERMITTLUNG
EIGENER
RICHTWERTE
FUER
HYPOXANTHIN
UND
XANTHIN
IM
LIQUOR
.
19
IV.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
20
-1.
HPLC
-
SYSTEMKONFIGURATION
.
20
-
2.
DATENERFASSUNG
.
21
-
3.
MATERIAL
-
UND
GERAETEANGABEN
.
21
-1)
CHEMIKALIEN
UND
MATERIALIEN
.
21
-2)
GERAETE
.
22
V.
RESULTATE
.
23
VA.
METHODENAUSWERTUNG
MITTELS
STANDARDS
.
23
-1.
STANDARDHERSTELLUNG
.
23
-
1A.
HERSTELLUNG
VON
HYPOXANTHINSTANDARD
.
23
-
1B.
HERSTELLUNG
VON
XANTHINSTANDARD
.
25
-
1C.
HALTBARKEIT
DER
STANDARDS
.
26
-2.
STANDARDANALYSEN
.
27
-
2A.
OPTIMIERUNG
DER
METHODE
ZUR
ROUTINEMAESSIGEN
ANWENDUNG.
27
-
2B.
BERECHNUNG
DER
K'
-
WERTE
.
29
-
2C.
BERECHNUNG
DER
ANZAHL
DER
THEORETISCHEN
BOEDEN
.
30
-
2D.
ZUSAMMENFASSUNG
DER
APPLIKATIONSMETHODE
.
30
-
2E.
ANALYTISCHE
VARIABLEN
DER
STANDARDANALYSEN
MITTELS
HPLC.
31
-
DETEKTIONSLIMIT
.
31
-
PRAEZISION
DER
STANDARDLAEUFE
.
31
-
LINEARITAET
.
32
VB.
METHODENAUSARBEITUNG
MITTELS
BIOLOGISCHER
PROBEN
.
34
-1.
LIQUOR
.
34
-
1A.
PROBENVORBEREITUNG
.
34
-
1B.
ANALYTISCHE
VARIABLEN
.
34
-
DETEKTIONSLIMIT
.
34
-
PRAEZISION
.
34
-
WIEDERFINDUNGSRATE
UND
LINEARITAET
.
35
-
HALTBARKEIT
DER
PROBEN
.
37
-
CHROMATOGRAPHISCHE
BEDINGUNGEN
.
37
-
2.
PLASMA
.
38
-
2A.
VOLLBLUTGEWINNUNG
UND
VORAUSSETZUNGEN
SEITENS
DES
PATIENTEN
.
38
-2B.
PROBENVORBEREITUNG
.
38
-
OPTIMIERUNG
DER
ENTEIWEISSUNG
UND
PROBENNEUTRALISATION
.
38
-
PROBENVORBEREITUNG
DER
PLASMAPROBEN
.
40
-
2C.
ANALYTISCHE
VARIABLEN
.
41
-
DETEKTIONSLIMIT
.
41
-
PRAEZISION
DER
PLASMAANALYSE
.
41
-
WIEDERFINDUNGSRATE
UND
LINEARITAET
.
41
-
UEBERPRUEFUNG
DER
LINEARITAET
VON
EXTERNEM
STANDARD
IM
PLASMA
.
42
-
HALTBARKEIT
DER
PROBEN
.
43
-
CHROMATOGRAPHISCHE
BEDINGUNGEN
.
43
-
3.
URIN
.
45
-
3A.
PROBENGEWINNUNG
UND
PROBENVORBEREITUNG
.
45
-
3B.
ANALYTISCHE
VARIABLEN
.
45
-
DETEKTIONSLIMIT
.
45
-
PRAEZISION
DER
URINANALYSE
.
45
-
WIEDERFINDUNGSRATE
UND
LINEARITAET
.
45
-
WIEDERFINDUNGSRATE
FUER
HYPOXANTHIN
UND
XANTHIN
IM
URIN
.
46
-
UEBERPRUEFUNG
DER
LINEARITAET
VON
EXTERNEM
STANDARD
IM
URIN
.
47
-
HALTBARKEIT
DER
PROBEN
.
48
-
CHROMATOGRAPHISCHE
BEDINGUNGEN
.
48
-4.
PEAKIDENTIFIZIERUNG
IN
BIOLOGISCHEN
PROBEN
.
50
VC.
ERFORDERLICHE
MINDESTMENGEN
VON
BIOLOGISCHEN
PROBEN
.
50
VI.
SPEZIELLE
PROBLEME
DER
PROBENAUFBEREITUNG
UND
PROBLEMLOESUNG
.
51
-1.
STANDARDANALYSEN
.
51
-2.
LIQUOR
.
51
-
3.
PLASMA
.
51
-
3A.
ALLGEMEINE
PROBLEMLOESUNG
.
51
-
3B.
UNTERSUCHUNG
DES
HYPOXANTHINANSTIEGS
IM
VOLLBLUT
IM
ZEITLICHEN
VERLAUF
.
53
-
3C.
VERWENDUNG
VON
ENZYM
-
UND
MEMBRANTRANSPORTINHIBITOREN
.
55
-
4.
URIN
.
59
VII.
REFERENZWERTE
FUER
HYPOXANTHIN
UND
XANTHIN
.
60
-1.
REFERENZWERTE
DER
LITERATUR
.
60
-
2.
ERFASSTE
LITERATURWERTE
FUER
HYPOXANTHIN
UND
XANTHIN
BEI
ANGEBORENEN
PURINSTOFFWECHSELSTOERUNGEN
.
61
VIII.
HYPOXANTHIN
UND
XANTHIN
IN
LIQUORPROBEN
.
63
-
RICHTWERTE
IM
LIQUOR
FUER
HYPOXANTHIN
UND
XANTHIN
.
64
-
HYPOXANTHIN
UND
XANTHIN
IM
LIQUOR
BEI
MENINGITIS
/
ENZEPHALITIS
.
64
-
HYPOXANTHIN
UND
XANTHIN
IM
LIQUOR
BEI
LEUKAEMIEN
.64
IX.
DISKUSSION
.
67
IXA.
EIGENE
ANALYSENMETHODE
IM
VERGLEICH
MIT
BEKANNTEN
ANALYSENMETHODEN
DER
LITERATUR
.
67
-1.
VERWENDUNG
VON
URICASE
ZUR
PROBENVORBEREITUNG
.
67
-
2.
VERAENDERUNG
DER
NEUTRALISATIONSMETHODE
FUER
PLASMA
.
68
-
3.
MODIFIZIERTE
ANALYSENMETHODE
MITTELS
HOCHDRUCKFLUESSIGKEITS
-
CHROMATOGRAPHIE
.
69
IXB.
DISKUSSION
DER
EIGENEN
ERGEBNISSE
.
70
-1.
EIGENE
ERGEBNISSE
ZUM
HYPOXANTHINANSTIEG
IM
VOLLBLUT
NACH
DER
PROBENGEWINNUNG
.
71
-
2.
XANTHINWERTE
IM
VOLLBLUT
NACH
DER
PROBENGEWINNUNG
.
72
-
3.
SCHLUSSFOLGERUNGEN
ZUR
PLASMAPROBENGEWINNUNG
.
73
-
4.
DISKUSSION
DER
EIGENEN
ERGEBNISSE
AN
BIOLOGISCHEN
PROBEN
.
74
-
4A.
PROBLEME
DER
ERMITTLUNG
VON
RICHTWERTEN
IM
PLASMA
.
74
-
4B.
BETRACHTUNG
DER
EIGENEN
ERGEBNISSE
IM
LIQUOR
.
75
-
RICHTWERTE
.
75
-
PATIENTEN
MIT
MENINGITIS
/
ENZEPHALITIS
.
75
-
PATIENTEN
MIT
LEUKAEMIEN
.
77
X.
ZUSAMMENFASSUNG
.
79
-1.
ENTWICKLUNG
EINER
ISOKRATISCHEN
METHODE
FUER
DEN
GEBRAUCH
ZUR
ROUTINEMAESSIGEN
APPLIKATION
UND
ZUM
SCREENING
GEEIGNET
.
79
-
2.
UNTERSUCHUNG
DES
ANSTIEGS
VON
HYPOXANTHIN
IM
VOLLBLUT
NACH
DER
PROBENGEWINNUNG
.
79
-
3.
KRANKHEITSBILDER
MIT
VERAENDERUNGEN
VON
HYPOXANTHIN
-
UND
XANTHIN
-
WERTEN
IM
BEREICH
DES
ZNS
.
80
XI.
AUSBLICK
.
81
-1.
HYPOXANTHIN
-
UND
XANTHINWERTE
BEI
HYPOXISCHEN
NEUGEBORENEN
.
81
-
2.
HYPOXANTHIN
-
UND
XANTHINWERTE
BEI
PATHOLOGISCHEN
VERAENDERUNGEN
IM
BEREICH
DES
ZNS
.
81
LITERATURVERZEICHNIS
.
82
VERZEICHNIS
DER
ABBILDUNGEN
UND
TABELLEN
.
90
VERZEICHNIS
DER
VERWENDETEN
ABKUERZUNGEN
.
91
LEBENSLAUF
.
92 |
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