Beitrag zur serologischen Identifikation von Bacillus-Stämmen mit Hilfe der Co-Agglutination am Beispiel der Spezies B. cereus:
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INHALT
SEITE
VERZEICHNIS
DER
TABELLEN
9
VERZEICHNIS
DER
ABBILDUNGEN
10
A.
EINLEITUNG
11
B.
LITERATURUEBERSICHT
13
1.
KURZER
UEBERBLICK
UEBER
DIE
BEDEUTUNG
DER
GATTUNG
BACILLUS
13
2.
LEBENSMITTELVERGIFTUNGEN
UND
ANDERE
KLINISCHE
INFEKTIONEN
BEDINGT
DURCH
VERTRETER
DER
GATTUNG
BACILLUS
-
UNTER
BESONDERER
BERUECKSICHTIGUNG
DER
SPEZIES
B.
CEREUS
15
2.1.
LEBENSMITTELINFEKTIONEN
15
2.2.
LOKALE
INFEKTIONEN
19
2.2.1.
INFEKTIONEN
DES
AUGES
19
2.2.2
INFEKTIONEN
DES
RESPIRATONSTRAKTES
20
2.2.3.
INFEKTIONEN
DES
ZENTRALNERVENSYSTEMS
20
2.2.4.
WUNDINFEKTIONEN
21
2.3.
BAKTERIAEMIE,
SEPTIKAEMIE
UND
ENDOKARDITIDEN
21
2.4.
DIE
ROLLE
DER
BACILLUS-SPEZIES
IN
DER
VETERINAERMEDIZIN
22
2.4.1.
ABORTERREGER
22
2.4.2.
MASTITISERREGER
24
3.
SEROLOGISCHE
UNTERSUCHUNGEN
AM
GENUS BACILLUS
ZUR
SPEZIES-DIFFERENZIERUNG
UND
-KLASSIFIZIERUNG
25
3.1.
PROBLEMATIK
FRUEHER
SEROLOGISCHER
UNTERSUCHUNGEN
IN
TAXONOMISCHER
UND
METHODISCHER
HINSICHT
25
3.2.
ERSTE
UMFASSENDE
UNTERSUCHUNGEN
UEBER
ANTIGENUNTERSCHIEDE
ZWISCHEN
SPORE,
GEISSEL
UND
VEGETATIVER
ZELLE
30
3.3.
SEROLOGISCHE
REAKTIONEN
MIT
VERSCHIEDENEN
ANTIGEN
PRAEPARATIONEN
-
UNTER
BESONDERER
BERUECKSICHTIGUNG
DER
SPEZIES
B.
CEREUS
32
SEITE
3.3.1.
SPORENANTIGENE
32
3.3.2.
GEISSELANTIGENE
34
3.3.3.
SOMATISCHE
ANTIGENE
37
C.
EIGENE
UNTERSUCHUNGEN
45
1.
ZIELSETZUNG
UND
VERSUCHSANSATZ
45
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
46
2.1.
STAMM-MATERIAL
46
2.2.
AUFBEWAHRUNG,
KONSERVIERUNG
UND
KULTIVIERUNG
DER
STAEMME
DER
STAEMME
47
2.3.
NAEHRMEDIEN
47
2.4.
VERSUCHSTIERE
51
2.5.
DURCHFUEHRUNG
DER
SDS-POLYACRYLAMID-GEL-ELEKTROPHORESE
(SDS-PAGE)
51
2.5.1.
HERSTELLUNG
VON
ULTRASCHALLEXTRAKTEN
(USE)
51
2.5.2.
PROTEINBESTIMMUNG
DER
ULTRASCHALLEXTRAKTE
(USE)
54
2.5
3.
SDS-POLYACRYLAMID-GEL-ELEKTROPHORESE
(SDS-PAGE)
55
2.5.3.1.
PUFFER
UND
REAGENZIEN
55
2.5.3
2.
HERSTELLUNG
DER
POLYACRYLAMID-GELE
56
2.5.3.3.
PROBENVORBEREITUNG
UND
LADEN
DER
GELE
57
2.5.3.4.
ELEKTROPHORESEBEDINGUNGEN
58
2.5.4.
SILBERFAERBUNG
DER
SDS-POLYACRYLAMID-GELE
58
2.6.
GEWINNUNG
DER
IMMUNSEREN
60
2.6.1.
HERSTELLUNG
DER
ANTIGENE
60
2.6.1.1.
ERSTELLUNG
VON
WACHSTUMSKURVEN
60
2.6.1.2.
BESTIMMUNG
DES
SPORULATIONSGRADES
61
2.6.1.3.
KONSERVIERUNG
UND
AUFBEWAHRUNG
DER
ANTIGENPRAEPARATION
62
2.6.2.
IMMUNISIERUNG
DER
KANINCHEN
62
2.6.3.
TITERBESTIMMUNG
IN
DER
KBR
63
2.7.
DURCHFUEHRUNG
DER
CO-AGGLUTINATION
64
2.7.1.
BESCHREIBUNG
DER
EINGESETZTEN
IMMUNSEREN
64
2.7.11.
POOL-SEREN
64
2.7.1.2.
ABSAETTIGUNG
DER
ANTISEREN
64
SEITE
2.7.2.
HERSTELLUNG
DER
ANTIKOERPER-GEKOPPELTEN
STAPHYLOKOKKEN-SUSPENSION
65
2.7.3.
DURCHFUEHRUNG
DER
OBJEKTTRAEGERAGGLUTINATION
67
2.8.
WEITERE
SEROLOGISCHE
METHODEN
68
2.8.1.
DOT-BLOT-VERFAHHREN
68
2.8.1.1.
PUFFER
UND
REAGENZIEN
69
2.8.1.2.
IMMUNODEDEKTION
70
2.8.2.
KOMPLEMENT-BINDUNGSREAKTION
(KBR)
70
2.8.2.I.
PUFFER,
REAGENZIEN
UND
VERSUCHSVORBEREITUNG
71
2.8.2.2.
BESTIMMUNG
DER
KOMPLEMENT
UND
ANTIGEN
GEBRAUCHSVERDUENNUNG
72
2.8.2.3.
KBR-HAUPTVERSUCH
72
3.
UNTERSUCHUNGSERGEBNISSE
74
3.1.
ERGEBNISSE
DER
SDS-POLYACRYLAMID-GEL
ELEKTROPHORESE
(SDS-PAGE)
74
3.1
1.
BESCHREIBUNG
DER
ULTRASCHALLEXTRAKTE
74
3.1.2.
DARSTELLUNG
DER
GELPROFILE
74
3.2.
ERGEBNISSE
DER
SEROLOGISCHEN
UEBERPRUEFUENG
DER
BACILLUS-STAEMME
IN
DER
CO-AGGLUTINATION
77
3.2.1.
REAKTIONEN
DER
EINZELNEN
B.
CEREUS-ANTISEREN
78
3.2.1.1.
REAKTIONEN
MIT
SPEZIESHOMOLOGEN
STAEMMEN
78
3.2.1.2.
REAKTIONEN
MIT
SPEZIESHETEROLOGEN
STAEMMEN
83
3.2.2.
REAKTIONEN
DER
POOL-SEREN
85
3.2
2.1.
REAKTIONEN
MIT
SPEZIESHOMOLOGEN
STAEMMEN
86
3
2.2.2.
REAKTIONEN
MIT
SPEZIESHETEROLOGEN
STAEMMEN
90
3.2.3.
ERGEBNISSE
DER
ERWEITERTEN
UNTERSUCHUNGEN
MIT
DEM
POOL
IV-SERUM
UND
SEINES
EINSATZES
IM
DIAGNOSTISCHEN
LABOR
90
3.2.3.1.
ERGEBNISSE
DER
BIOCHEMISCHEN
UNTERSUCHUNG
90
3.2.3.2.
ERGEBNISSE
DER
SEROLOGISCHEN
UNTERSUCHUNG
91
3.3.
ERGEBNISSE
DER
UEBERPRUEFUENG
DER
IMMUNISIERUNGSSTAEMME
UND
9
SPEZIESHETEROLOGER
STAEMME
MIT
DEN
B.
CEREUS-ANTISEREN
MITTELS
WEITERER
SEROLOGISCHER
METHODEN
92
SEITE
3.3.1.
ERGEBNISSE
DES
DOT-BLOT-VERFAHRENS
IM
VERGLEICH
ZU
DENEN
DER
CO-AGGLUTINATION
93
3.3.2.
ERGEBNISSE
DER
KBR
IM
VERGLEICH
MIT
DENEN
DER
CO-AGGLUTINATION
96
D.
DISKUSSION
100
1.
STAMMAUSWAHL
UND
BIOCHEMISCHE UEBERPRUEFUNG
DER
SPEZIES
100
2.
HERSTELLUNG
VON
ANTIGEN
UND
ANTISERUM
102
3.
WERTUNG
DER
CO-AGGLUTINATION
103
3.1.
BEZIEHUNGEN
ZWISCHEN
CO-AGGLUTINATION
UND
DER
STAMMGRUPPEN
EINTEILUNG
IN
DER
SDS-PAGE
106
3.2.
SPEZIESHOMOLOGE
REAKTIONEN
107
3.3.
SPEZIESHETEROLOGE
REAKTIONEN
110
3.4.
REAKTIONEN
DER
POOLSEREN
113
4.
WERTUNG
DER
ERGEBNISSE
VON
DOT-BLOT
UND
KBR
IM
VERGLEICH ZU
DENEN
DER
CO-AGGLUTINATION
114
5.
SCHLUSSFOLGERUNGEN
117
E.
ZUSAMMENFASSUNG
118
F.
SUMMARY
120
G.
ZITIERTES
SCHRIFTUM
122
H.
ANHANG
146 |
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