Isolierung und Charakterisierung humaner monoklonaler Antikörper gegen die Strukturproteine Core und E1 des Hepatitis C Virus:
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| Language: | German |
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Aachen
Shaker
1995
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| Series: | Berichte aus der Medizin
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| Item Description: | Zugl.: Ulm, Univ., Diss., 1994 |
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
1
1.1
ENTDECKUNG
UND
EPIDEMIOLOGIE
DES
HEPATITIS
C
VIRUS
1
1.2
AUFBAU
DES
HEPATITIS
C
VIRUS
4
1.2.1
GENOMORGANISATION
4
1.2.2
STRUKTURPROTEINE
5
1.2.3
NICHT-STRUKTURPROTEINE
7
1.3
DIAGNOSTIK
8
1.4
INFEKTIONSIMMUNOLOGIE
11
1.5
HUMANE
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
13
2
MATERIAL
16
2.1
REAGENZIEN
UND
MEDIEN
16
2.1.1
ZELLKULTUR
16
2.1.2
IMMUNREAGENZIEN
16
2.1.3
PEPTIDSYNTHESE
17
2.1.4
WEITERE
REAGENZIEN
UND
CHEMIKALIEN
18
2.2
PUFFER
UND
LOESUNGEN
19
2.3
SONSTIGES
VERBRAUCHSMATERIAL
20
2.4
PRIMER
UND
PLASMIDE
21
2.5
ZELLINIEN
UND
TIERE
22
2.6
ANTI-HCV-POSITIVE
SEREN
22
3
METHODEN
23
3.1
AUSWAHL
DER
ZELLSPENDER
23
3.2
IMMORTALISIERUNG
HUMANER
B-LYMPHOZYTEN
DURCH
EBV
24
3.2.1
ISOLIERUNG
HUMANER
LYMPHOZYTEN
AUS
DEM
PERIPHEREN
BLUT
24
3.2.2
HERSTELLUNG
EINES
EBV-HALTIGEN
KULTURUEBERSTANDES
24
3.2.3
HERSTELLUNG
EINES
MONOZYTEN-KONDITIONIERTEN
MEDIUMS
24
3.2.4
EBV-INFEKTION
UND
ZELLKULTUR
25
3.3
ZELLFUSION
UND
KLONIERUNG
DER
HETEROHYBRIDOMA-ZELLEN
25
3.4
ANTI-HCV
TESTS
26
3.5
AUFBAU
EINES
ELISA
MIT
SYNTHETISCHEN
HCV-PEPTIDEN
27
3.6
CHARAKTERISIERUNG
DER
HUMANEN
MONOKLONALEN
ANTIKOERPER
28
3.6.1
ISOLIERUNG
UND
MARKIERUNG
VON
IGG-ANTIKOERPERN
28
3.6.2
ELISA
ZUR
DETEKTION
UND
QUANTIFIZIERUNG
HUMANER
28
IMMUNGLOBULINE
3.6.3
KOMPETITIVER
ELISA
ZUR
AFFINITAETSBESTIMMUNG
29
3.6.4
EPITOPANALYSEN
29
3.6.5
KOMPETITIVE
ANTIKOERPER-BINDUNGSSTUDIEN
30
3.7
EXPRESSION
DER
HCV-STRUKTURPROTEINE
CORE
UND
EL
IN
31
COS-7
ZELLEN
3.7.1
AMPLIFIKATION
UND
ISOLIERUNG
DER
PLASMIDE
PSR316X
UND
31
PSR816X
3.7.2
TRANSFEKTION
32
3.8
SDS-POLYACRYLAMIDGEL-ELEKTROPHORESE
UND
WESTERN
BLOT
32
3.9
IMMUNZYTOCHEMIE
UND
IMMUNFLUORESZENZ
33
3.10
HCV-RNA
NACHWEIS
MIT
HILFE
DER
RT/PCR
35
4
ERGEBNISSE
36
4.1
IMMORTALISIERUNG
UND
STABILISIERUNG
HUMANER
ANTIKOERPER
36
PRODUZIERENDER
B-ZELLINIEN
AM
BEISPIEL
DES
TRANSFORMATIONS
ANSATZES
1/92
4.1.1
EBV-TRANSFORMATION
UND
ANTIKOERPER-SCREENING
36
4.1.2
STABILISIERUNG
UND
KLONIERUNG
ANTIKOERPER-PRODUZIERENDER
38
ZELLINIEN
4.2
HUMANE
MONOKLONALE
ANTI-EL
ANTIKOERPER
39
4.2.1
AUFBAU
EINES
NACHWEISSYSTEMS
FUER
ANTI-EL
ANTIKOERPER
39
4.2.2
HERSTELLUNG
HUMANER
ANTI-EL
ANTIKOERPER
41
4.3
HUMANE
MONOKLONALE
ANTI-HCV
ANTIKOERPER:
42
BESTIMMUNG
DER
IMMUNGLOBULIN-SUBKLASSE
UND
DES
LEICHTKETTEN-TYPS
4.4
EPITOPSTUDIEN
43
4.4.1
EPITOPSTUDIEN
MIT
UEBERLAPPENDEN
PEPTIDEN
43
4.4.2
KOMPETITIVE
BINDUNGSSTUDIEN
MIT
DEN
MONOKLONALEN
ANTI-EP3
48
ANTIKOERPERN
4.5
REINIGUNG
UND
MARKIERUNG
DER
HUMANEN
RNAK
50
4.6
AFFINITAETSBESTIMMUNG
55
4.7
IMMUNOLOGISCHER
ANTIGEN-NACHWEIS
IN
TRANSFIZIERTEN
COS-7
56
ZELLEN
4.8
IMMUNZYTOCHEMISCHE
UNTERSUCHUNGEN
MIT
DEN
HUMANEN
MAK
61
U1/F33
UND
U1/F34
4.8.1
ANTIGEN-TEST
IN
PBMC
UND
LCL
VON
VIRAEMISCHEN
SPENDERN
61
4.8.2
ANTIGEN-TEST
AN
HISTOLOGISCHEN
LEBERPRAEPARATEN
66
4.9
CHARAKTERISIERUNG
DER
ANTI-CSI-SS
(VYLLPR)
UND
ANTI-EP3
67
IMMUNANTWORT
IN
ANTI-HCV-POSITIVEN
BLUTSPENDERN
4.9.1
ANTI-CS?
IMMUNANTWORT
67
4.9.2
ANTI-EP3
IMMUNANTWORT
69
5
DISKUSSION
71
6
ZUSAMMENFASSUNG
85
7
LITERATURVERZEICHNIS
86 |
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