Klinische, biochemische und molekularbiologische Untersuchungen zur Symptomatik, endokrinen Aktivität und Pathogenese von Nebennierenrindentumoren:
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1994
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1. EINLEITUNG 1
1.1 EINFUEHRUNG IN DAS THEMA 1
1.2 PATHOGENESE VON NEBENNIERENRINDENTUMOREN - KLINISCHE 3
ASPEKTE
1.2.1 PRAEVALENZ VON NEBENNIERENTUMOREN 3
1.2.2 DAS NEBENNIERENRINDENKARZINOM 5
1.2.3 DIFFERENTIALDIAGNOSE DER ZUFAELLIG DIAGNOSTIZIERTEN 6
NEBENNIERENRAUMFORDERUNG
1.2.4 ENDOKRINE AKTIVITAET ZUFAELLIG DIAGNOSTIZIERTER 6
NEBENNIERENTUMOREN
1.2.5 PATHOGENETISCHE FAKTOREN DER TUMORGENESE 8
1.2.5.1 ACTH-HYPERSEKRETION 9
1.2.5.2 HYPERTONIE UND DIABETES MELLITUS TYP II 10
1.2.5.3 NEBENNIERENTUMOREN BEI LI-FRAUMENI-SYNDROM, 11
BECKWITH-WIEDEMANN-SYNDROM UND MULTIPLER ENDOKRINER
NEOPLASIE TYP 1
1.3 NEBENNIERENTUMORGENESE - MOLEKULARBIOLOGISCHE 12
ASPEKTE
1.3.1 ONKOGENE UND TUMOR-SUPPRESSOR-GENE 12
1.3.2 BEDEUTUNG DER KLONALITAET FUER DIE NEBENNIERENTUMOR- 13
GENESE
1.3.3 UNTERSUCHUNG DER KLONALITAET MITTELS X-CHROMOSOM- 15
INAKTIVIERUNGSANALYSE
1.3.4 KANDIDATENGENE IN DER NEBENNIERENRINDENTUMORGENESE 17
1.3.5 GUANIN-NUKLEOTID-BINDENDE PROTEINE 17
1.3.6 DAS P53-TUMOR-SUPPRESSOR-GEN 19
2. FRAGESTELLUNG 22
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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3. PATIENTEN UND METHODEN 24
3.1 KLINISCHE UNTERSUCHUNGEN 24
3.1.1 UNTERSUCHUNG DER ENDOKRINEN AKTIVITAET ZUFAELLIG DIAGNOSTI- 24
ZIERTER NEBENNIERENTUMOREN
3.1.1.1 PATIENTEN KOLLEKTIV 24
3.1.1.2 KLINISCHE UNTERSUCHUNG UND LABORDIAGNOSTIK 24
3.1.1.3 ENDOKRINOLOGISCHE DIAGNOSTIK 25
3.1.1.4 PRAEKLINISCHES CUSHING-SYNDROM - VERGLEICH MIT KLINISCH 26
MANIFESTEM ADRENALEN CUSHING-SYNDROM
3.1.1.5 HORMONASSAYS 28
3.1.1.6 RADIOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN 28
3.1.1.7 PATHOLOGISCH-ANATOMISCHE UNTERSUCHUNGEN 29
3.1.1.8 VERLAUFSUNTERSUCHUNGEN 29
3.1.2 UNTERSUCHUNG DER 21 -HYDROXYIASEAKTIVITAET BEI ZUFAELLIG 30
DIAGNOSTIZIERTEN NEBENNIERENRINDENTUMOREN
3.1.2.1 PATIENTEN UND NORMALPERSONEN 30
3.1.2.2 ACTH-KURZTEST 31
3.1.2.3 HORMONANALYTIK 31
3.1.2.4 STATISTIK 33
3.2 MOLEKULARBIOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN 33
3.2.1 TUMOREN UND ZELLINIEN 33
3.2.1.1 TIEFGEFRORENES TUMORGEWEBE 33
3.2.1.2 PARAFFINGEWEBE 34
3.2.1.3 ZELLINIEN 34
3.2.2 DNA-EXTRAKTION 35
3.2.2.1 DNA-EXTRAKTION AUS TIEFGEFRORENEM GEWEBE UND EDTA- 35
VOLLBLUT
3.2.2.2 DNA-EXTRAKTION AUS PARAFFINBLOECKEN 35
3.2.3 KLONALITAETSUNTERSUCHUNG VON NEBENNIERENRINDEN- 35
TUMOREN MITTELS X-CHROMOSOM-INAKTIVIERUNGSANALYSE
3.2.3.1 THEORETISCHER HINTERGRUND: DIE LYON-HYPOTHESE 35
3.2.3.2 PATIENTEN 36
3.2.3.3 KLONALITAETSANALYSE MITTELS DES HYPERVARIABLEN LOKUS 37
DXS255
3.2.3.4 DNA-VERDAUUNG 40
3.2.3.5 DNA-TRANSFER, PRAEHYBRIDISIERUNG, HYBRIDISIERUNG 40
3.2.3.6 KLONALITAETSANALYSE MITTELS PCR-AMPLIFIKATION EINES PGK- 41
POLYMORPHISMUS
3.2.4 UNTERSUCHUNG VON NEBENNIERENRINDENTUMOREN AUF DAS 43
VORLIEGEN VON G-PROTEIN-MUTATIONEN IN DER ALPHA-KETTE
VON GS UND GI
2
3.2.4.1 PATIENTEN UND TUMOREN 43
3.2.4.2 STRATEGIE DER AMPLIFIKATION 44
3.2.4.3 OLIGONUKLEOTID-PRIMER 45
3.2.4.4 POLYMERASE-KETTEN-REAKTION 45
3.2.4.5 DIREKTES SEQUENZIEREN DES PCR-PRODUKTES 47
3.2.5 UNTERSUCHUNGEN ZUM P53-TUMOR-SUPPRESSOR-GEN 47
3.2.5.1 PATIENTEN UND TUMOREN 47
3.2.5.2 STRATEGIE DER SUCHE NACH P53-MUTATIONEN 48
3.2.5.3 IMMUNHISTOCHEMISCHER NACHWEIS VON P53 49
3.2.5.4 ALLEIVERLUST DES P53-GENS: UNTERSUCHUNG DES HYPER- 49
VARIABLEN LOKUS D17S5 (PYNZ 22)
3.2.5.5 PCR-AMPLIFIKATION VON EXON 5 BIS 8 50
3.3 ETHIKKOMMISSION 52
4. ERGEBNISSE 53
4.1 KLINISCHE UNTERSUCHUNGEN 53
4.1.1 GESCHLECHTS- UND ALTERSVERTEILUNG VON PATIENTEN MIT 53
ZUFAELLIG DIAGNOSTIZIERTEN NEBENNIERENTUMOREN
4.1.2 LOKALISATION UND TUMORGROESSE DER ZUFAELLIG DIAGNOSTI- 53
ZIERTEN NEBENNIERENRAUMFORDERUNG
4.1.3 KARDIOVASKULAERES RISIKOPROFIL VON PATIENTEN MIT ZUFAELLIG 53
DIAGNOSTIZIERTEN NEBENNIERENTUMOREN
4.1.4 ENDOKRINE AKTIVITAET ZUFAELLIG DIAGNOSTIZIERTER 55
NEBENNIERENTUMOREN
4.1.5 VERGLEICH VON PRAEKLINISCHEM CUSHING-SYNDROM MIT 56
KLINISCH MANIFESTEM ADRENALEN CUSHING-SYNDROM
4.1.5.1 KLINISCHE DATEN 56
4.1.5.2 ENDOKRINE BEFUNDE 58
4.1.5.3 HISTOLOGISCHE BEFUNDE 64
4.1.5.4 POSTOPERATIVER VERLAUF 65
4.1.6 PATHOLOGISCH-ANATOMISCHE KLASSIFIKATION VON ZUFAELLIG 66
DIAGNOSTIZIERTEN NEBENNIERENTUMOREN
4.1.7 21 -HYDROXYLASE-AKTIVITAET BEI PATIENTEN MIT ZUFAELLIG 68
DIAGNOSTIZIERTEN NEBENNIERENRINDENADENOMEN
4.1.7.1 ERGEBNISSE DER MULTISTEROIDANALYSE BEI NORMALPERSONEN 68
UND PATIENTEN MIT NEBENNIERENTUMOREN
4.1.7.2 HAEUFIGKEIT DES 21 -HYDROXYLASEMANGELS 71
4.2 MOLEKULARBIOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN 73
4.2.1 KLONALITAETSANALYSE ADRENOKORTIKALER NEOPLASIEN 73
4.2.1.1 DIFFUSE UND KNOTIGE HYPERPLASIEN 73
4.2.1.2 NEBENNIERENADENOME UND-KARZINOME 74
4.2.1.3 DIE BILATERALE, MAKRONODULAERE, ACTH-UNABHAENGIGE 78
NEBENNIERENRINDENHYPERPLASIE
4.2.2 G-PROTEIN-MUTATIONEN IN NEBENNIERENRINDENTUMOREN 79
4.2.2.1
CODON
201
UND
227
VON
GAS 80
4.2.2.2
CODON
179
UND
205
VON
GAI
2
80
4.2.3 P53-MUTATIONEN IN NEBENNIERENRINDENTUMOREN 83
4.2.3.1 P53-UEBEREXPRESSION IN ADRENOKORTIKALEN NEOPLASIEN 83
4.2.3.2 ALLELVERLUST VON 17P 13.3 85
4.2.3.3 PCR-AMPLIFIKATION UND SEQUENZANALYSE VON 86
EXON 5 - 8
5. DISKUSSION 90
5.1 KLINISCHE UNTERSUCHUNGEN 90
5.1.1 KLINISCHE BEFUNDE BEI PATIENTEN MIT ZUFAELLIG DIAGNOSTI- 90
ZIERTEN NEBENNIERENTUMOREN
5.1.2 KARDIOVASKULAERE RISIKOFAKTOREN 91
5.1.3 ENDOKRINE AKTIVITAET DER ZUFAELLIG DIAGNOSTIZIERTEN 93
NEBENNIERENRAUMFORDERUNG
5.1.4 DAS PRAEKLINISCHE CUSHING-SYNDROM IM VERGLEICH ZUM 94
KLINISCH MANIFESTEN ADRENALEN CUSHING-SYNDROM
5.1.5 DIAGNOSTISCHES UND THERAPEUTISCHES VORGEHEN BEI DER 97
ZUFAELLIG DIAGNOSTIZIERTEN NEBENNIERENRAUMFORDERUNG
5.1.6 21-HYDROXYLASE-AKTIVITAET UND NEBENNIERENRINDEN- 100
TUMOREN
5.2 MOLEKULARBIOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN 103
5.2.1 KLONALITAET VON NEBENNIERENRINDENPROZESSEN 103
5.2.2 G/P2-MUTATIONEN BEI NEBENNIERENTUMOREN 108
5.2.3 P53-MUTATIONEN IN NEBENNIERENTUMOREN 110
5.2.4 ANDERE MOLEKULARE MECHANISMEN DER 113
NEBENNIERENTUMORGENESE
5.2.5 EIN MODELL DER NEBENNIERENTUMORGENESE 115
6. ZUSAMMENFASSUNG 117
7.
LITERATURVERZEICHNIS 121 |
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