Durchflusszytometrische und elektronenmikroskopische Untersuchungen an Zellkulturen zur Zytotoxizität medizinisch genutzter Stosswellen:
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| Published: |
Stuttgart
Biologisches Inst.
1994
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| Series: | Biologisches Institut <Stuttgart, Universität>: Arbeiten und Mitteilungen aus dem Biologischen Institut der Universität Stuttgart
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INHALTSVERZEICHNIS
ZUSAMMENFASSUNG 9
EINLEITUNG 11
MATERIAL METHODEN 15
Zellkultur 15
Monolayer-Kulturen 15
Mykoplasmentest 17
Wachstumskurven von Monolayerkulturen 17
Sphäroid-Kulturen 18
Stoßwellen-Behandlung 19
Theorie der Stoßwelle 19
Experimenteller Aufbau 23
Durchflußzytometrie 24
Dosis-Effekt-Kurven 25
Messung der Membran-Integrität 27
Messung freier Radikale 27
Mitochondrienpotential-Messung 29
Kalzium-Bestimmung 31
Statistik 32
Licht- und elektronenmikroskopische Histologie 33
Dünnschnitte 33
Zytochemischer Kalzium-Nachweis 35
Licht- und Elektronenmikroskopie 36
ERGEBNISSE 39
Stabilität der Zellinie MGH-Ul 39
Durchflußzytometrie 44
Vitalitätsmessung 44
Messung freier Radikale 51
Mitochondrienpotential-Messung 54
Kalzium-Bestimmung 60
licht- und Elektronenmikroskopie 67
i Semidünnschnitte 67
; Ultradünnschnitte 68
I Kalzium-Nachweis 73
I
6
DISKUSSION 77
Instabilität der Zellinie MGH-Ul 77
Vitalitätstests 79
Kalziumionen und freie Radikale 80
Kavitationserzeugte freie Radikale 82
Durchflußzytometrische Kalziumbestimmung 85
Kalzium und Mitochondrien 86
Potentialabhängige Fluoreszenzfarbstoffe 89
Zellschädigung und extrazelluläres Kalzium 91
Histopathologische Befunde 93
Histochemischer Kalziumnachweis 96
Schlußfolgerung 98
LITERATUR 99
ANHANG 109
DANKSAGUNGEN 115
LEBENSLAUF 117
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