Häutungshemmende Hormone des Amerikanischen Flusskrebses Orconectes Limosus:
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1994
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INHALT
VERZEICHNIS DER ABKUERZUNGEN
1. EINLEITUNG 1
2. MATERIAL UND METHODEN 8
2.1. VERSUCHSTIERE 8
2.2. CHEMIKALIEN 8
2.3. REZEPTE HAEUFIG VERWENDETER LOESUNGEN 8
2.4. GEWINNUNG VON POLYKLONALEN ANTISEREN GEGEN ECDYSTEROIDE 10
2.4.1. HERSTELLUNG VON ECDYSON-3-HEMISUCCINAT 10
2.4.2. KOPPLUNG DES ECDYSON-HEMISUCCINATES AN THYROGLOBULIN 10
2.4.3. IMMUNISIERUNG DER KANINCHEN 10
2.4.4. GEWINNUNG DER SEREN 11
2.5. QUANTITATIVE BESTIMMUNG DER ECDYSTEROIDE 11
2.5.1. RADIOIMMUNOASSAY (RIA) 11
2.5.2. ENZYMIMMUNOASSAY (EIA) 12
2.6. PRAEPARATION DES BIOLOGISCHEN MATERIALS 13
2.6.1. SINUSDRUESEN UND SINUSDRUESENEXTRAKTION 13
2.6.2. Y-ORGANE UND ORGANKULTURE 13
2.6.3. ECDYSTEROIDE IN DER HAEMOLYMPHE 14
2.6.4. PROTEINBESTIMMUNG 14
2.6.5.
IN-VIVO-INJEKTIONEN 14
2.7. HOCHDRUCKFLUESSIGKEITSCHROMATOGRAPHIE (HIGH PERFORMANCE
LIQUID CHROMATOGRAPHY, HPLC) 14
2.7.1. UMKEHRPHASEN-HPLC (REVERSED PHASE HPLC, RP-HPLC) 14
2.7.2. IONENAUSTAUSCH UND RP-HPLC 15
2.7.3. SMART-SYSTEM-HPLC 15
2.8. MASSENSPEKTROSKOPIE 15
3. ERGEBNISSE 16
3.1. QUANTITATIVE BESTIMMUNG VON ECDYSTEROIDEN 16
3.1.1. ANTIGEN-HERSTELLUNG 16
3.1.2. KOPPLUNGSRATE DES ECDYSTEROIDS AN THYROGLOBULIN 16
3.1.3. CHARAKTERISIERUNG DER ANTISEREN IM PO-EIA 16
3.1.4. CHARAKTERISIERUNG DER ANTISEREN IM RIA 26
3.1.5. CHARAKTERISIERUNG DER ANTISEREN IM ACH-EIA 29
3.2. IDENTIFIZIERUNG HAEUTUNGSHEMMENDER HORMONE 30
3.2.1.
IN-VIVO-TEST 30
3.2.2.
IN-VITRO-TZSI 31
3.2.2.1. /N-WTRO-WIRKUNG VON RP-HPLC-FRAKTIONEN 34
3.2.2.2.
IN-WYRO-WIRKUNG VON IE/RP-HPLC-FRAKTIONEN 36
3.2.3. ENTWICKLUNG EINES SEMI-M
VIVO-TESTS 37
3.2.3.1. SAISONALE ABHAENGIGKEIT DES SEMI-RN-WVO-TESTS 40
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/943292093
41
3.2.3.2. SEMI-I/I-WW-WIRKUNG VON RP-HPLC-FRAKTIONEN
3.2.4. BESTIMMUNG DES MOLEKULARGEWICHTES DER BEIDEN HEMMENDEN
FRAKTIONEN CHH II UND CHH VI SOWIE VON CHH I 47
3.3. TRENNUNG VON SINUSDRUESENMATERIAL AUS VERSCHIEDENEN HAEUTUNGSSTADIEN
51
4. DISKUSSION 55
4.1. QUANTITATIVE BESTIMMUNG DER ECDYSTEROIDE 55
4.1.1. BEURTEILUNG DER ANTISEREN 55
4.2. BIOTESTSYSTEME 57
4.2.1. /N-WW-TEST 58
4.2.2.
IN-VITRO-TEST 58
4.2.3.
SEMI-IN-VIVO-TEST 60
4.3. BIOCHEMISCHE CHARAKTERISIERUNG 62
4.4. BETRACHTUNGEN ZUR BIOCHEMIE UND PHYSIOLOGIE DES POLYMORPHISMUS
DER UNTERSUCHTEN NEUROHORMONE 64
4.5. TRENNUNG VON SINUSDRUESENEXTRAKTEN AUS VERSCHIEDENEN HAEUTUNGSSTADIEN
66
4.6. PERSPEKTIVEN 67
5. ZUSAMMENFASSUNG 68
6. LITERATUR
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