Über die Radiolyse von Histonen:
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINFUEHRUNG
1
2
THEORETISCHE
GRUNDLAGEN
4
2.1
HISTONE
.
4
2.2
WASSERRADIOLYSE
.
11
2.3
SDS
-
PAGE
.
15
2.4
HPLC
.
20
2.5
PULSRADIOLYSE
.
26
3
EXPERIMENTELLER
TEIL
32
3.1
HERSTELLUNG
UND
BESTRAHLUNG
DER
PROBEN
.
32
3.1.1
ANSETZEN
DER
BESTRAHLUNGSPROBE
.
32
3.1.2
BESTRAHLUNGSTOPF
.
32
3.1.3
BEGASEN
.
33
3.1.4
BESTRAHLEN
UND
PROBENENTNAHME
.
34
3.2
SDS-PAGE
.
35
3.2.1
VORBEREITEN
DER
ELEKTROPHORESE
.
35
3.2.2
DURCHFUEHRUNG
DER
ELEKTROPHORESE
.
36
3.2.3
NACHBEHANDLUNG
DER
GELE
.
37
3.2.4
DENSITOMETRISCHE
AUSWERTUNG
.
38
3.3
HPLC
.
40
3.3.1
VORBEREITEN
DER
PROBEN
FUER
DIE
HPLC
-
METHODE
40
3.3.2
AUFTRAGUNG
UND
AUFTRENNUNG
DER
PROBEN
.
41
3.3.3
DETEKTION
DER
ELUIERTEN
PROBERN
.
42
3.3.4
AUSWERTUNG
DER
CHROMATOGRAMME
.
42
3.4
PULSRADIOLYSE
.
43
3.4.1
HERSTELLUNG
DER
MESSLOESUNG
.
43
3.4.2
BESTRAHLUNG
DER
MESSPROBEN
.
45
3.4.3
AUSWERTUNG
DER
MESSERGEBNISSE
.
45
4
ERGEBNISSE
46
4.1
SDS-PAGE
.
46
4.1.1
MOLEKULARGEWICHTSBESTIMMUNG
.
47
4.1.2
VERDUENNUNGSREIHE
VON
HISTONEN
.
50
4.1.3
BESTRAHLUNG
UNTER
N
2
.
51
4.1.4
BESTRAHLUNG
UNTER
N
2
O
.
58
4.1.5
BESTRAHLUNG
UNTER
LUFT
.
61
4.1.6
ABBAU
DER
KERNHISTONE
UNTER
VERSCHIEDENEN
GAS
BEDINGUNGEN
.
67
4.1.7
VERGLEICH
MIT
ANDEREN
PROTEINEN
.
68
4.2
HPLC
.
72
4.2.1
MOLEKULARGEWICHTSBESTIMMUNG
.
73
4.2.2
VERDUENNUNGSREIHE
VON
HISTONEN
.
76
4.2.3
BESTRAHLUNG
UNTER
N
2
.
77
4.2.4
BESTRAHLUNG
UNTER
N
2
O
.
80
4.2.5
BESTRAHLUNG
UNTER
LUFT
.
82
4.2.6
ABBAU
DER
HISTONE
BEI
VERSCHIEDENEN
GASBE
DINGUNGEN
.
88
4.2.7
ERGEBNISSE
MIT
DER
SUPERDEX
75
-
SAEULE
.
89
4.2.8
GEGENUEBERSTELLUNG
DER
ERGEBNISSE
VON
SDS
-
PAGE
UND
HPLC
.
91
4.3
PULSRADIOLYSE
.
93
4.3.1
REAKTIONSKINETISCHE
MESSUNGEN
.
93
4.3.2
VERGLEICH
ZWISCHEN
PO4
UND
NACLO4
-
PUFFER
.
95
4.3.3
PULSRADIOLYSE
BEI
VERSCHIEDENEN
SALZKONZENTRA
TIONEN
.
96
4.3.4
EINFLUSS
DER
VERSCHIEDENEN
PH-WERTE
DES
PUFFERS
97
4.3.5
VERGLEICH
MIT
ANDEREN
PROTEINEN
.
98
5
DISKUSSION
100
5.1
AUSWERTUNG
.
100
5.1.1
SDS-PAGE
.
100
5.1.2
HPLC
.
107
5.1.3
VERGLEICH
DER
VERSCHIEDENEN
AUS
WERTE
VERFAHREN
114
5.2
INTERPRETATION
DER
ERGEBNISSE
.
116
5.2.1
REAKTIONEN
DER
PRIMAERRADIKALE
MIT
PROTEINEN
.
116
5.2.2
RADIOLYSE
VON
PROTEINEN
UNTER
ANAEROBEN
GAS
BEDINGUNGEN
.
120
5.2.3
RADIOLYSE
VON
PROTEINEN
UNTER
AEROBEN
GASBE
DINGUNGEN
.
124
5.2.4
EINFLUSS
VON
LONENSTAERKE
UND
PH
AUF
DIE
RADIO
LYSE
VON
HISTONEN
.
131
5.2.5
BISHERIGE
ERGEBNISSE
UEBER
DIE
RADIOLYSE
VON
HISTONEN
.
136
5.3
AUSBLICK
.
138
A
CHEMISCHE
DOSIMETRIE
140
B
GERAETE
UND
MATERIALIEN
142
C
VORBEREITEN
DER
ELEKTROPHORESE
146
D
DENSITOGRAMME
UND
CHROMATOGRAMME
151
LITERATURVERZEICHNIS
158 |
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