Die Wirkung von Glutathion auf den Herzmuskel:
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1994
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INHALTSVERZEICHNIS
TEIL I: GLUTATHION IN DER REPERFUSION
1. EINLEITUNG 2
1.1. GLUTATHION. 2
1.2. DIE WIRKUNG VON GLUTATHION AUF DAS MYOKARD. 2
1.3. DER POSTISCHAEMISCHE REPERFUSIONSSCHADEN. 3
1.3.1. DIE FUER DEN REPERFUSIONSSCHADEN
VERANTWORTLICHEN MECHANISMEN. 4
1. DIE VERKETTUNG DER ZWEI FUEHRENDEN
HYPOTHESEN FUER DIE ENTSTEHUNG VON
REPERFUSIONSSCHADEN. 5
1.3.2. DIE ZELLULAEREN SCHUTZMECHANISMEN GEGEN
DIE REPERFUSIONSSCHAEDEN. 3
2. FRAGESTELLUNG 13
3. MATERIAL UND METHODEN 15
3.1. DIE CHIRURGISCHE PRAEPARATION. 16
3.2. ZEITLICHER VERSUCHSABLAUF. 18
3.3.1. DIE MESSUNGEN. 19
3.3.2. DER GLOBALE UND REGIONALE BLUTFLUSS. 19
3.3.3. DIE ULTRASCHALLMIKROMETRIE. 19
3.3.4. DIE BIOCHEMISCHEN PARAMETER. 20
3.4.1. SUBSTANZEN. 20
3.4.2. APPARATE, INSTRUMENTE UND KATHETER. 21
3.4.3. PROGRAMME. 21
3.5. STATISTIK. 21
4. ERGEBNISSE 22
4.1. DER GLUTATHIONGEHALT IM BLUT UND IM MYOKARD. 22
4.2. DAS AUSMASS DER MYOKARDISCHAEMIE. 24
4.3. HAEMODYNAMISCHE UND BIOCHEMISCHE DATEN. 25
4.4. PARAMETER DER GLOBALEN MYOKARDKONTRAKTILITAET. 27
4.5. REGIONALE SEGMENTVERKUERZUNG UND
DRUCK-LAENGEN-DIAGRAMM. 29
5. DISKUSSION 36
6. ZUSAMMENFASSUNG 40
7. LITERATURVERZEICHNIS 42
VI
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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TEIL II: DIE GLUTATHIONAUFNAHME IN ISOLIERTEN MYOZYTEN
1. EINLEITUNG 47
1.1. GLUTATHION.
47
1.2. DYNAMISCHE ASPEKTE DES GLUTATHIONSTOFFWECHSELS
UND DES GLUTATHIONTRANSPORTES. 4G
1.2.1. DER Y-GLUTAMYL-ZYKLUS. 4G
1.2.2. DER GLUTATHIONTRANSPORT. 51
1.3. GLUTATHION UND CALCIUMHOMOEOSTASE. 53
1.3.1. DIE CALCIUMHOMOEOSTASE. 53
1.3.2. WIE BEEINFLUSST GLUTATHION DEN
CALCIUM-HAUSHALT?. 55
2. FRAGESTELLUNG 55
3. MATERIAL UND METHODEN GG
3.1. CHEMIKALIEN UND SUBSTANZEN. 60
3.2. LOESUNGEN. 60
3.2.1. LOESUNG ZUR ENZYMATISCHEN ISOLIERUNG
VON HERZMUSKELZELLEN: SPUELLOESUNG. 60
3.2.2. LOESUNG ZUR ENZYMATISCHEN ISOLIERUNG VON
HERZMUSKELZELLEN: ENZYMLOESUNG. 60
3.2.3. GLUTATHION-AUFNAHMELOESUNG. 60
3.2.4. WASCHLOESUNG. 61
3.3. DIE ENZYMATISCHE PRAEPARATION VON HERZMUSKELZELLEN
DER RATTE. 61
3.4. DIE ZELLZAEHLUNG. 63
3.5. MESSUNG DER GLUTATHIONAUFNAHME. 65
3.6. STATISTIK. 66
4. ERGEBNISSE 67
4.1. DIE ABHAENGIGKEIT DER GSSG-AUFNAHME IN
ENZYMATISCH ISOLIERTEN MYOZYTEN VON DER
GSSG-KONZENTRATION. 67
4.2. DER EINFLUSS DES EXTRAZELLULAEREN CALCIUMS AUF DIE
GSSG-AUFNAHME. 69
4.2.1. GSSG-AUFNAHME-VERSUCHE MIT
VERSCHIEDENEN CA2+-KONZENTRATIONEN. 69
4.2.2. EGTA-ZUGABE NACH VERSCHIEDENEN
GSSG-INKUBATIONSZEITEN. 71
4.2.3. GSSG-AUFNAHME SUPERKONTRAHIERTER ZELLEN. 72
4.3. DIE ABHAENGIGKEIT DER GSSG-AUFNAHME VON
SH-REAGENZIEN. 73
4.3.1. DER EINFLUSS VON DTNB AUF DIE
GSSG-AUFNAHME. 73
4.3.2. DER EINFLUSS VON MERCAPTOETHANOL AUF
DIE GSSG-AUFNAHME. 74
VII
5. DISKUSSION
75
5.1. DIE KONZENTRATIONSABHAENGIGE GLUTATHIONAUFNAHME. 75
5.2. DER EINFLUSS VON CALCIUMIONEN AUF DIE
GLUTATHIONAUFNAHME. 76
5.3. DIE HEMMENDE WIRKUNG VON SH-REAGENZIEN AUF
DIE AUFNAHME VON OXIDIERTEM GLUTATHION. 77
5.3.1. DTNB. 77
5.3.2. MERCAPTOETHANOL. 77
6
. ZUSAMMENFASSUNG 79
7. ANHANG 81
7.1.
DIE MORPHOLOGIE DER MYOZYTEN. 81
8
. LITERATURVERZEICHNIS 83
VIII
TEIL III: INTRAZELLULAERE WIRKUNG VON GLUTATHION:
CALCIUMSENSITIVIERENDER EFFEKT AUF ISOLIERTE
KONTRAKTILE STRUKTUREN
1. EINLEITUNG 88
1.1. DER KONTRAKTILE APPARAT UND DER QUERBRUECKENZYKLUS. 88
1.2. BEZIEHUNG ZWISCHEN CA2+-KONZENTRATION UND KRAFT
ENTWICKLUNG IM HERZMUSKEL. CA2+-SENSITIVIERUNG. 90
1.3. REPERFUSION UND KONTRAKTILE DYSFUNKTION. 94
1.4. FRAGESITLLUNG. 95
2. MATERIAL UND METHODEN 96
2.1. VERWENDETE CHEMIKALIEN. 96
2.2. SCHWEINEHERZPRAEPARATE. 97
2.3. HAEUTUNG DER HERZMUSKELFASERN. 97
2.4. AUFBEWAHRUNG DER GEHAEUTETEN HERZMUSKELFASERN. 97
2.5. DIE MUSKELFASERPRAEPARATE. 97
2.6. DER VERSUCHSAUFBAU ZUR ISOMETRISCHEN KRAFTMESSUNG. 97
2.7. KONTRAKTIONEN BEI VERSCHIEDENEN CALCIUMSTUFEN
MIT UNTERSCHIEDLICHEN SUBSTANZEN. 99
2.8. LOESUNG ZUR BESTIMMUNG DER ATPASE-AKTIVITAET. 99
2.9. ZUGABE EINES GLUTATHION-REDUZIERENDEN
ENZYMSYSTEMS IN DIE BADELOESUNG. 100
2.10. DIE VERKUERZUNGSGESCHWINDIGKEIT. 100
2.10.1. MESSAPPARATUR ZUR BESTIMMUNG DER MAXIMALEN
LASTFREIEN VERKUERZUNGSGESCHWINDIGKEIT. 100
2.10.2. MESSUNG DER MAXIMALEN LASTFREIEN VERKUERZUNGS-
GESCHWINDIGKEIT (VMAX). 102
2.11. BESTIMMUNG DER ATPASE-AKTIVITAET IN GEHAEUTETEN
HERZMUSKELFASERN. 102
2.12. STATISTIK. 105
3. ERGEBNISSE 106
3.1. VERSUCHSPROTOKOLL. 106
3.2. WIRKUNG VON GSH UND GSSG AUF DIE GEHAEUTETE
HERZMUSKELFASER. 108
3.3. DOSISABHAENGIGE WIRKUNG VON REDUZIERTEM UND
OXIDIERTEM GLUTATHION. 110
3.4. ZUGABE EINES REDUZIERENDEN ENZYMSYSTEMS IN DIE
BADELOESUNG. 111
3.5. EINFLUSS VON REDUZIERTEM UND OXIDIERTEM GLUTATHION
AUF DIE MAXIMALE LASTFREIE VERKUERZUNGSGESCHWINDIGKEIT. 114
IX
3.6. VERAENDERUNG DER ATPASE-AKTIVITAET UNTER DEM
EINFLUSS VON GSH UND GSSG. 1 |SS
4. DISKUSSION 120
5. ZUSAMMENFASSUNG UND AUSBLICK 123
6
. LITERATURVERZEICHNIS 125
SYNOPSIS 131
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 132
VEROEFFENTLICHUNGEN 133
LEBENSLAUF: KERSTIN SCHWARZ 134
LEBENSLAUF: STEFAN BAUER 136
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