Replikation des mobilen Introns (plDNA) in Mitochondrien von Podospora anserina: Mechanismen und Auswirkungen auf die Alterung des Pilzes
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Berlin u.a.
Cramer
1994
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INHALT
INHALT
I.
THEORETISCHER
TEIL:
ALTERUNG
IN
HOEHEREN
EUKARYONTEN
SEITE
1.
EINLEITUNG
1
2.
ALTERUNGSTHEORIEN
2
2.1.
THEORIEN
DES
PROGRAMMIERTEN
ALTERNS
2
2.2.
THEORIEN
DES
STOCHASTISCHEN
ALTERNS
3
3.
MITOCHONDRIALE
SCHAEDIGUNGEN
6
3.1.
ENTSTEHUNG
MITOCHONDRIALER
SCHAEDEN
6
3.2.
MECHANISMEN
ZUR
SCHADENSVERHINDERUNG
8
3.3.
MECHANISMEN
ZUR
SCHADENSBESEITIGUNG
9
3.4.
SCHADENSAKKUMULATION
10
4.
ALTERSABHAENGIGE
VERAENDERUNGEN
DER
MITOCHONDRIEN
12
4.1.
HISTOLOGISCHE
UND
BIOCHEMISCHE
VERAENDERUNGEN
12
4.2.
SCHAEDIGUNGEN
DURCH
KOVALENTE
MODIFIKATIONEN
DER
MTDNA
14
4.3.
MUTATIONEN
DER
MTDNA
15
4.3.1.
PUNKTMUTATIONEN
17
4.3.2.
REKOMBINATIONEN
DER
MTDNA
20
5.
EINFLUSS
DES
ZELLKERNES
AUF
MITOCHONDRIEN
UND
ALTERUNG
22
6.
AUSBLICK
23
N.
PRAKTISCHER
TEIL:
DIE
REPLIKATION
DES
MOBILEN
INTRONS
(PLDNA)
IN
DEN
MITOCHONDRIEN
VON
PODOSPORA
ANSERINA:
MECHANISMUS
UND
AUSWIRKUNGEN
AUF
DIE
ALTERUNG
DES
PILZES
1.
PROBLEMSTELLUNG
26
1.1.
NUKLEARE
BEEINFLUSSUNG
DER
ALTERUNG
VON
PODOSPORA
26
1.2.
CYTOPLASMATISCHE
BEEINFLUSSUNG
DER
ALTERUNG
VON
PODOSPORA
27
1.3.
ALTERSABHAENGIGE
VERAENDERUNGEN
DER
MTDNA
28
1.4.
REJUVENALISLERUNG
GEALTERTER
STAEMME
30
1.5.
BEEINFLUSSUNG
DER
ALTERUNG
DURCH
DIE
RESPIRATION
31
1.6.
ZIELSETZUNG
32
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
34
2.1.
STAEMME
34
2.2.
NAEHRMEDIEN
34
2.3.
KULTIVIERUNGSBEDINGUNGEN
34
2.4.
CHEMIKALIEN
UND
GERAETE
35
2.5.
PROTEINBESTIMMUNG
35
2.6.
MITOCHONDRIENPRAEPARATION
35
2.7.
IN
ORGANEFLO-REPLIKATION
36
2.8.
MTDNA-PRAEPARATIONEN
36
2.8.1.
MTDNA-PRAEPARATION
ZUR
SOUTHERN-ANALYSE
36
INHALT
2.8.2.
MTDNA-PRAEPARATION
ZUR
2D-GELELEKTROPHORESE
37
2.9.
GELELEKTROPHORESE
37
2.9.1.
EINDIMENSIONALE
GELELEKTROPHORESE
37
2.9.2.
ZWEIDIMENSIONALE
GELELEKTROPHORESE
ZUM
NACHWEIS
VON
REPLIKATIONSINTERMEDIATEN
37
2.9.2.1.
PRINZIP
DER
2D-ELEKTROPHORESE
38
2.9.2.2.
DURCHFUEHRUNG
DER
2D-ELEKTROPHORESE
40
2.10.
SOUTHERN-ANALYSE
GELELEKTROPHORETISCH
AUFGETRENNTER
MTDNA
40
2.11.
HERSTELLUNG
MARKIERTER
SONDEN
FUER
DIE
SOUTHERN-ANALYSE
40
2.12.
ISOLIERUNG
VON
DNA
AUS
AGAROSEGELEN
41
2.13.
PUFFER
UND
LOESUNGEN
41
3.
ERGEBNISSE
42
3.1.
NACHWEIS
DER
AUTONOMEN
REPLIKATION
DER
PLDNA
42
3.2.
DIE
IN
ORGANEZFO-REPLIKATION
DER
MTDNA
VON
P.
ANSERINA
45
3.2.1.
SYSTEMCHARAKTERISIERUNG
45
3.2.2.
ANALYSE
DER
PLDNA-REPLIKATION
IM
WILDTYP
SL
48
3.2.2.1.
PLDNA-VERMEHRUNG
IN
VERSCHIEDEN
ALTEN
MYZELIEN
48
3.2.2.2.
PLDNA-VERMEHRUNG
IN
ABHAENGIGKEIT
VOM
KREUZUNGSTYP
52
3.2.2.3.
PLDNA-VERMEHRUNG
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
DER
GLUCOSEKONZENTRATION
54
3.2.2.4.
PLDNA-VERMEHRUNG
BEI
HEMMUNG
DER
CYTOCHROM
C-OXIDASE
BZW.
DER
ALTERNATIVEN
OXIDASE
55
4.
DISKUSSION
58
4.1.
REPLIKATIONSFAEHIGKEIT
DER
PLDNA
58
4.2.
DATEN
DER
IN
ORGANELFO-REPLIKATION
DER
PLDNA
62
4.2.1.
SYSTEMCHARAKTERISIERUNG
63
4.2.2.
DIE
VERMEHRUNG
DER
PLDNA
IM
STAMM
SL
63
4.3.
ALTERUNGSMODELL
FUER
PODOSPORA
ANSERINA
66
4.4.
FOLGERUNGEN
70
4.4.1.
WACHSTUM
DES
PILZES
IN
BEZIEHUNG
ZUR
PLDNA-ANREICHERUNG
70
4.4.2.
INFEKTIOSITAET
DER
SENESZENZ
71
4.5.
EINFLUSS
VON
RADIKALINDUZIERTEN
SCHAEDEN
AUF
DIE
ALTERUNG
VON
PODOSPORA
71
5.
ZUSAMMENFASSUNG
74
6.
LITERATURVERZEICHNIS
75
7.
ANHANG
92 |
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