Untersuchungen zur insulinabhängigen Aktivierung der Insulinrezeptorkinase in intakten kultivierten Zellen: Effekte von Insulin und Dexamethason
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
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1993
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INHALT
SEITE
1.
EINLEITUNG
.
1
2.
MATERIALIEN
.
8
3.
METHODEN
.
11
3.1
ZELLKULTUR
3.1.1
ZELLKULTUR
VON
HIRC-ZELLEN
.
12
3.1.2
SUBCLONLERUNG
DER
HIRC-ZELLEN
.
14
3.1.3
RATTENHEPATOZYTEN
IN
PRIMAERKULTUR
.
15
3.2
KULTUR
VON
A-IR
1-ZELLEN
.
15
3.3
DURCHFUEHRUNG
DER
VERSUCHE
ZUR
MESSUNG
DER
INSULINABHAENGIGEN
AKTIVIERUNG
DER
INSULIN
REZEPTORKINASE
IN
INTAKTEN
ZELLEN
.
16
3.3.1
INKUBATION
UND
SOLUBILISIERUNG
VON
ZELLEN
.
17
3.3.2
PARTIELLE
REINIGUNG
DER
INSULINREZEPTOREN
DURCH
WEIZENKEIMAGGLUTININ
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
.
.
18
3.3.3
MESSUNG
DER
INSULINBINDUNG
AN
GELOESTE
INSULINREZEPTOREN
.
19
3.3.4
DURCHFUEHRUNG
DER
PHOSPHORYLIERUNGSREAKTIONEN
.
21
3.4
BESTIMMUNG
DER
INSULINSTIMULIERTEN
AUTO
PHOSPHORYLIERUNG
VON
PARTIELL
GEREINIGTEN
INSULINREZEPTOREN
.
24
3.5
MESSUNG
DER
INSULINBINDUNG
AN
INSULINREZEPTOREN
VON
INTAKTEN
ZELLEN
.
25
3.6
BESTIMMUNG
DER
ZELLZAHL
UND
ZELLGROESSENVERTEILUNG
.
26
3.7
PROTEINBESTIMMUNG
.
26
3.8
MESSUNG
DER
DEGRADATION
VON
INSULIN
.
27
3.9
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
INSULINREZEPTOREN
.
28
3.10
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
.
29
4.
ERGEBNISSE
4.1
VORVERSUCHE
ZUR
IMMOBILISATION
VON
INSULINREZEPTOREN
.
30
4.2.1
HISTONPHOSPHORYLIERUNG
DURCH
DIE
REZEPTORKINASE
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
DER
ZEIT
.
35
4.2.2
EFFEKT
VON
INSULIN
AUF
DIE
AKTIVIERUNG
DER
INSULINREZEPTORKINASE
IN
INTAKTEN
HIRC-ZELLEN
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
DER
ZEIT
.
37
4.2.3
EFFEKT
VON
INSULIN
AUF
DIE
AKTIVIERUNG
DER
INSULINREZEPTORKINASE
IN
INTAKTEN
ZELLEN
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
DER
INSULINKONZENTRATION
.
39
4.2.4
WIRKSAMKEIT
DER
KINASE
UND
PHOSPHATASE
INHIBITOREN
.
40
SEITE
4.3
EFFEKT
VON
INSULIN
AUF
DIE
STIMULATION
DER
AUTOPHOSPHORYLIERUNG
VON
GELOESTEN
INSULINREZEPTOREN
.
41
4.4
EFFEKTE
DE*
DEXAMETHASONS
4.4.1
EFFEKT
DES
DEXAMETHASONS
AUF
DIE
ZELLZAHL
UND
ZELLGROESSENVERTEILUNG
VON
HIRC-ZELLEN
.
43
4.4.2
EINFLUSS
VON
DEXAMETHASON
AUF
DIE
INSULINDEGRADATION
DURCH
HIRC-ZELLLEN
.
44
4.4.3
EINFLUSS
EINER
INKUBATION
DER
HIRC
ZELLEN
MIT
DEXAMETHASON
AUF
DIE
EXTRAHIERBARE
INSULINBINDUNGSAKTIVITAET
.
46
4.4.4
EINFLUSS
VON
DEXAMETHASON
AUF
DIE
INSULINBINDUNG
AN
INTAKTE
HIRC-ZELLEN
.
47
4.4.5
EFFEKT
VON
DEXAMETHASON
AUF
DIE
INSULIN
ABHAENGIGE
AKTIVIERUNG
DER
INSULINREZEPTORKINASE
IN
INTAKTEN
HIRC-ZELLEN
.
49
4.4.6
EINFLUSS
EINER
VORINKUBATION
VON
HIRC
ZELLEN
MIT
DEXAMETHASON
AUF
DIE
INSULIN
STIMULIERTE
AUTOPHOSPHORYLIERUNG
VON
DARAUS
ISOLIERTEN
INSULINREZEPTOREN
.
51
4.4.7
EINFLUSS
VON
DEXAMETHASON
AUF
DIE
INSULINAB
HAENGIGE
AKTIVIERUNG
DER
INSULINREZEPTORKINASE
VON
RATTENHEPATOZYTEN
IN
PRIMAERKULTUR
.
53
5.
DISKUSSION
5.1
METHODEN
.
56
5.2
EFFEKTE
DES
DEXAMETHASONS
.
62
5.3
EFFEKT
EINER
24STUNDIGEN
INSULININKUBATION
AUF
DIE
AKTIVITAET
DER
INSULINREZEPTORKINASE
.
67
6.
ZUSAMMENFASSUNG
.
69
7.
LITERATURVERZEICHNIS
.
71
8.
VERZEICHNIS
DER
TABELLEN
UND
ABBILDUNGEN
.
80
DANKSAGUNG
LEBENSLAUF
81
82 |
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