Einfluss von synthetischen Retinalen auf die Photoreaktion von bovinem Rhodopsin:
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1994
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1.
EINLEITUNG
7
2.
LITERATURIIBERSICHT
9
2.1
DER
AUFBAU
DER
STAEBCHENZELLE
VON
VERTEBRATEN
9
2.2
DIE
STRUKTUR
VON
RHODOPSIN
10
2.3
DIE
PHOTOREAKTION
VON
RHODOPSIN
12
2.3.1
DIE
ENZYMATISCHE
VERSTAERKERKASKADE
13
2.3.2
DER
ABSCHALTMECHANISMUS
14
2.3.3
DIE
WIEDERHERSTELLUNG
DER
ERREGBARKEIT
15
2.4
DIE
HOMOLOGIE
DES
RHODOPSINPHOTOREZEPTORS
MIT
HORMONREZEPTOREN
16
2.5
DIE
INFRAROTSPEKTROSKOPIE
17
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
18
3.1
PRAEPARATION
VON
RHODOPSIN
AUS
RINDERAUGEN
18
3.2.1
MESSUNGEN
DER
RHODOPSINKONZENTRATION
19
3.2.2
MESSUNGEN
DER
RETINALKONZENTRATION
21
3.3
REGENERATION
VON
RHODOPSIN
MIT
RETINALANALOGA
25
3.3.1
AUSBLEICHEN
DER
PROBE
25
3.3.2
ENTFERNUNG
DES
UEBERSCHUESSIGEN
HYDROXYLAMINS
27
3.3.3
VORBEREITEN
DER
RETINALE
27
3.3.4
REGENERATION
27
3.4
REINIGUNG
DES
MODIFIZIERTEN
RHODOPSINS
28
3.4.1
ENTFERNEN
DES
UEBERSCHUESSIGEN
RETINALS
MIT
BOVINEM
SERUMALBUMIN
(BSA,
SIGMA")
28
3.4.2
ENTFERNEN
DES
UEBERSCHUESSIGEN
RETINALS
MIT
HEXAN
28
3.4.3
ENTFERNUNG
DER
LIPIDE
MIT
HILFE
DER
CONCANAVALIN-A-AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
(CONA)
29
3.4.4
ENTFERNUNG
DES
UEBERSCHUESSIGEN
RETINALS
SOWIE
DER
LIPIDE
MITTELS
DER
CONA-UND
HYDROXYLAPATIT-SAEULE
(HA-SAEULE)
30
3.5
DIE
FOURIER-TRANSFORM-INFRAROT-DIFFERENZSPEKROSKOPIE
(FTIR)
31
3.6
DER
GTPYS
AUSTAUSCH-ASSAY
33
SEITE
3.6.1
FUNKTIONSPRINZIP
DES
GTPYS
AUSTAUSCH-ASSAY
33
3.6.2
VAKUUMFILTRATION
DER
MODIFIZIERTEN
RHODOPSINE
34
3.6.3
MESSUNGEN
DER
RADIOAKTIVITAET
IM
DIGITAL
AUTORADIOGRAPH
(BERTHOLD)
(DAR)
36
4
ERGEBNISSE
37
4.1
ERGEBNISSE
DER
RHODOPSINREGENERATION
37
4.2
ERGEBNISSE
DER
RHODOPSINWASCHUNG
40
4.2.1
WASCHUNG
MIT
BSA
40
4.2.2
WASCHUNG
MIT
HEXAN
43
4.3
ERGEBNISSE
DER
RHODOPSINREINIGUNG
MITTELS
DER
CONCANAVALIN-A-AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
(CONA)
46
4.4
ERGEBNISSE
DER
RHODOPSINREINIGUNG
MITTELS
DER
CONA-UND
HYDROXYLAPATIT-SAEULE
50
4.5
ERGEBNISSE
DER
RHODOPSINREINIGUNG
MITTELS
DER
HYDROXYLAPATIT-SAEULE
(HA-SAEULE)
52
4.6
ERGEBNISSE
DER
INFRAROTSPEKTROSKOPIE
54
4.6.1
ERGEBNISSE
DER
FTIR
MESSUNG
VON
5,6
EPOXY-9CIS
RHODOPSIN
IN
MEMBRANEN
54
4.6.2
ERGEBNISSE
DER
FTIR
MESSUNG
VON
7,8
DIHYDRO-9CIS
RHODOPSIN
IN
MEMBRANEN
56
4.6.3
ERGEBNISSE
DER
FTIR
MESSUNG
VON
7,8
DIHYDRO-9CZS
RHODOPSIN
IN
DETERGENZ
56
4.6.4
ERGEBNISSE
DER
FTIR
MESSUNG
VON
DIETHYLACYCLIC-9CIS
RHODOPSIN
IN
MEMBRANEN
58
4.6.5
ERGEBNISSE
DER
FTIR
MESSUNG
VON
DIETHYLACYCLIC-9CZ\
RHODOPSIN
IN
DETERGENZ
58
4.7
ERGEBNISSE
DES
GTPYS
AUSTAUSCH-ASSAY
60
5.
DISKUSSION
66
6.
ZUSAMMENFASSUNG
68
7.
SUMMARY
70
8.
LITERATURVERZEICHNIS
72 |
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