Charakterisierung einer Viruskrankheit auf Chinakohl:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1993
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| Beschreibung: | Hohenheim, Univ., Diss., 1993 |
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INHALTSVERZEICHNIS
A
EINLEITUNG
SEITE
1
B
MATERIAL
UND
METHODEN
6
1
PFLANZENANZUCHT
6
2
VIREN
UND
PFLANZEN
6
3
MECHANISCHE
INOKULATION
6
4
ISOLIERUNG
VON
VIRUSPARTIKELN
AUS
INFIZIERTEM
CHINAKOHLPFLANZEN
7
4.1
VIRUSVERMEHRUNG
7
4.2
VIRUSREINIGUNG
7
5
GEWINNUNG
VON
TURMV-ANTISERUM
9
5.1
TITERBESTIMMUNG
9
5.1.2
MIKROPRAEZIPITINTEST
9
5.2
ENTFERNUNG
UNSPEZIFISCHER
ANTIKOERPER
AUS
TURMV-ANTISERUM
10
5.3
GEWINNUNG
DER
IMMUNGLOBULINFRAKTIONEN
10
5.4
KOPPELUNG VON
IMMUNGLOBULIN
UND
ALKALISCHER
PHOSPHATASE
11
6
SEROLOGISCHE
UNTERSUCHUNGEN
12
6.1
VIRUSNACHWEIS
VON
TURMV
DURCH
OUCHTERLONY-TEST
12
6.2
VIRUSNACHWEIS
MIT
ENZYME
LINKED
IMMUNOSORBENT
ASSAY
(ELISA-TEST)
13
7
ELEKTRONENMIKROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNGEN
15
7.1
SCHNELLPRAEPARATE
UND
DEKORATIONSMETHODE
15
7.2
EINBETTUNG
UND
HERSTELLUNG
VON
ULTRADUENN
SCHNITTEN
AUS
CHINAKOHLBLAETTERN
17
8
NACHWEIS
DER
VIRUSSPEZIFISCHEN
PROTEINE
20
8.1
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
(SDS-PAGE)
20
8.1.2
DETEKTION
23
8.1.2.1
COOMASSIE-BLAU-FAERBUNG
23
8.1.2.2
SILBERFAERBUNG
24
9
NUKLEINSAEURE-ISOLIERUNG
AUS
BLATTMATERIAL
UND
GEREINIGTEM
VIRUS
26
9.1
PHENOLMETHODE
26
9.2
GUANIDINIUMHYDROCHLORID-METHODE
27
10
NACHWEIS
DER
VIRUSSPEZIFISCHEN
RNS
29
10.1
PHOTOMETRISCHE
MESSUNG
29
10.2
INFEKTIOSITAET
DER
RNS
(BIOTEST)
29
10.3
GELELEKTROPHORESE
29
10.3.1
POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
29
10.3.2
ELEKTROPHORETISCHE AUFTRENNUNG DER
RNS
IM
AGAROSEGEL
31
10.3.2.1
NATIVE
AGAROSE-GELELEKTROPHORESE
31
10.3.2.2
PROBENDENATURIERUNG
31
10.3.3
ANFAERBEN
DER
GELE
32
10.3.3.1
TOLUIDINBLAU-FAERBUNG
32
10.3.3.2
ACRIDINORANGE-FAERBUNG
32
10.3.4
MOLEKULARGEWICHTSBESTIMMUNG
33
11
PROTOPLASTENTECHNIK
34
11.1
HERSTELLUNG
VON
PROTOPLASTEN
34
11.2
BESTIMMUNG
DER
PROTOPLASTENKONZENTRATION
UND
DES
ANTEILS
LEBENDER
PROTOPLASTEN
35
11.3
INFEKTION
DER
PROTOPLASTEN
36
11.3.1
POLYETHYLENGLYKOL-METHODE
36
11.3.2
POLY-L-ORNITHIN-METHODE
37
11.3.3
METHODE
NACH
DIJKSTRA
38
11.3.4
METHODE
NACH
GOFFINET
UND
VERHOYEN
38
11.4
INKUBATION
DER
PROTOPLASTEN
38
11.5
ERNTE
39
C
ERGEBNISSE
1
SYMPTOMATOLOGIE UND
REAKTION DER
WIRTSPFLANZEN
40
2
VERGLEICH
DER VIRUSREINIGUNGSMETHODEN
45
2.1
AUSBEUTE
UND
REINHEIT
DER
TURMV-STAEMME
47
3
SEROLOGISCHER
NACHWEIS
DES
TURHV-HOH
47
3.1
OUCHTERLONY-TEST
48
3.2
VIRUSNACHWEIS
IM
ELISA
49
3.2.1
REDUZIERUNG
DES
ANTEILS
DER
UNSPEZIFISCH
REAGIERENDEN
ANTIKOERPER
50
3.2.2
OPTIMIERUNG
DES
TURMV-ELISA-TESTS
51
3.2.2.1
EINFLUSS
VON
EDTA-CHELAT
51
3.2.2.2
EINFLUSS
VON
NA-DIECA-CHELAT
51
3.2.3
VERGLEICH VERSCHIEDENER
ANSAETZE
DES
ELISA-TESTS
MIT
ROHSAEFTEN
54
3.2.4
ERMITTLUNG
DES
VIRUSGEHALTES
DES
PFLANZEN
MATERIALS
55
3.2.5
ERMITTLUNG
DES
TURMV-GEHALTES
BEI
EINIGEN
WIRTSPFLANZEN
55
4
ELEKTRONENMIKROSKOPISCHER
NACHWEIS
56
4.1
ERKENNUNG
DER
VIRUSPARTIKEL
IM
SCHNELLPRAEPARATEN
56
4.2
NACHWEIS
VON
EINSCHLUSSKOERPERN
58
4.3
IMMUNELEKTRONENMIKROSKOPIE
62
4.3.1
REAKTION
DES
TURMV-ISOLATES
AUF
VERSCHIEDENE
ANTISERA
62
4.3.2
TEST
AUF
DAS
VORHANDENSEIN
EINES
POTYVIRUS
AUSSER
TURMV
63
4.3.3
VERGLEICH
ZWISCHEN
SELBST
HERGESTELLTEM
ANTISERUM
UND
ANDEREN ANTISERA
63
4.3.4
ENTFERNUNG
DER
"DEKORIERTEN
PARTIKEL"
DURCH
SACCHAROSEDICHTEGRADIENTEN
68
4.3.5
EINFLUSS
DER
REINIGUNGSMETHODE
68
4.3.6
DEKORATIONSTITER
DES
TURMV-AS
70
5
NACHWEIS
DURCH
SDS-POLYACRYLAMID
GELELEKTROPHORESE
72
5.1
COOMASSIE-BLAU-FAERBUNG
73
5.2
SILBERFAERBUNG
73
5.3
EINFLUSS
DER
VIRUSEXTRAKTIONSMETHODE
AUF
DIE
NACHWEISBARKEIT
75
5.5
NACHWEISGRENZE
DES
VIRUS
DURCH
SDS-
GELELEKTROPHORESE
76
6
NUKLEINSAEURE-ISOLIERUNG
78
6.1
VERGLEICH
DER AUSBEUTEN
BEI
VERWENDUNG
UNTER
SCHIEDLICHER
EXTRAKTIONSVERFAHREN
78
6.2
BESTIMMUNG
DER
RNS-INFEKTIOSITAET
79
6.3
TURMV-RNS-NACHWEIS
DURCH
GELELEKTROPHORESE
79
7
PROTOPLASTENTECHNIK
80
7.1
EINFLUSS
DER
PRAEPARATIONSMETHODE
AUF
DIE
LEBENS
FAEHIGKEIT
VON
PROTOPLASTEN
80
7.2
INFIZIERBARKEIT
VON
PROTOPLASTEN
MIT
TMV
ALS
KONTROLLE
82
7.2.1
EINFLUSS
DER
PROTOPLASTENANZAHL
AUF
DIE
TMV-
VERMEHRUNG
85
7.3
INFEKTION
VON
PROTOPLASTEN
MIT
TURMV
NACH
VERSCHIEDENEN
INOKULATIONSMETHODEN
85
7.3.1
PEG-METHODE
NACH
CASSELS
UND
BARLASS
85
7.3.2
INOKULATIONSMETHODE
NACH
DIJKSTRA
89
7.3.3
INOKULATIONSMETHODE
NACH
GOFFINET
UND
VERHOYEN
90
7.4
INOKULATION
VON
CHINAKOHL-PROTOPLASTEN
MIT
TURMV-RNS
90
7.5
DOPPE
1
INOKU
1
ATION
91
D
DISKUSSION
SYMPTOMATOLOGIE
95
VIRUS-ISOLIERUNG
96
SEROLOGISCHER
NACHWEIS
98
ELEKTRONENMIKROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNGEN
104
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
105
NACHWEIS
DER
VIRUSSPEZIFISCHEN
NUKLEINSAEURE
108
PROTOPLASTEN
110
E
ZUSAMMENFASSUNG
116
F
LITERATURVERZEICHNIS
119
G
ZUSAMMENFASSUNG
AUF
FRANZOESISCH
135 |
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