Mechanismen des gerichteten Neuritenwachstums als Grundlage neuronaler Musterbildung:
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INHALT
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1
RETINALE
ZELLDIFFERENZIERUNG
.
1
1.2
BEGRIFFSDEFINITION
.
2
1.3
ATTRAKTIVE
UND
REPULSIVE
LEITUNGSMECHNAISMEN
.
3
2.
MATERIALIEN
.
6
2.1
VERSUCHSTIERE
.
6
2.2
MEDIEN
UND
PUFFER
.
6
2.3
KOMPLEMENTLOESUNG
.
7
2.4
FARBSTOFFE
.
7
2.5
KULTURSCHALEN
.
7
2.6
CHEMIKALIEN
.
7
2.7
ANTIKOERPER
.
8
3.
METHODEN
.
9
3.1
HISTOLOGISCHE
TECHNIKEN
.
9
3.1.1
GEFRIERSCHNITTE
.
9
3.1.2
PARAFFINSCHNITTE
.
9
3.1.3
IMMUNFAERBUNGEN
.
9
3.2
DURCHTRENNUNG
DES
NERVUS
OPTICUS
.
9
3.3
BESCHICHTUNGEN
.
10
3.3.1
POLY-D-LYSIN
(PDL)
BESCHICHTUNG
.
10
3.3.2
PDL/LAMININ
BESCHICHTUNG
.
10
3.3.3
SILANISIERUNG
.
11
3.4
NEURONALE
ZELLKULTUREN
.
11
3.4.1
EINZELZELLKULTUREN
.
11
3.4.2
BRDU
MARKIERUNG
.
11
3.4.3
ISOLIERUNG
UND
REINIGUNG
DER
MUELLER
GLIA
.
11
3.4.4
EXPLANTATKULTUREN
.
12
3.4.4.1
PRAEPARATION
DER
RETINA
.
12
3.4.4.2
FAERBUNG
DER
RETINA
MIT
VITALFARBSTOFFEN
.
12
3.5
SUBSTRATE
FUER
RETINAEXPLANTATE
.
13
3.5.1
GEFRIERSCHNITTE
.
13
3.5.2
INNERE
LIMITIERENDE
MEMBRAN/ISOLIERTE
MUELLER
GLIA
ENDFUESSCHEN
.
14
3.5.3
GEREINIGTER
MUELLER
GLIA
ZELLRASEN
.
14
3.5.4
AUSWERTUNG
DER
EXPLANTATKULTUREN
.
15
INHALT
3.6
WACHSTUMSINDEX
.
16
3.7
ANREICHERUNG
DER
RGZ
DURCH
ENZYMATISCHE
ENTSCHICHTUNG
.
17
3.8
ZEITRAFFER
VIDEOMIKROSKOPIE
.
17
3.9
DOKUMENTATION
.
19
3.10
STATISTISCHE
AUSWERTUNGEN
.
19
4.
ERGEBNISSE
.
20
4.1
2A10
ANTIGEN
WAEHREND
DER
RETINAENTWICKLUNG
.
20
4.1.1
IN
VIVO
EXPRESSION
DES
2A10
ANTIGENS
.
20
4.1.2
2A10
ANTIGEN
EXPRESSION
NACH
ELIMINIERUNG
DER
RGZ
.
21
4.1.3
ZN
VITRO
EXPRESSION
DES
2A10
ANTIGENS
.
23
4.1.4
POSTMITOTISCHE
2A10
EXPRESSION
.
24
4.1.5
REINIGUNG
DER
MUELLER
GLIA
.
26
4.2
ORIENTIERTES
WACHSTUM
DER
RGZ-AXONE
.
29
4.2.1
WACHSTUM
VON
RGZ-AXONEN
AUF
RETINALEN
GEFRIERSCHNITTEN
.
29
4.2.2
AXONWACHSTUM
AUF
RETINALEN
GEFRIERSCHNITTEN
NACH
LAESION
DES
NERVUS
OPTICUS
.
32
4.2.3
AXONWACHSTUM
AUF
ISOLIERTEN
NEUROEPITHEL/MUELLER
GLIA
ENDFUESSCHEN
.
33
4.2.3.1
AXONLAENGE
.
34
4.2.3.2
AXONDICHTE
.
37
4.2.3.3
AXONFASZIKULATION
.
38
4.2.3.4
MORPHOLOGIE
DER
WACHSTUMSKEGEL
.
42
4.2.4
EXPRESSION
VERSCHIEDENER
ZELLADHAESIONSMOLEKUELE
AUF
ISOLIERTEN
ENDFUESSCHEN
.
44
4.2.5
AXONWACHSTUM
AUF
MUELLER
GLIA
SOMATA
.
46
4.2.5.1
AXONLAENGE
.
47
4.2.5.2
AXONDICHTE
.
47
4.2.5.3
AXONFASZIKULATION
.
47
4.2.5.4
VERGLEICH
DES
AXONWACHSTUMS
AUF
MUELLER
GLIA-SOMATA
MIT
MUELLER
GLIA-ENDFUESSCHEN
.
48
4.2.6
AXONWACHSTUM
AUF
BEHANDELTEN
GEFRIERSCHNITTEN
.
50
4.2.6.1
LAMININBEHANDLUNG
.
51
4.2.6.2
TEMPERATURBEHANDLUNG
.
51
4.2.6.3
TRITON-X-100-BEHANDLUNG
.
52
4.2.6.4
METHANOLBEHANDLUNG
.
54
4.2.6.5
SAEURE
UND
BASE-BEHANDLUNG
.
54
4.2.6.6
ENZYMBEHANDLUNG
.
54
4.2.7
AXONWACHSTUM
AUF
BEHANDELTEN
MUELLER
GLIA
SOMATA
.
56
4.2.7.1
TROCKNUNG
.
57
4.2.7.2
TEMPERATURBEHANDLUNG
.
58
4.2.7.3
LAMININBEHANDUNG
.
58
INHALT
4.2.8
ANREICHERUNG
VON
RGZ
IN
EINZELZELLKULTUREN
.
61
4.2.8.1
ANREICHERUNG
DURCH
ENZYMATISCHE
ENTSCHICHTUNG
.
61
4.2.9
ZEITRAFFER
VIDEOMIKROSKOPIE
.
63
5.
DISKUSSION
.
69
5.1.
ENTWICKLUNGSABHAENGIGE
EXPRESSION
DES
2A10
ANTIGENS
.
69
5.1.1
DER
2A10
STUFENGRADIENT
.
69
5.1.2
AUSWIRKUNG
DER
LAESION
DES
N.OPTICUS
AUF
DIE
2A10
EXPRESSION
.
71
5.1.3
VERGLEICH
MIT
BESTEHENDEN
NEURONALEN
MARKERN
.
72
5.1.4
AUSBLICK
.
73
5.2
ORIENTIERTES
WACHSTUM
DER
RGZ-AXONE
.
74
5.2.1
DIE
ENTWICKLUNG
UND
FUNKTIONEN
DER
MUELLER
GLIA
.
74
5.2.2
EINFLUSS
DER
MUELLER
GLIA
AUF
ZELLPOLARITAET
DER
RGZ
.
78
5.2.3
EINFLUSS
DER
MUELLER
GLIA
DIE
LEITUNG
DER
RGZ-AXONE
.
81
5.2.4
WACHSTUMSVERHALTEN
RETINALER
GANGLIENZELLAXONE
BEI
KONTAKT
MIT
RETINALEN
GEFRIERSCHNITTEN
.
86
6.
AUSBLICK
.
90
7.
ZUSAMMENFASSUNG
.
91
8.
LITERATURVERZEICHNIS
.
93
PUBLIKATIONSLISTE
.
107
LEBENSLAUF
.
108
ERKLAERUNG
.
109 |
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