Analyse des blütenspezifisch exprimierten FIL2-Gens aus Antirrhinum majus L.:
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INHALT
KAPITEL
I.
EINLEITUNG
.
1
II.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
12
1.
CHEMIKALIEN,
ENZYME,
RADIOISOTOPE
UND
.
12
SONSTIGE
MATERIALIEN
2,
MEDIEN,
PUFFER
UND
LOESUNGEN
.
12
3.
BAKTERIENSTAMME,
BAKTERIOPHAGEN
UND
PLASMID-VEKTOREN.
.
13
4.
PFLANZENMATERIAL
.
14
5.
ISOLIERUNG
VON
DNA
.
14
6.
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
.
14
7
.
DNA-SEQUENZANALYSE
.
.
.
15
8.
IN
VITRO
DNA-PROTEIN-INTERAKTIONEN
UND
.
15
GEL-RETARDIERUNGS-EXPERIMENTE
9.
UEBEREXPRESSION
VON
C!-FIL2-PROTEIN
IN
E.COLI
.
15
10.
AUFREINIGUNG
VON
CI-FIL2-PROTEIN
AUS
E.COLI
.
16
11.
GEWINNUNG
UND
AFFINITATSAUFREINIGUNG
.
17
POLYKLONALER
ANTIKOERPER
12.
PRAEPARAETLON
VON
GESAMTPROTEIN
AUS
PFLANZEN
.
18
13.
PRAEPARATION
VON
EXTRAZELLULAEREN
PROTEINEN
.
19
14.
SDS-GELELEKTROPHORESE
.
19
15
2D-GELELEKTROPHORESE
.
19
16.
HESTERN
BLOT
-ANALYSE
.
20
17.
DEGLYCOSYLIERUNG
VON
GLYCOPROTEINEN
.
20
18.
IN
SITU
-IMMUNOLOKALISATION
.
21
19.
IMMOBILISIERUNG
VON
PROTEINEN
AN
SAEULENMATERIAL
.
21
20.
AUFREINIGUNG
VON
PROTEINEN
UEBER
LEKTIN
.
22
AFFINITAETS-CHROMATOGRAPHIE
UND
HPLC
21.
AFFINITAETS-CHROMATOGRAPHIE
MIT
.
23
IMMOBILISIERTEN
FIL2-PROTEIN
22.
TRANSFORMATION
VON
PETUNIA
HYBRIDA
.23
23.
OLIGONUKLEOTIDE
.
24
24.
COMPUTERANALYSEN
.
24
25.
SONSTIGES
.
24
III.
ERGEBNISSE
.
25
1.
DER
GENOMISCHE
LOCUS
VON
FIL2
.
25
2.
BINDUNG
VON
MADS-BOX-PROTEINEN
AN
DAS.
.
.
28
CARG-MOTIV
VON
FIL2
3.
PRAEPARATION
EINES
CI-FIL2-FUSIONSPROTEINS
AUS
E.COLI
.31
ZUR
GEWINNUNG
POLYKLONALER
FIL2-SPEZIFISCHER
ANTIKOERPER
4.
CHEMISCHE
MODIFIKATION
DES
FIL2-PROTEINS
.
34
5.
ZEITLICHE
UND
RAEUMLICHE
VERTEILUNG
DES
FIL2-PROTEINS
.36
WAEHREND
DER
BLUETENENTWICKLUNG
6.
SUBZELLULAERE
LOKALISATION
VON
FIL2
.
41
7.
FIL2-EXPRESSION
IN
DEN
MUTANTEN
EINIGER
.
43
HOMOEOTISCHER
GENE
8.
TRANSFORMATION
VON
PTUNIA
HYBRIDA
MIT
FIL2
-CDNA
.
45
9.
AUFREINIGUNG
DES
FIL2-PROTEINS
AUS
TRANSGENEN
.
51
PETUNIA
-PFLANZEN
10.
AFFINITAET
VON
FIL2
ZU
EXTRAZELLULAEREN
PROTEINEN
.
53
IV.
DISCUSSION
.
55
1.
FIL2
IST
ORGAN
UND
GEWEBESPEZIFISCH
EXPRIMIERT
.
55
2.
DIE
STADIENSPEZIFISCHE
FIL2-EXPRESSION
IST
IN
.
56
STAMINA
UND
KARPELLEN
UNTERSCHIEDLICH
3.
WIRD
DIE
FIL2
-EXPRESSION
VON
DEF
A/QLO
.
56
DIREKT
REGULIERT?
4.
EXPRESSION
UND
SUBZELLULAERE
LOKALISATION
DES
.
60
FIL2-PROTEINS
ALS
HINWEIS
AUF
SEINE
FUNKTION
5.
DIE
LRR-DOMAENE
UND
DIE
INTERAKTION
VON
FIL2
.
62
MIT
EXTRAZELLULAEREN
PROTEINEN
6.
FIL2
ALS
KOMPONENTE
IN
DER
ZELL-ZELL-INTERAKTION
.
63
IM
TRANSMISSIONSGEWEBE
6.1.
INTEGRATION
IN
ADHAESIONSPROZESSE
.
63
6.2.
INTEGRATION
IN
PROTEOLYTISCHE
PROZESSE
.
64
6.3
FIL2
ALS
KOMPONENTE
EINES
.
66
SIGNALTRASNDUKTIONS-SYSTEMS
7.
DIE
FIL2-EXPRESSION
IN
TRANSGENEN
PETUNLA
-PFLANZEN
.
68
8.
FIL2
ZEIGT
AFFINITAET
ZU
EINEM
.
'
'
.70
EXTRAZELLULAEREN
PROTEIN
V.
ZUSAMMENFASSUNG
.
72
VI.
LITERATUR
.
74
VII.
ANHANG
.
85
1.
VOLLSTAENDIGE
DNA-SEQUENZ
DES
FIL2
-GENS
.
85
2.
NOMENKLATUR
VON
MUTANTEN,
GENEN
UND
PROTEINEN
.
89
3.
ABKUERZUNGEN
.
90 |
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