Kollagensynthese im Zahnhalteapparat: In-vitro-Untersuchungen an humanen Fibroblasten
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
München u.a.
Hanser
1994
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INHALT
VORWORT
.
5
LISTE
DER
VERWENDETEN
ABKUERZUNGEN
.
11
1
EINLEITUNG
.
13
1.1
STRUKTURELLER
AUFBAU
DES
ZAHNHALTEAPPARATES
.
13
1.1.1
FASERAUFBAU
UND
FASERANORDNUNG
.
14
1.2
BEDEUTUNG
DER
VITALITAET
DER
WURZELHAUT
FUER
ZAHNREPLANTATIONEN
UND
ZAHNTRANSPLANTATIONEN
.
17
1.3
BEDEUTUNG
DER
KULTURBEDINGUNGEN
FUER
DIE
ZELLEN
DES
ZAHNHALTEAPPA
RATES
.
18
1.4
BEDEUTUNG
DES
FIBRONEKTINS
FUER
DIE
KULTIVIERUNG
VON
ZELLEN
DES
ZAHNHALTEAPPARATES
.
19
1.5
BEDEUTUNG
DER
KOLLAGENSYNTHESE
FUER
DIE
ZAHNREPLANTATION
UND
DEREN
NACHWEISMETHODEN
.
21
1.5.1
KOLLAGENTYPEN
.
21
1.5.1.1
KOLLAGEN
TYP
I
UND
III
.
23
1.5.1.2
KOLLAGEN
TYP
IV
.
24
1.5.1.3
KOLLAGEN
TYP
V
.
24
1.5.1.4
KOLLAGEN
TYP
VI
.
26
1.5.1.5
KOLLAGEN
TYP
XII
.
27
1.5.2
BESTIMMUNG
DER
KOLLAGENSYNTHESE
VON
FIBROBLASTEN
DES
ZAHNHALTE
APPARATES
UND
DEREN
VERGLEICHBARKEIT
.
28
1.5.3
NACHWEISMETHODEN
FUER
KOLLAGENE
.
30
1.6
GEFRIERKONSERVIERUNG
.
32
1.6.1
GRUNDLAGEN
DER
KRYOBIOLOGIE
.
32
1.6.2
KRYOPROTEKTIVA
.
33
1.6.3
KOMBINATION
VON
EINFRIER
UND
AUFTAUGESCHWINDIGKEIT
MIT
KRYOPRO
TEKTOREN
.
34
2
FRAGESTELLUNG
.
37
3
MATERIAL
UND
METHODEN
.
39
3.1
ALLGEMEINE
METHODEN
.
39
3.1.1
PRIMAERKULTUR
VON
GINGIVA-UND
DESMODONTALFIBROBLASTEN
.
39
3.1.1.1
EXPLANTATGEWINNUNG
.
39
3.1.1.2
PRAEPARATION
DER
GINGIVAEXPLANTATE
.
39
3.1.1.3
PRAEPARATION
DER
DESMODONTALEXPLANTATE
.
40
3.1.1.4
ANHEFTUNG
DER
EXPLANTATE
IN
DER
KULTURSCHALE
.
40
3.1.1.5
BESCHICHTUNG
DER
KULTURSCHALEN
.
41
3.1.1.6
KULTURBEDINGUNGEN
.
41
3.1.1.7
PASSAGE
DER
GINGIVA
UND
DESMODONTALFIBROBLASTENKULTUREN
.
42
8
INHALT
3.1.1.8
FLUORESZENZMIKROSKOPIE
.
42
3.1.1.9
RASTERELEKTRONENMIKROSKOPIE
.
43
3.1.1.10
FAERBUNGEN
.
43
3.1.1.10.1
METHYLENBLAU-FAERBUNG
.
43
3.1.1.10.2
HAEMATOXYLIN-EOSIN-FAERBUNG
.
43
3.1.1.10.3
GIEMSA-FAERBUNG
.
44
3.1.1.11
STATISTISCHE
METHODEN
.
44
3.2
MATERIAL
UND
METHODEN
DER
SPEZIFISCHEN
EXPERIMENTE
.
45
3.2.1
MORPHOLOGISCHE
BEURTEILUNG
DER
ZELLEN
.
45
3.2.1.1
LICHTMIKROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNG
.
45
3.2.1.2
TRANSMISSIONSELEKTRONENMIKROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNG
.
46
3.2.2
ANHEFTUNG
UND
PROLIFERATION
MIT
UND
OHNE
PLASMAKLOT
.
47
3.2.3
WACHSTUMSVERHALTEN
UND
PROTEINSYNTHESE
.
48
3.2.3.1
BESTIMMUNG
DER
ZELLZAHL
.
49
3.2.3.2
BESTIMMUNG
DES
PROTEINGEHALTES
.
50
3.2.3.2.1
VORBEREITUNG
DER
ZELLKULTUREN
.
50
3.2.3.2.2
PROTEINBESTIMMUNG
.
51
3.2.4
ANHEFTUNG
UND
PROLIFERATION
MIT
BZW.
OHNE
FIBRONEKTIN
.
53
3.2.5
BESTIMMUNG
DER
KOLLAGENSYNTHESE
VON
GINGIVA
UND
DESMODONTAL
FIBROBLASTEN
.
54
3.2.5.1
KULTIVIERUNG
DER
ZELLEN
.
54
3.2.5.2
ENZYMIMMUNASSAY
(ELISA)
.
55
3.2.5.2.1
VORBEREITUNG
DER
LOESUNGEN
.
55
3.2.5.2.2
VORBEREITUNG
DER
ZELLKULTUREN
.
55
3.2.5.2.3
DURCHFUEHRUNG
DES
ELISA
.
55
3.2.5.2.4
AUSWERTUNG
DES
ELISA
.
57
3.2.6
UEBERLEBENSRATE
PARODONTALER
FIBROBLASTEN
NACH
UNTERSCHIEDLICHER
GEFRIERKONSERVIERUNG
.
58
3.2.6.1
HERKUNFT
DER
GEWEBEEXPLANTATE
.
58
3.2.6.2
KULTIVIERUNG
DER
ZELLEN
.
58
3.2.6.3
VORBEREITUNG
ZUR
GEFRIERKONSERVIERUNG
.
58
3.2.6.4
GEFRIERKONSERVIERUNGSMETHODEN
.
59
3.2.6.4.1
GEFRIERKONSERVIERUNG
NACH
SPERLING
.
61
3.2.6.4.2
GEFRIERKONSERVIERUNG
NACH
SCHWARTZ
UND
ANDREASEN
.
61
3.2.6.4.3
GEFRIERKONSERVIERUNG
NACH
PFRAGNER
.
61
3.2.6.4.4
GEFRIERKONSERVIERUNG,
MODIFIZIERT
NACH
TOSHIO
.
61
3.2.6.4.5
GEFRIERKONSERVIERUNG
MIT
MILCH
UND
10%
GLUKOSE
.
62
3.2.6.4.6
GEFRIERKONSERVIERUNG
MIT
MILCH
UND
10%
TREHALOSE
.
62
3.2.6.4.7
GEFRIERKONSERVIERUNG
NACH
WILL
.
62
3.2.6.4.8
GEFRIERKONSERVIERUNG
NACH
TOSHIO
.
62
3.2.6.5
AUFTAUVORGANG
.
63
3.2.6.6
VITALITAETSTEST
MIT
TRYPANBLAU
.
63
3.2.7
KOLLAGENSYNTHESE
DER
DESMODONTALFIBROBLASTEN
NACH
GEFRIERKONSER
VIERUNG
.
63
INHALT
9
4
ERGEBNISSE
.
65
4.1
MORPHOLOGISCHE
BEURTEILUNG
DER
ZELLEN
.
65
4.1.1
LICHTMIKROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNG
.
65
4.1.2
TRANSMISSIONSELEKTRONENMIKROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNG
.
68
4.2
ANHEFTUNG
UND
PROLIFERATION
MIT
BZW.
OHNE
PLASMAKLOT
.
71
4.3
WACHSTUMSVERHALTEN
UND
PROTEINSYNTHESE
.
75
4.3.1
WACHSTUMSVERHALTEN
.
75
4.3.1.1
WACHSTUMSVERHALTEN
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
DER
PASSAGENZAHL
.
78
4.3.1.2
WACHSTUMSVERHALTEN
IN
ABHAENGIGKEIT
VOM
PATIENTENALTER
.
79
4.3.1.3
WACHSTUMSVERHALTEN
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
DER
KULTIVIERUNGSMETHODE
81
4.3.2
BESTIMMUNG
DES
PROTEINGEHALTES
.
81
4.4
ANHEFTUNG
UND
PROLIFERATION
MIT
BZW.
OHNE
FIBRONEKTINBESCHICH
TUNG
.
88
4.5
KOLLAGENSYNTHESE
VON
GINGIVA
UND
DESMODONTALFIBROBLASTEN
.
89
4.5.1
EINFLUSS
DES
PLASMAKLOTS
AUF
DIE
KOLLAGENSYNTHESE
VON
ZELLEN
DES
ZAHNHALTEAPPARATES
IN
DER
2.
PASSAGE
.
89
4.5.2
EINFLUSS
DER
FIBRONEKTINBESCHICHTUNG
AUF
DIE
KOLLAGENSYNTHESE
VON
GINGIVA
UND
DESMODONTALFIBROBLASTEN
IN
DER
2.
PASSAGE
.
91
4.5.2.1
PROZENTUALE
ANTEILE
DER
KOLLAGENTYPEN
AM
GESAMTKOLLAGEN
(VER
GLEICH
DER
ZELLARTEN)
.
93
4.5.3
KOLLAGENSYNTHESE
DER
GINGIVA
UND
DESMODONTALFIBROBLASTEN
IN
UN
TERSCHIEDLICHEN
PASSAGEN
.
95
4.5.3.1
PROZENTUALE
ANTEILE
DER
KOLLAGENTYPEN
AM
GESAMTKOLLAGEN
IN
UNTER
SCHIEDLICHEN
PASSAGEN
.
99
4.6
UEBERLEBENSRATE
VON
GINGIVA
UND
DESMODONTALFIBROBLASTEN
NACH
UN
TERSCHIEDLICHER
GEFRIERKONSERVIERUNG
.
101
4.6.1
VERGLEICH
DER
GEFRIERKAMMER
UND
PROBENTEMPERATUREN
.
101
4.6.2
UEBERLEBENSRATEN
DER
GINGIVAFIBROBLASTEN
NACH
GEFRIERKONSERVIERUNG
103
4.6.3
UEBERLEBENSRATEN
DER
DESMODONTALFIBROBLASTEN
NACH
GEFRIERKONSER
VIERUNG
.
104
4.6.4
MORPHOLOGIE
DER
AVITALEN
ZELLEN
.
106
4.7
KOLLAGENSYNTHESE
DER
DESMODONTALFIBROBLASTEN
NACH
GEFRIERKONSER
VIERUNG
.
107
5
DISKUSSION
.
117
5.1
MORPHOLOGISCHE
BEURTEILUNG
DER
ZELLEN
.
117
5.2
ANHEFTUNG
UND
PROLIFERATION
MIT
BZW.
OHNE
PLASMAKLOT
.
119
5.3
WACHSTUMSVERHALTEN
UND
PROTEINSYNTHESE
.
121
5.3.1
WACHSTUMSVERHALTEN
.
121
5.3.2
PROTEINSYNTHESE
.
124
5.4
ANHEFTUNG
UND
PROLIFERATION
MIT
BZW.
OHNE
FIBRONEKTIN
.
124
5.5
KOLLAGEN
UND
PROTEINSYNTHESE
VON
GINGIVA
UND
DESMODONTALFIBRO
BLASTEN
.
125
10
INHALT
5.5.1
KOLLAGENSYNTHESE
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
DER
ZELLART
.
125
5.5.2
EINFLUSS
DES
PLASMAKLOTS
AUF
DIE
KOLLAGENSYNTHESE
IN
DER
2.
PASSAGE
127
5.5.3
EINFLUSS
DER
FIBRONEKTINBESCHICHTUNG
AUF
DIE
KOLLAGENSYNTHESE
.
.
.
127
5.5.4
BIOLOGISCHE
BEDEUTUNG
DER
KOLLAGENSYNTHESE
FUER
DAS
DESMODONT
.
128
5.5.5
VERGLEICH
DER
PASSAGEN
.
130
5.5.6
SYNTHESE
VON
KOLLAGEN
TYP
I,
III
UND
V
.
130
5.5.7
PROZENTUALE
ANTEILE
DER
KOLLAGENTYPEN
AM
GESAMTKOLLAGEN
.
131
5.6
UEBERLEBENSRATE
PARODONTALER
FIBROBLASTEN
NACH
UNTERSCHIEDLICHER
GEFRIERKONSERVIERUNG
.
132
5.6.1
VERGLEICH
DER
GEFRIERKAMMER
UND
PROBENTEMPERATUREN
.
132
5.6.2
UEBERLEBENSRATEN
UND
GEFRIERMETHODEN
.
132
5.7
KOLLAGENSYNTHESE
DER
DESMODONTALFIBROBLASTEN
NACH
GEFRIERKONSER
VIERUNG
.
134
6
ZUSAMMENFASSUNG
.
139
LITERATUR
.
143
ANHANG
.
159 |
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