Herstellung und Charakterisierung monoklonaler Antikörper gegen die Beta-Kette des menschlichen Interleukin-2-Rezeptors:
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3
INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
ABKUERZUNGEN
5
I.
ZUSAMMENFASSUNG
6
II.
EINLEITUNG
8
III.
ERGEBNISSE
20
III.
1
ISOLIERUNG DER
IL-2RSS-KETTE
ZUR
HER
STELLUNG
MONOKLONALER
ANTIKOERPER
20
III.
1.1
EINLEITENDE
UEBERLEGUNGEN
20
III.
1.2
NACHWEIS
DER
IL-2RSS-KETTE
AUF
MLA-144-
ZELLEN
23
III.
1.3
12
5
J-IL-2-BINDUNGSSTUDIEN
24
III.
1.3.1
GRUNDLAGEN
DER
BINDUNG
VON
125
J-IL-2
25
III.
1.3.2
125
J-IL-2-BINDUNGSTEST
28
III.
1.3.3
IL-2RSS-EXPRESSION
WAEHREND
DER
MITOSE
30
III.
1.4
ISOLIERUNG DER
IL-2RSS-KETTE
AUS
MLA-144-ZELLEN
32
III.
1.4.1
PRAEPARATION
VON
MLA-144-MEMBRANPROTEINEN
33
III.
1.4.2
DEAE-ANIONENAUSTAUSCH-CHROMATOGRAPHIE
33
III.
1.4.3
IL-2-AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
35
III.
2
HERSTELLUNG
MONOKLONALER
ANTIKOERPER
GEGEN
DIE
IL-2RSS-KETTE
40
III.
2.1
IMMUNISIERUNG
40
III.
2.2
FUSION
41
III.
2.3
SUCHSYSTEM
ZUM
AUFFINDEN
ANTIGENSPEZIFISCHER
MONOKLONALER
ANTIKOERPER
42
III.
2.4
BEEINFLUSSEN
EXTRAZELLULAER
BINDENDE
ANTI
KOERPER
DIE
REZEPTOR-LIGAND-WECHSELWIRKUNG?
45
III.
3
CHARAKTERISIERUNG
MONOKLONALER
ANTIKOERPER
GEGEN
DIE
SS-KETTE
DES
IL-2-REZEPTORS
47
III.
3.1
SUBKLASSENBESTIMMUNG
DER
ANTIKOERPER
48
4
III.
3.2
EPITOPANALYSE
NACH
FRIGUET
ET
AL.
48
III.
3.3
IMMUNFLUORESZENZ
MONOKLONALER
A-IL-2RSS-ANTI
KOERPER
AN
MLA-144-ZELLPRAEPARATEN
50
III.
3.4
ERKENNEN
DIE
MONOKLONALEN
ANTIKOERPER
DIE
IL-2RSS-KETTE
AUF
MENSCHLICHEN
ZELLEN?
54
III.
3.5
IMMUNDETEKTION DER
IL-2RSS-KETTE
AUF
NITRO
ZELLULOSE
55
III.
3.6
RADIOIMMUNPRAEZIPITATION
DER
IL-2RSS-KETTE
AUS
EINEM
MLA-144-ZELLYSAT.
57
III.
3.7
ENZYMGEKOPPELTER
IMMUNADSORPTIONSTEST
(ELISA)
58
III.
4
WELCHEN
EINFLUSS
HAT
DIE
BINDUNG
DES
ANTI
IL-2R/?-ANTIKOERPERS
MAB
IV.2.E9
AUF
DIE
IL-2RSS-KETTE?
63
III.
4.1
BLOCKIERUNG DER
IL-2-BINDUNG
AN
DIE
IL-2R0
KETTE
DURCH
DEN ANTIKOERPER
MAB
IV.2.E9
63
III.
4.2
INDUZIERT
DER ANTIKOERPER
MAB
IV.2.E9
DIE
PHOSPHORYLIERUNG
DES
IL-2-REZEPTORS?
65
III.
4.3
WACHSTUMSHEMMUNG
VON
MLA-144-ZELLEN
IN
ZELL
KULTUR
DURCH
DEN
ANTIKOERPER
MAB
II.2.E9
67
III.
5
UNTERSUCHUNG
DER
0-KETTE
DES
INTERLEUKIN-2-
REZEPTORS
AUF
HUMANEN
GLIOBLASTOMZELLEN
71
III.
5.1
NACHWEIS
DER
IL-2RSS-KETTE
AUF
GLIO
UND
ASTROCYTOM-ZELLEN
72
IV.
DISKUSSION
76
V.
MATERIAL
UND
METHODEN
88
VI.
LITERATUR
112
VII.
LEBENSLAUF
127 |
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