Nachweis von PKC-Isoenzymen in humanen Tumor-Xenografts und Vergleich des Isoenzymprofils mit der Antitumor-Wirkung von PKC-Inhibitoren:
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INHALT
IV
INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG
1
2. MATERIAL & METHODEN G
2.1 MATERIALIEN UND LOESUNGEN G
2.2 GEWEBSPROBEN G
2.3 AUFSCHLUSSVERFAHREN 12
2.4 PROTEINBESTIMMUNG 12
2.5 PKC-AKTIVITAETSBESTIMMUNG 13
2.6 PLC-AKTIVITAETSBESTIMMUNG 14
2.7 HERSTELLUNG POLYKLONALER ANTIKOERPER 15
2.8 SDS-POLYACRYLAMID-GEL-ELEKTROPHORESE 18
2.G WESTERN-BLOTTING UND IMMUNFAERBUNG 20
2.10 QUANTIFIZIERUNG SPEZIFISCHER BANDEN
BEI DER WESTERN-BLOT-ANALYSE 21
2.11 ISOLIERUNG UND QUANTIFIZIERUNG VON RNA 23
2.12 SLOT-BLOT 27
3. ERGEBNISSE 30
3.1 VERGLEICH UNTERSCHIEDLICHER AUFSCHLUSSMETHODEN 30
3.2 OPTIMIERUNG DER TESTBEDINGUNGEN
FUER DIE PKC-AKTIVITAESBESTIMMUNG 32
3.3 OPTIMIERUNG DER TESTBEDINGUNGEN
FUER DIE PLC-AKTIVITAESBESTIMMUNG 37
3.4 BESTIMMUNG DER PKC-ENZYMAKTIVITAET
IN 20 HUMANEN TUMOR-XENOGRAFTS 39
3.5 BESTIMMUNG DER PIP2-PLC-ENZYMAKTIVITAET
IN 20 HUMANEN TUMOR-XENOGRAFTS 30
3.6 HERSTELLUNG UND CHARAKTERISIERUNG
POLYKLONALER ANTIKOERPER 43
3.7 VERTEILUNG DER PKC-ISOENZYME
IN 20 HUMANEN TUMOR XENOGRAFTS 57
3.8 DARSTELLUNG DER PKC-ISOENZYM-TRANSKRIPTE 68
3.8 VERGLEICH DES PKC-ISOENZYMMUSTERS MIT DER
IN
V/FRO-ANTITUMORWIRKUNG DREIER PKC-INHIBITOREN 71
4. DISKUSSION 80
5. ZUSAMMENFASSUNG 86
6. LITERATUR
87
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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