Einfluss von Natriumkanalaktivator BDF 9148 auf die Sekretion von Insulin bei Langerhans Inseln der NMRI-Maus:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1993
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O
EINFLUSS VON NATRIUMKANALAKTIVATOR BDF 9148 AUF DIE SEKRETION VON INSULIN
BEI LANGERHANS INSELN DER NMRI-MAUS
DISSERTATION
DER FAKULTAET FUER CHEMIE UND PHARMAZIE DER EBERHARD-KARLS-UNIVERSITAET
TUEBINGEN ZUR ERLANGUNG DES GRADES EINES DOKTORS DER NATURWISSENSCHAFTEN
1993
VORGELEGT VON
ANULUKANAPAKORN KALAYA
IMAGE 2
INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1 EINLEITUNG 1
1.1 MECHANISMUS DER INSULINSEKRETION 1
1.2 ELEKTROPHYSIOLOGIE DER SS-ZELLE 1
1.3 IONENKANAELE 5
1.3.1 KALIUMKANAL 5
ATP-SENSITIVER K -KANAL 5
DELAYED RECTIFYING K -KANAL 9
CA !T - UND SPANNUNGSABHAENGIGE K -KANAL 10
1.3.2 CALCIUMKANAL 12
1.3.3 INTRAZELLULAERES CALCIUM 13
1.3.3.1 CALCIUMINRLUX 13
1.3.3.2 CALCIUMEFFLUX 14
1.3.3.4 INTRAZELLULAERE UMVERTEILUNG 14
1.3.4 NATRIUMKANAL 14
1.4 NATRIUMKANALAKTIVATOR 19
1.4.1 DPI 201-106 19
1.4.2 BDF 9148 20
1.5 FRAGESTELLUNG 20
2 MATERIAL 22
2.1 VERSUCHSTIERE 22
2.2 CHEMIKALIEN 22
2.3 LOESUNGEN 23
2.3.1 KRB-LOESUNG 23
2.3.2 KRH-PUFFER 24
2.3.3 ASSAY-PUFFER FUER DEN INSULIN-RIA KIT 24
2.3.4 RATTENINSULIN-STANDARD 25
2.3.5 J-INSULIN 25
2.3.6 ANTIKOERPER LOESUNG I 25
2.3.7 ANTIKOERPER LOESUNG II 25
2.3.8 GUINEA-PIG IGG CARRIER 25
2.3.9 FAELLUNGSLOESUNGEN ZUR FAELLUNG DES INSULIN-ANTIKOEPER 26 -KOMPLEXES
2.3.9.1 PHOSPHATPIIFFER PH 7,4 26
2.3.9.2 KOHLELOESUNG NORIT AE 26
2.3.9.4 DEXTRANLOESUNG 26
IMAGE 3
2.4 VERWENDETE MEDIEN 26
2.4.1 MEDIUM FUER DIE PRAEPARATION DER INSELN 26
2.4.2 MEDIUM FUER DIE HAUPTINKUBATION BEI DER CA - BZW. 27 RB 1 - UND
!! NA -AUFNAHME 2.4.3 BELADUNGSMEDIUM FUER DIE PERIFUSIONSVERSUCHE 27
2.4.4 MEDIUM FUER DIE DURCHFUEHRUNG DER PERIFUSIONS- 27
VERSUCHE
3 METHODE 28
3.1 INSELNISOLIERUNG 28
3.1.1 ENTNAHME DES PANKREAS 28
3.1.2 ISOLIERUNG DER LANGERHANS INSELN 28
3.2 INSULINSEKRETIONSMESSUNG 29
3.2.1 INKUBATION 29
3.2.2 RADIOIMMUNOLOGISCHE BESTIMMUNG VON INSULIN 29 3.3 MESSUNG DES
RB -EFFLUXES 30
3.3.1 PERIFUSIONSAPPARATUR 30
3.3.2 PERIFUSIONSVERSUCHE ISOLIERTER LANGERHANS INSELN 31 3.3.2.1
BELADUNG DER LANGERHANS INSELN MIT 31
RADIOAKTIVITAET 3.3.2.2 VORBEREITUNG DER PERIFUSION 31
3.3.2.3 WASCHEN 31
3.3.2.4 PERIFUSIONSVORGANG 32
3.3.2.5 MESSUNG VON RB 32
3.3.2.6 BERECHNUNG DER EFFLUXRATE 33
3.4 MESSUNG DES ! CA ! -EF FLUX 33
3.5 METHOD ZUR MESSUNG DER CA !L - BZW. RB 1 -AUFNAHME 34
3.5.1 SILIKONOELTRENNMETHODE 34
3.5.2 VERSUCHSDURCHFUEHRIMG 34
3.5.2.1 VORBEREITUNG DER REAKTIONSGEFAESSE FUER DIE 34 INKUBATION 3.5.2.2
HAUPTINKUBATION 34
3.5.2.3 VORBEREITUNG ZUR MESSUNG 35
3.5.2.4 AUSVERTUNG 35
3.5.3 MESSUNG VON CALCIUM 36
3.6 METHODE ZUR MESSUNG DER NA 1 -AUFNAHME 36
3.7 STATISTIK 36
4 ERGEBNISSE 37
4.1 EINFLUSS VON BDF 9148 AUF DIE DURCH GLUCOSE STIMULIERTE 37
INSULINSEKRETION
IMAGE 4
4.2 EINFLUSS VON BDF 9148 AUF DIE DURCH VERSCHIEDENE GLUCOSE- 40
KONZENTRATIONEN INDUZIERTE INSULINSEKRETION
4.3 UNTERSUCHUNGEN MIT TOLBUTAMID UND KC1 42
4.3.1 EINFLUSS VON TOLBUTAMID AUF DIE INSULINFREISETZUNG 42
4.3.2 EINFLUSS VON BDF 9148 AUF DIE INSULINFREISETZUNG IN 42
GEGENWART VON TOLBUTAMID UND KC1
4.4 EINFLUSS VON BDF 9148 AUF DEN RB -EFFLUX 47
4.4.1 EINFLUSS VON BDF 9148 AUF DIE DURCH GLUCOSE GEHEMMTEN 47
RB -EFFLUX
4.4.2 EINFLUSS VON BDF 9148 AUF DEN RB -EFFLUX NACH 50
EINE ZUGABE VON TOLBUTAMID
4.4.3 EIFLUSS VON BDF 9148 AUF DIE RB -EFFLUX BEI 53
ABWESENHEIT VON GLUCOSE
4.4.4 EINFLUSS VON BDF 9148 AUF DEN RB -EFFLUX UNTER 53
STAENDIGER ANWESENHEIT VON 3,0 MMOL/1 GLUCOSE
4.4.5 EINFLUSS VON BDF 9148 AUF DEN RB -EFFLUX UNTER 53
STAENDIGER ANWESENHEIT VON 5,6 MMOL/1 GLUCOSE
4.5 EINFLUSS VON BDF 9148 AUF DIE CA -AUFNAHME 60
4.5.1 WIRKUNG VON 10 PMOL/1 BDF 9148 60
4.5.2 WIRKUNG VON 100 PMOL/1 BDF 9148 63
4.6 EINFLUSS VON BDF 9148 AUF DIE RB -AUFNAHME 65
4.7 EINFLUSS VON BDF 9148 AUF DIE NA -AUFNAHME 68
4.8 EINFLUSS VON BDF 9148 AUF DEN CA -EFFLUX 70
4.8.1 IN ABWESENHEIT VON GLUCOSE 70
4.8.2 IN ANWESENHEIT VON 16,7 MMOL/1 GLUCOSE 70
4.9 EINFLUSS VON BDF 9148 AUF DIE INSULINSEKRETION BEI 75
RATTENINSELN
4.10 EINFLUSS VON DPI 201-106, S-BDF (BDF 9196) UND R-BDF 77
(BDF 9167) AUF DIE INSULINSEKRETION
4.10.1 EINFLUSS VON DPI 201-106 AUF DIE DURCH GLUCOSE 77
INDUZIERTE INSULINSEKRETION
4.10.2 EINFLUSS VON S-BDF (BDF 9196) AUF DIE DURCH GLUCOSE 80
STIMULIERTE INSULINSEKRETION
4.10.3 EINFLUSS VON R-BDF (BDF 9167) AUF DIE DURCH GLUCOSE 80
STIMULIERTE INSULINSEKRETION
4.11 UNTERSUCHUNGEN MIT VERATRIDIN 85
4.12 EINFLUSS VON BDF 9148 AUF DEN DURCH CA IONOPHOR A 23187 91
STIMULIERTEN RB -EFFLUX
4.12.1 WIRKUNG VON 10 UMOL/1 BDF 9148 91
IMAGE 5
4.12.2 WIRKUNG VON 100 UMOL/1 BDF 9148 91
4.13 EINFLUSS VON BDF 9148 AUF DEN DURCH GLUCOSE HEMMBAREN 96
RB -EFFLUX
5 DISKUSSION 99
5.1 WIRKUNG DES BDF 9148 AUF DIE INSULINSEKRETION 99
5.2 WIRKUNG VON 10 UMOL/1 BDF 9148 99
5.2.1 UNTERSUCHUNG MIT TOLBUTAMID UND KC1: BDF 9148 100
UND INSULINSEKRETION
5.2.2 BDF 9148 UND KALIUMLEITFAEHIGKEIT 100
5.2.3 BDF 9148 UND CA -AUFNAEHME 101
5.2.4 BDF 9148 UND CA -EFFLUX 101
5.2.5 BDF 9148 UND RB -AUFNAEHME 102
5.2.6 BDF 9148 UND NA 1-AUFNAHME 102
5.2.7 UNTERSUCHUNGEN MIT VERATRIDIN 103
5.3 WIRKUNG VON HOEHERER KONZENTRATION VON BDF 9148 104
5.3.1 BDF 9148 UND !CA! -AUFNAEHME 104
5.3.2 BDF 9148 UND K -LEITFAEHIGKEIT 104
5.4 BDF 9148 UND INSULINSEKRETION AN RATTENINSELN 105
5.5 DPI 201-106, BDF 9196, BDF 9167 UND INSULINSEKRETION 105
5.6 SCHLUSSFOLGERUNG 106
6 ZUSAMMENFASSUNG 107
6.1 FRAGESTELLUNG 107
6.2 ERGEBNISSE 107
6.3 SCHLUSSFOLGERUNG 109
LITERATURVERZEICHNIS 110
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