Molekulargenetische und isoenzymatische Untersuchungen an Sonnenblumen (Helianthus annuus L.) unter dem Aspekt der Markerselektion und Charakterisierung von Linien und Hybriden:
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Aachen
Shaker
1994
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
I
EINLEITUNG
1
II
LITERATURUEBERSICHT
3
II.
1
EINSATZMOEGLICHKEITEN
GENETISCHER
MARKER
IN
DER
PFLANZENZUECHTUNG
3
II.
1.1
ISOENZYME
ALS
GENETISCHE
MARKER
4
II.
1.2
RESTRIKTIONSFRAGMENTLAENGENPOLYMORPHISMEN
(RFLPS)
ALS
GENETISCHE
MARKER
6
II.
1.2.1
GENKARTEN
UND
MARKER
FUER
QUALITATIVE
UND
QUANTITATIVE
MERKMALE
7
II.
1.2.2
DNA-FINGERPRINTS
ZUR
CHARAKTERISIERUNG
VON
GENOTYPEN
8
II.
1.3
POLYMORPHE
PCR-PRODUKTE
ALS
GENETISCHE
MARKER
10
II.
2
FALSCHER
MEHLTAU
-
EINE
PILZERKRANKUNG
DER
SONNENBLUME
11
M
MATERIAL
13
III.
1
PFLANZENMATERIAL
13
III.
2
BAKTERIEN
UND
VEKTOREN
13
III.
3
PRIMER
13
III.
4
LOESUNGEN,
MEDIEN
UND
PUFFER
14
IV
METHODEN
16
IV.
1
PFLANZENANZUCHT
UND
KREUZUNGEN
16
IV.
2
BIOCHEMISCHE
METHODEN
16
IV.
2.1
STAERKEGELELEKTROPHORESE
16
IV.
3
MOLEKULARGENETISCHE
METHODEN
18
IV.
3.1
PRAEPARATION
VON
HOCHMOLEKULARER
SONNENBLUMEN-DNA
18
IV.
3.1.1
MAXIPRAEPARATION
PFLANZLICHER
DNA
19
IV.
3.1.2
MINIPRAEPARATION
PFLANZLICHER
DNA
20
IV.
3.2
QUANTIFIZIERUNG
DER
ISOLIERTEN
DNA
21
IV.
3.2.1
SPEKTRALPHOTOMETRISCHE
MESSUNG
21
IV.3.2.2
FLUOROMETRISCHE
MESSUNG
21
IV.
3.3
RES
TRIKTIONS
VERDAU
22
IV.
3.4
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
23
IV.
3.
S
SOUTHERN-TRANSFER
25
IV.
3.
S.
1
KAPILLAR-TRANSFER
25
IV.3.S.2
VAKUUM-TRANSFER
26
IV.
3.6
PRAEPARATION
VON
SONDEN
FUER
DIE
RFLP-ANALYSE
26
IV.3.6.
1
DEPHOSPHORYLIERUNG
DER
VEKTOR-DNA
26
IV.
3.6.2
LIGATION
VON
INSERT
UND
VEKTOR-DNA
27
IV.
3.6.3
HERSTELLUNG
TRANSFORMATIONSKOMPETENTER
BAKTERIEN
27
IV.
3.6.4
TRANSFORMATION
IN
ESCHERICHIA
COLI
BAKTERIEN
28
IV.3.6.S
PRAEPARATION
VON
PLASMID-DNA
28
IV.3.6.
5.1
MAXIPRAEPARATION
VON
PLASMID-DNA
29
IV.3.6.S.2
MINIPRAEPARATION
VON
PLASMID-DNA
29
IV.
3.7.
ISOLIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
AUS
AGAROSEGELEN
30
IV.
3.7.1
ISOLIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
MITTELS
ELEKTROELUTION
30
IV.3.
7.2
ISOLIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
MITTELS
FLUESSIGEM
STICKSTOFF
30
IV.
3.7.3
ISOLIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
MIT
HILFE
EINER
KIESELGELSUSPENSION
31
IV.
3.7.4
ISOLIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
DURCH
VERWENDUNG
DES
ENZYMS
GELASE
31
IV.
3.8
DOT-BLOT
31
IV.
3.9
MARKIERUNG
VON
DNA
32
IV.
3.9.
1
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
MIT
A-F
32
PLDCTP
32
IV.
3.9.2
NICHT-RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
MIT
DIGOXIGENIN
33
IV.
3.10
HYBRIDISIERUNG
UND
DETEKTION
DER
SIGNALE
34
IV.
3.
10.1
RADIOAKTIVE
HYBRIDISIERUNG
UND
AUTORADIOGRAPHIE
34
IV.
3.10.2
NICHT-RADIOAKTIVE
HYBRIDISIERUNG
UND
DETEKTION
35
IV.
3.10.2.1
HYBRIDISIERUNG
FUER
RFLP
UND
DOT-BLOT-ANALYSEN
35
IV.3.
10.2.2
HYBRIDISIERUNG
FUER
DNA-FINGERPRINT-ANALYSEN
35
IV.
3.10.2.3
IMMUNOLOGISCHER
NACHWEIS
DER
HYBRIDISIERUNGSSIGNALE
36
IV.3.
11
AMPLIFIKATION
VON
GENOMISCHER
DNA
MITTELS
PCR
37
IV.3.
11.1
QUANTIFIZIERUNG
DER
OLIGONUKLEOTIDE
38
IV.3.
11.2
BESTIMMUNG
DER
ANNEALING-TEMPERATUR
38
IV.3.
11.3.
PCR-BEDINGUNGEN
42
V
V.L
ERGEBNISSE
KREUZUNGSEXPERIMENTE
44
44
V.
2
ISOENZYMELEKTROPHORESE
4S
V.
2.1
BERECHNUNG
DER
AEHNLICHKEIT
VON
LINIEN
UND
HYBRIDEN
47
ANHAND
DER
ISOENZYMMUSTER
V.3
DNA-FINGERPRINTING
MIT
OLIGONUKLEOTID-SONDEN
48
V.3.1
ANALYSE
DER
VERSCHIEDENEN
ENZYM-SONDEN
48
KOMBINATIONEN
V.3.
2
HOMOGENITAETS-UND
ABSTAMMUNGSUNTERSUCHUNGEN
S4
V.
3.3
BERECHNUNG
DER
AEHNLICHKEIT
VON
LINIEN
UND
HYBRIDEN
S8
ANHAND
VON
DNA-FINGERPRINTS
MIT
OLIGONUKLEOTID
SONDEN
V.4
AUSWERTUNG
DER
PCR-PRODUKTE
S9
V.4.1
AUSWERTUNGSKRITERIEN
60
V.4.
2
EINFLUSS
DER
ANNEALING-TEMPERATUR
61
V.4.
3
SELEKTION
DER
PRIMER
62
V.4.
4
DIFFERENZIERUNG
UND
ABSTAMMUNGSUNTERSUCHUNGEN
64
V.4.
4.1
RAPD-PRIMER
6S
V
.
4.4.2
AP-PCR-PRIMER
6
7
V.4.
4.3
(GACA).,
(GATA).
UND
(GGAT).
ALS
PRIMER
69
4
4
4
V.
4.
S
BERECHNUNG
DER
AEHNLICHKEIT
VON
LINIEN
UND
HYBRIDEN
71
ANHAND
VON
PCR-PRODUKTEN
V.
S
VERSUCHE
ZUR
IDENTIFIZIERUNG
EINES
RESISTENZMARKERS
72
V.
S.L
SONNENBLUMEN-SONDEN
72
V.
S.
2
DOT-BLOT
HYBRIDISIERUNGEN
73
V.
S.3
SOUTHERN-BLOT
HYBRIDISIERUNGEN
MIT
SONNENBLUMEN
74
SONDEN
V.
5.4
VERGLEICHENDE
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
RADIOAKTIVEN
UND
7S
NICHT
RADIOAKTIVEN
HYBRIDISIERUNG
V.
6
KALKULATION
VON
KOSTEN
UND
ZEITAUFWAND
DER
VER
77
SCHIEDENEN
METHODEN
V.
6.1
KOSTENAUFWAND
77
V.6.2
ZEITAUFWAND
80
VI
DISKUSSION
81
VI.
1
VI.
2
NILS
UND
DIE
ISOLIERUNG
VON
RESISTENZMARKERN
81
CHARAKTERISIERUNG
VON
GENOTYPEN
MITTELS
ISOENZYM
83
ELEKTROPHORESE
INHALTSVERZEICHNIS
VI.
2.1
PHOSPHOGLUCOMUTASE
(PGM)
83
VI.
2.2
ESTERASE
(EST)
84
VI.
2.3
GLUCOSEPHOSPHATISOMERASE
(GPI)
8S
VI.
3
DNA-FINGERPRINTS
MIT
OLIGONUKLEOTID-SONDEN
86
VI.
4
CHARAKTERISIERUNG
VON
GENOTYPEN
MITTELS
POLYMORPHER
PCR-PRODUKTE
88
VI.S
BEURTEILUNG
DES
RADIOAKTIVEN
UND
DES
NICHT-RADIO
AKTIVEN
HYBRIDISIERUNGS
VERF
AEHRENS
91
VI.
6
EINFLUSS
DER
VERSCHIEDENEN
MARKERSYSTEME
AUF
DIE
BE
RECHNUNG
DER
GENETISCHEN
AEHNLICHKEIT
VON
GENOTYPEN
92
VI.
7
PRAKTISCHE
FOLGERUNGEN
FUER
DIE
PFLANZENZUECHTUNG
96
VII
ZUSAMMENFASSUNG
100
VIII
SUMMARY
102
IX
LITERATURVERZEICHNIS
104 |
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| title | Molekulargenetische und isoenzymatische Untersuchungen an Sonnenblumen (Helianthus annuus L.) unter dem Aspekt der Markerselektion und Charakterisierung von Linien und Hybriden |
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