Kryokonservierung von Lemnaceae: = Cryopreservation of Lemnaceae
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Zürich
Geobotanisches Inst. ETH, Stiftung Rübel
1993
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112 |
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INHALTSVERZEICHNIS
Vorwort 5
1. Einleitung 6
1.1. Problemstellung 6
1.2. Physikalisches Verhalten wässeriger Lösungen bei tiefen Temperaturen 8
1.3. Zellschädigung bei tiefen Temperaturen und natürliche Frostresistenz 11
1.4. Die Kryokonservierung 14
1.5. Stand der Forschung in der Pflanzenkryokonservierung 17
2. Material und Methoden 19
2.1. Die Familie der Lemnaceae 19
2.2. Verwendete Arten und Stämme 22
2.3. Sterilisation und Kultivierung der Pflanzen 22
2.4. Gewinnung von Turionen und Samen 26
2.5. Kryokonservierung der Lemnaceae 27
2.6. Anfertigung transparenter Gliedpräparate 30
2.7. Osmolalitätsmessungen 31
2.8. Statistische und graphische Auswertungen 32
3. Resultate 34
3.1. Morphologische Beobachtungen 34
3.2. Einfluss verschiedener Faktoren auf die Überlebensrate von Lemna minor 39
3.2.1. Wirkung verschiedener Gefrierschutzmittel in Abhängigkeit von
Konzentration und Einwirkungszeit 40
3.2.2. Einfluss von Vorkühlung, Kühlrate und Auftaugeschwindigkeit 48
3.2.3. Einfluss der verwendeten Kulturmedien 53
3.2.4. Einfluss des Kulturalters 58
3.2.5. Stickstofflagerung über längere Zeiträume 60
3.3. Anwendung vielversprechender Methoden bei verschiedenen Arten
und Stämmen 61
3.3.1. Testung sämtlicher Lemnoideae-Arten 61
3.3.2. Methodische Abänderungen bei vier Arten 67
3.3.3. Versuche mit Wolffioideae-hnen 78
3.4. Kryokonservierung von Spirodela polyrrhiza-Tanonen und Lemna 80
aequinoctialis-Samen
3.5. Anzahl vorhandener Tochterglieder pro Mutterglied einiger Arten 83
3.6. Osmolalität von Kryosäften einiger Lemnaceae-Arten und von
Gefrierschutzmitteln 86
3.7. Physikalische Eigenschaften verwendeter Gefrierschutzlösungen 91
4. Diskussion . , 107
4.1. Mögliche Wirkungsweisen extra- lid intrazellulärer Komponenten 107
4.2. Schädigungsgrad der überlebenden Zellen 113
4.3. Vergleich der Gefrierresistenz von Arten und Stämmen (Lemnoideae) 114
4.4. Methodische Änderungen, welche die Überiebensrate verschiedener
Arten erhöhen könnten 115
4.5. Eignung der Kryokonservierung für Lemnaceae 119
Zusammenfassung - Summary 121
Literaturverzeichnis 124
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