Untersuchungen zur Beziehung von Kohlenstoff- und Stickstoffmetabolismus in Spinatpflanzen (Spinacia oleracea L.):
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| adam_text | UNTERSUCHUNGEN ZUR BEZIEHUNG VON KOHLENSTOFF- UND STICKSTOFFMETABOLISMUS
IN SPINATPFLANZEN (SPINACIA OLERACEA L.) DISSERTATION ZUR ERLANGUNG DES
NATURWISSENSCHAFTLICHEN DOKTORGRADES DER
MATHEMATISCH-NATURWISSENSCHAFTLICHEN FACHBEREICHE DER
GEORG-AUGUST-UNIVERSITAET ZU GOETTINGEN VORGELEGT VON BURGI RIENS AUS
GIFHORN GOETTINGEN 1992 INHALTSVERZEICHNIS 1. EINLEITUNG 1 1.1. DER WEG
DES KOHLENSTOFFES IN DER PFLANZE 1 1.2. DER WEG DES STICKSTOFFES IN DER
PFLANZE 4 1.3. DER ZUSAMMENHANG ZWISCHEN KOHLENSTOFF-UND
STICKSTOFFRNETABOLISMUS 6 1.4. DER TRANSPORT VON METABOLITEN INNERHALB
DER PFLANZE 7 1.5. ZIELSETZUNG DER ARBEIT 8 2. MATERIAL UND METHODEN 9
2.1. PFLANZENMATERIAL UND ANZUCHT 9 2.1.1. ZUSAMMENSETZUNG DER
NAEHRLOESUNGEN 9 2.2. BESTIMMUNG DER PHOTOSYNTHETISCHEN AKTIVITAET 10
2.2.1. BLATTSCHEIBEN-SAUERSTOFF-ELEKTRODE 10 2.2.2. GASWECHSELANLAGE 10
2.2.3. MESSPRINZIP DES CO2 / H2O - POROMETERS 11 2.3.
CHLOROFORM/METHANOL-EXTRAKTION 11 2.3.1. ENTFAERBUNG DER EXTRAKTE 12 2.4.
OPTISCH-ENZYMATISCHE METABOLITBESTIMMUNGEN 13 2.4.1. NITRAT 13 2.4.2.
MALAT 14 2.4.3. 2-OXOGLUTARAT 14 2.4.4. PYRUVAT UND PHOSPHOENOLPYRUVAT
15 2.4.5. HYDROXYPYRUVAT 15 2.4.6. SACCHAROSE 16 2.4.7. STAERKE 17 2.5.
NITRITBESTIMMUNG 18 2.5.1. OBERPRUEFUNG DER ZUVERLAESSIGKEIT DER
EXTRAKTIONSMETHODE 18 2.6. CHROMATOGRAPHISCHE BESTIMMUNG VON AMINOSAEUREN
19 2.6.1. DERIVATISIERUNG MIT NINHYDRIN 20 2.6.2. DERIVATISIERUNG MIT
OPA 21 2.6.2.1. REVERSED-PHASE HPLC: ENTWICKLUNG DER METHODE 22 2.6.2.2.
IM ROUTINEBERIEB EINGESETZTE METHODE ZUR AMINOSAEURE-ANALYSE 26 2.7.
UNTERSUCHUNGEN ZUM EINFLUSS DES NITRATGEHALTES DER NAEHRLOESUNG AUF
DIURNALE METABOLITAENDERUNGEN 31 2.8. NICHTWAESSRIGE FRAKTIONIERUNG 31
2.9. NITRATREDUKTASE-AKTIVITAETSMESSUNG 33 2.10. ANREICHERUNG DER
NITRATREDUKTASE 34 2.11. PROTEINBESTIMMUNG 35 2.12.
SDS-GELELEKTROPHORESE 36 2.12.1. BESTIMMUNG DER MOLEKULARGEWICHTE 37
2.12.2. PROTEINFAERBUNG 37 2.13. WESTERN-BLOT-UNTERSUCHUNGEN 38 2.13.1.
AMIDO-SCHWARZ-FAERBUNG 39 3. ERGEBNISSE 41 3.1. 3.1.1. 3.1.2. 3.1.3.
3.1.3.1. 3.1.3.2. 3.1.4. 3.1.5. 3.1.6. 3.1.7. 3.1.8. 3.1.9. 3.1.10.
AENDERUNGEN VON METABOLITGEHALTEN BEI UNTERSCHIEDLICHER NITRAT-
VERFUEGBARKEIT IM DIURNALEN RHYTHMUS VORBEMERKUNGEN BLATTENTWICKLUNG
PHOTOSYNTHESELEISTUNG DIURNALE AENDERUNG DER CO2-ASSIMILATIONSRATE UNTER
STANDARDBEDINGUNGEN CO2-ASSIMILATIONSRATEN BEI VERSCHIEDENEN
ANZUCHTBEDINGUNGEN NITRATGEHALT MALATGEHALT SACCHAROSE- UND STAERKEGEHALT
2-OXOGLUTARAT-, PYRUVAT- UND PHOSPHOENOLPYRUVATGEHALTE GLUTAMAT- UND
GLUTAMINGEHALTE ASPARTAT- UND ASPARAGINGEHALTE SERIN- UND GLYCINGEHALTE
41 41 42 44 44 46 46 51 53 56 58 61 67 3.1.11. ALANINGEHALTE 67 3.1.12.
VALINGEHALTE 71 3.1.13. THREONIN-, UND ISOLEUCIN- UND TYROSINGEHALTE 71
3.1.14. FIXIERUNG VON KOHLENSTOFF UND STICKSTOFF IN AMINOSAEUREN 71
3.1.15. ZUSAMMENFASSUNG DER WICHTIGSTEN MERKMALE 75 3.2. BESTIMMUNG VON
SUBZELLULAEREN METABOLITGEHALTEN 78 3.2.1. SUBZELLULAERE VERTEILUNG VON
AMINOSAEUREN 79 3.2.2. SUBZELLULARE VERTEILUNG VON SACCHAROSE 83 3.3.
METABOLITAENDERUNGEN WAEHREND DES LICHT/DUNKEL-UEBERGANGES 86 3.4.
AKTIVITAETSAENDERUNGEN DER NITRATREDUKTASE 91 3.4.1. LICHT/DUNKEL- BZW.
DUNKEL/LICHT-UEBERGAENGE 91 3.4.2. REAKTIVIERUNG DER DUNKEL-INAKTIVIERTEN
NITRATREDUKTASE 93 3.4.3. EINFLUSS VON MG 2+ -IONEN AUF DIE AKTIVITAET DER
NITRATREDUKTASE 96 3.4.4. EINFLUSS VON ATP AUF DIE
NITRATREDUKTASE-AKTIVITAET 101 3.4.5. EINFLUSS VON PHOSPHATASEN,
PHOSPHATASEINBIBITOREN UND METABOLITEN AUF DIE NITRATREDUKTASE-AKTIVITAET
104 3.4.6. ISOLIERUNG UND GELELEKTROPHORETISCHE UNTERSUCHUNGEN DER
NITRATREDUKTASE 107 4. DISKUSSION 113 4.1. AENDERUNGEN VON KOHLENSTOFF-
UND STICKSTOFFAKKUMULATION IM DIURNALEN RHYTHMUS 113 4.2. ZUR INTRA- UND
INTERZELLULAEREN VERTEILUNG VON AMINOSAEUREN UND SACCHAROSE 119 4.2.1.
INTRAZELLULAERE VERTEILUNG 119 4.2.2. INTERZELLULAERE VERTEILUNG 121 4.3.
ZUM EINFLUSS DES ZELLULAEREN NITRATGEHALTES AUF DEN PFLANZLICHEN
STOFFWECHSEL 125 4.3.1. ZUSAMMENHANG ZWISCHEN NITRATASSIMILATION UND
ENERGIEBEDARF 125 4.3.2. ZUSAMMENHANG ZWISCHEN NITRATASSIMILATION UND
KOHLENSTOFF- AKKUMULATION 128 4.3.3. DIE ROLLE VON MALAT BEI DER
NITRATASSIMILATION 130 4.3.4. DIE ROLLE VON SACCHAROSE UND STAERKE BEI
DER NITRATASSIMILATION 132 4.3.5. EINFLUSS DER REDUKTION DES ZELLULAEREN
NITRATGEHALTES AUF AMINOSAEUREN UND AMINOSAEURE-VORLAEUFER 132 4.4. ZUR
REGULATION DER NITRATREDUKTASE 139 4.5. UEBERLEGUNGEN ZUR BEDEUTUNG DER
ENZYMPHOSPHORYLIERUNG IM PFLANZLICHEN STOFFWECHSEL 142 5.
ZUSAMMENFASSUNG 144 6. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 147 7. LITERATURVERZEICHNIS
149
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