Import, Sortierung und Assemblierung von kernkodierten Proteinen des Chloroplasten:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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1992
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| adam_text | IMPORT, SORTIERUNG UND ASSEMBLIERUNG VON KERNKODIERTEN PROTEINEN DES
CHLOROPLASTEN DISSERTATION ZUR ERLANGUNG DES DOKTORGRADES DER FAKULTAET
FUER BIOLOGIE DER LUDWIG-MAXIMILIANS-UNIVERSITAET MUENCHEN VORGELEGT VON
SUSANNE CLAUSMEYER AUS BOCHUM 1992 INHALTSVERZEICHNIS ABKUERZUNGEN 4 1.
EINLEITUNG 7 2. MATERIAL UND METHODEN 19 2.1 MATERIAL 19 2.1.1
CHEMIKALIEN 19 2.1.2 DNA-LAENGENSTANDARDS 19 2.1.3
MOLEKULARGEWICHTSMARKER FUER PROTEINE 19 2.1.4 VEKTOREN UND WIRTSSTAEMME
20 2.1.5 PFLANZENMATERIAL 20 2.2 METHODEN 20 2.2.1 STANDARDMETHODEN 20
2.2.1.1 . STERILES ARBEITEN 20 2.2.1.2 ANZUCHT VON . CO// 20 2.2.1.3
ISOLIERUNG VON PLASMID-DNA 21 2.2.1.4 RESTRIKTION VON DNA 22 2.2.1.5
GELELEKTROPHORESE VON DNA 22 2.2.1.6 ISOLIERUNG VON DNA-FRAGMENTEN AUS
GELEN 23 2.2.1.7 AGAROSEGELELEKTROPHORESE VON RNA 24 2.2.1.8 KLONIERUNG
IN E. COLI 24 2.2.1.9 KOLONIEHYBRIDISIERUNG 26 2.2.1.10 RADIOAKTIVE
MARKIERUNG VON DNA 28 2.2.1.10.1 3 -TERMINALE MARKIERUNG VON
DNA-FRAGMENTEN MIT DER KLENOW- POLYMERASE 28 2.2.1.10.2. MARKIERUNG VON
DNA-FRAGMENTEN DURCH RANDOM PRIMING 28 2.2.1.10.3 5 -TERMINALE
MARKIERUNG VON OLIGONUKLEOTIDEN MIT DER POLYNUKLEOTIDKINASE 29 2.2.1.11
SEQUENZIERUNG VON DNA 30 2.2.1.12 SEQUENZGELE 32 . 2.2.2
OLIGONUKLEOTIDSYNTHESE UND -AUFREINIGUNG 32 2.2.3 IN VITRO TRANSKRIPTION
34 2.2.4 IN VITRO TRANSLATION 35 2.2.5 IMPORT VON PROTEINEN IN INTAKTE
CHLOROPLASTEN 36 2.2.6 GELELEKTROPHORESE VON PROTEINEN 39 2.2.6.1
POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE NACH LAEMMLI 39 2.2.6.2
POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE NACH SCHAEGGER UND VON JAGOW 40 2.2.6.3
ANFAERBUNG UND FLUOROGRAPHIE VON PROTEINGELEN 41 2.2.6.4
WESTERN -TRANSFER UND IMMUNOLOGISCHER NACHWEIS VON PROTEINEN 42 3.
ERGEBNISSE 43 3.1 IMPORT AUTHENTISCHER KERNKODIERTER VORSTUFENPROTEINE
IN ISOLIERTE CHLOROPLASTEN AUS SPINAT 43 3.2 ETABLIERUNG EINES
KASSETTENSYSTEMS FUER TRANSITPEPTIDE UND REIFE PROTEINE KERNKODIERTER
POLYPEPTIDE DES CHLOROPLASTEN 55 3.2.1 KONSTRUKTION DER KASSETTEN FUER
TRANSITPEPTIDE UND REIFE PROTEINE 55 3.2.2 KONSTRUKTION DER CHIMAEREN
PROTEINE 60 3.3 ANALYSE DER BETEILIGUNG VON TRANSITPEPTIDEN UND REIFEN
PROTEINEN KERNKODIERTER POLYPEPTIDE DES THYLAKOIDLUMENS AN IMPORT UND
SORTIERUNG IM ORGANELL 62 3.3.1 IMPORT VON FUSIONSPROTEINEN AUS
TRANSITPEPTIDEN UND REIFEN ANTEILEN LUMINALER PROTEINE 62 3.3.2
INNERPLASTIDAERE SORTIERUNG UND PROZESSIERUNG VON FUSIONSPROTEINEN AUS
TRANSITPEPTIDEN UND REIFEN ANTEILEN LUMINALER PROTEINE 66 3.3.3 IMPORT
UND INNERPLASTIDAERE SORTIERUNG LUMINALER PROTEINE UNTER DEM EINFLUSS DES
TRANSITPEPTIDS DER FNR 69 3.4 ANALYSE VON IMPORT UND INNERPLASTIDAERER
SORTIERUNG DES RIESKE FE/S-PROTEINS 71 3.4.1 IMPORT UND SORTIERUNG DES
RIESKE FE/S-PROTEINS UNTER DEM EINFLUSS LUMEN- UND STROMADIRIGIERENDER
TRANSITPEPTIDE 71 3.4.2 ISOLIERUNG DES CYTOCHROM OEG/F-KOMPLEXES NACH DEM
IMPORT 76 3.4.3 EINFLUSS DES TRANSLATIONSSYSTEMS AUF DAS IMPORTVERHALTEN
DES RIESKE FE/S-PROTEINS 79 3.5 IMPORT VON PLASTIDAER KODIERTEN PROTEINEN
UNTER VERWENDUNG DES TRANSITPEPTIDS DER SSU 80 4. DISKUSSION 83 4.1
ANALYSE DES IN ORGANELLO IMPORTS VON AUTHENTISCHEN VORSTUFENPROTEINEN
UNTERSCHIEDLICHER PLASTIDAERER BEREICHE 84 4.2 CHARAKTERISTIKA DES
KASSETTENSYSTEMS 87 4.3 UNTERSUCHUNGEN ZU IMPORT UND INNERPLASTIDAERER
SORTIERUNG VON KERNKODIERTEN PROTEINEN DES THYLAKOIDLUMENS 90 4.4
UNTERSUCHUNGEN ZUR INNERPLASTIDAEREN SORTIERUNG DES RIESKE FE/S- PROTEINS
100 4.5 DAS IMPORTVERHALTEN PLASTIDAER KODIERTER PROTEINE UNTER DEM
EINFLUSS DES TRANSITPEPTIDS DER SSU 107 5. ZUSAMMENFASSUNG 110 6.
LITERATURVERZEICHNIS 112 7. DANKSAGUNG 130 8. LEBENSLAUF 131
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