Gelchromatographie: Gelfiltration, Gelpermeation, Molekülsiebe ; ein Laboratoriumsbuch
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| adam_text | Inhaltsverzeichnis
J;.Erstes Kapitel
Einführung
Stofftrennung aufgrund von Molekulargewichtsunterschieden......... 1
Dialyse............................... 2
1 Homogene Gele........................... 3
Chromatographie an granulierten Gelen . ................ 4
Versuchsbeispiel.......................... 6
Diskussion des Namens........................ 8
Historischer Überblick.......................... 9
Ionenaustauscher........................... 9
Neutrale Gele............................ 10
Literatur................................ 12
Zweites Kapitel
Praxis der Gelchromatographie
Materialien............................... 14
Herstellung von hydrophilen Gelen .................. 16
Dextrangele ........................... 16
Polyacrylamidgele......................... 19
Agargele, Agarosegele....................... 21
Herstellung von organophilen Gelen.................. 23
Sephadex-Derivatc ........................ 23
Acrylgele ............................ 24
Poiystyrolgclc .......................... 25
Acrogcle............................. 27
Handelsübliche Gele......................... 28
Sephadex ............................ 28
Scphadex LH-20 ......................... 30
Bio-Gel............................. 31
Agarose............................. 32
Styragel............................ 33
Geräte................................ 34
Kolonnen............. ............. 35
Pumpen ...... . 36
Schlauchverbindungen . 3g
Detektoren.......... 39
Fraktionensammler.......... ........... 42
Integrierte Einheiten...... ... . 42
Versuchstechnik mit Kolonnen ...... ......... 4S
Packen des Gelbetts . 4^
Chromatographie ............. 47
Starten .......... 47
X Inhaltsverzeichnis
Eluieren............................. 49
Analysieren............................ 51
Verlängerung des Gelbetts ...................... 51
Umlauf-Chromatographie...................... 52
Dünnschicht-Gelchromatographie..................... 55
Vorbereitung............................ 55
Ausführung............................. 56
Ergebnisse ............................. 58
Zentrifugentechnik........................... 59
Geräte............................... 60
Versuchsbeispiele.......................... 62
Entsalzung in der Korb-Zentrifuge................. 62
Konzentrierung.......................... 62
Literatur................................ 64
Drittes Kapitel
Theorie
Zahlenmäßige Auswertung der Versuchsergebnisse............. 68
Volumenverhältnisse in der Gelpackung................. 68
Elutionsparameter.......................... 70
Trennleistung einer Gelpackung ..................... 73
Versuche zur Deutung des Trenneffekts.................. 76
Das Ausschluß-Konzept ....................... 77
Einfache geometrische Modelle................... 78
Das Ogston-Laurent sche Gelmodell................. 79
Das Konzept der Diffusionsbehinderung ................ 81
Vergleichende Diskussion der Konzepte................. 82
Das Verteilungs-Konzept....................... 83
Affinität gelöster Stoffe zur Gelphase ................... 85
Verteilung und Adsorption...................... 85
Hydrophile Gele........................... 87
Literatur................................ 89
Viertes Kapitel
Annindungsprinzjpim
Gelfiltration.............................. 93
Entsalzung............................. 94
Gruppentrennung.......................... 97
Modifizierung von Makromolekülen.................. 99
Komplexbildung........................... 102
Gelchromatographie........................... 106
Molekulargewichtsbestimmung...................... 112
Eichung .............................. 113
Technik .............................. 118
Molekulargewichtsbestimmung von Proteinen.............. 120
Theorie............................. 120
Ergebnisse............................ 122
Assoziationsgleichgewichte..................... 125
Inhaltsverzeichnis XI
Untersuchung polydisperser Systeme.................. 127
Allgemeine Grundlagen...................... 128
Gekhromatographie........................ 129
Auswertung von Gel-Permeations-Chromatogrammen......... 131
Ergebnisse............................ 134
Trennung ohne Größenunterschiede.................... 137
Chromatographie mit wäßrigen Elutionsmitteln ............. 138
Chromatographie mit organischen Lösungsmitteln............ 141
Fraktionierte Fällung......................... 144
Literatur................................ 145
Fünftes Kapitel
Ergebnisse
Enzymologie.............................. 151
Isolierung von Enzymen....................... 151
Enzymatische Reaktionen....................... 153
Endokrinologie............................. 154
Chemie der Plasmaproteine........................ 157
Strukturermittlung von Proteinen..................... 161
Nucleinsäure-Chemie .......................... 164
Nucleinsäuren............................ 164
Oligonucleotide........................... 166
Virustrennung............................ 167
Kohlenhydrate............................. 167
Klinische Chemie............................ 169
Verschiedene Anwendungsgebiete..................... 171
Literatur................................ 175
Bibliographie..............................179
Namenverzeichnis............................180
Sachverzeichnis.............................197
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