Holdings: Elektronenmikroskopische Untersuchungs- und Präparationsmethoden

Elektronenmikroskopische Untersuchungs- und Präparationsmethoden:

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Bibliographic Details
Main Author:	Reimer, Ludwig (Author)
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Language:	German
Published:	Berlin [u.a.] Springer 1967
Edition:	2., erw. Aufl.
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adam_text	Inhaltsverzeichnis A. Untersuchungsmethoden § 1. Elektronenoptische Grundlagen des Durchstrahlungsmikroskopes ... 1 1.1. Elektronenstrahlerzeugung................. 1 1.1.1. Elektronenaustritt in das Vakuum........... 1 1.1.2. Die Beschleunigung der Elektronen zwischen Kathode und Anode....................... 2 1.1.3. Die Haarnadelkathode................ 4 1.1.4. Einfluß der Form des Wehneltzylinders auf den Richt- strahlwert ..................... 6 1.1.5. Spitzen-und Oxydkathoden............. 9 1.1.6. Die Energieverteilung der Elektronen.......... 12 1.2. Elektronenlinsen...................... 13 .2.1. Elektrostatische Linsen............... 13 .2.2. Magnetische Linsen................. 17 .2.3. Permanentmagnetische Linsen............. 23 1.3. Bildfehler......................... 24 .3.1. öffnungsfehler................... 25 .3.2. Verzeichnung.................... 28 .3.3. Axialer Astigmatismus................ 29 .3.4. Farbfehler..................... 32 .3.5. Beugungsfehler................... 35 1.3.6. Theoretisches Auflösungsvermögen .......... 36 Literatur zu § 1........................ 38 § 2. Prinzipieller Aufbau des Durchstrahlungsmikroskopes........ 42 2.1. Das Beleuchtungssystem.................. 42 2.2. Das Abbildungssystem................... 45 2.3. Objekthalterungen für spezielle Untersuchungen........ 48 Literatur zu § 2........................ 51 § 3. Andere Abbildungsverfahren................... 54 3.1. Reflexionsmikroskopie................... 54 3.2. Emissionsmikroskopie.................... 56 3.3. Auflichtmikroskopie..................... 60 3.4. Rastermikroskopie und Röntgen-Mikroanalyse ......... 61 Literatur zu § 3........................ 63 § 4. Messung wichtiger optischer Konstanten.............. 66 4.1. Vergrößerungsbestimmung................. 66 4.2. Messung und Korrektur des Astigmatismus.......... 69 4.3. Testen des Auflösungsvermögens............... 78 4.4. Messung von Aperturwinkeln................ 82 Literatur zu § 4........................ 83 Inhaltsverzeichnis VII § 5. Elektronenbeugung .......................85 5.1. Kristallographische Grundlagen.............. 85 5.1.1. Bravaissches Translationsgitter und Netzebenen.....85 5.1.2. Das reziproke Gitter.................90 5.2. Theorie der Elektronenbeugung in Kristallen..........91 5.2.1. Materiewellenlänge der Elektronen........... 91 5.2.2. Laue-Gleichungen und Braggsche Reflexionsbedingung . . 92 5.2.3. Kinematische Theorie der Elektronenbeugung...... 96 5.2.4. Dynamische Theorie der Elektronenbeugung...... 101 5.2.5. Intensität der Debye-Scherrer-Ringe.......... 109 5.2.6. Kikuchi-Diagramme................. 112 5.3. Die optischen Grundlagen der Elektronenbeugung im Elektronen- mikroskop ........................114 5.3.1. Beugung mit Kondensor...............114 5.3.2. Beugung mit Zwischenabbildung und Feinbereichsbeugung 115 5.3.3. Spezielle Elektronenbeugungsverfahren.........121 5.4. Auswertung und Informationsmöglichkeiten der Elektronen- Beugungsdiagramme ....................124 5.4.1. Ermittlung der Netzebenenabstände.......... 124 5.4.2. Indizierung der Netzebenen und Strukturbestimmung . . 126 5.4.3. Auswertung von Texturdiagrammen.......... 128 5.4.4. Zusatzreflexe in Beugungsdiagrammen......... 130 5.4.5. Beugungsdiagramme amorpher Stoffe......... 135 5.4.6. Orientierungsbestimmung aus Elektronen-Beugungsdia- grammen ...................... 136 Literatur zu § 5 .......................139 §6. Bildkontrast in amorphen Objekten................143 6.1. Übersicht der Wechselwirkung Elektron-Objekt........ 143 6.2. Klassische Theorie der Streuung (Rutherfordsche Näherung) . . . 145 6.3. Intensitätsverteilung der elastischen Streuung (Bornsche Näherung) 148 6.4. Unelastische Streuung................... 150 6.4.1. Intensitätsverteilung der unelastischen Streuung.....150 6.4.2. Methoden zur Messung von Energieverlusten .....152 6.4.3. Größe und Gesetzmäßigkeiten der Energieverluste .... 156 6.5. Bildkontrast durch Streuabsorption..............160 6.6. Unterschied des Kontrastes in amorphen und kristallinen Schichten 167 Literatur zu § 6........................170 §7. Phasenkontrast und verwandte Probleme..............174 7.1. Elektronenoptischer Brechungsindex und inneres Potential ... 174 7.2. Elektronen-Interferometer................. 176 7.3. Phasenkontrast...................... 179 7.4. Zonenplatten nach Hoppe und Lenz............. 187 Literatur zu § 7........................189 VIII Inhaltsverzeichnis § 8. Bildkontrast in kristallinen Objekten................191 8.1. Hell-und Dunkelfeldabbildungen kristalliner Objekte......191 8.2. Kontrast in kristallinen Objekten...............195 8.3. Abbildung von Kristallbaufehlern..............199 8.3.1. Kontrast von Versetzungen.............. 200 8.3.2. Ermittlung des Burgersvektors von Versetzungen .... 207 8.3.3. Stapelfehler..................... 209 8.3.4. Andere Kristallbaufehler............... 215 8.4. Moire-Effekt........................215 Literatur zu § 8........................220 §9. Präparatveränderungen unter Elektronenbestrahlung.........223 9.1. Objekterwärmung.....................223 9.1.1. Methoden zur Ermittlung der Objekttemperatur.....223 9.1.2. Betrag der in Wärme umgesetzten Energieverluste .... 226 9.1.3. Theorie der Objekterwärmung ............228 9.2. Strahlenschädigung der Objekte...............231 9.2.1. Strahlenschäden in organischen Substanzen.......231 9.2.2. Strahlenschäden in anorganischen Kristallen.......237 9.3. Kontamination......................239 Literatur zu § 9........................242 § 10. Bildaufzeichnung und Intensitätsmessungen.............245 10.1. Leuchtschirme.......................245 10.2. Bildverstärker.......................248 10.3. Photographische Schichten.................248 10.3.1. Theoretische Grundlagen............... 248 10.3.2. Eigenschaften einiger kommerzieller Photo-Emulsionen . . 254 10.3.3. Versuche einer hochauflösenden Bildaufzeichnung .... 256 10.3.4. Belichtungskontrolle................. 258 10.4. Intensitätsmeßmethoden..................259 Literatur zu § 10........................261 § 11. Ermittlung der dritten Dimension von elektronenmikroskopischen Prä- paraten ............................262 11.1. Schrägbeschattung..................... 262 11.2. Stereoabbildungen..................... 265 11.3. Quantitative Kontrastmessungen............... 271 11.4. Wägungsmethode nach Bahr und Zeitler........... 275 Literatur zu § 11........................277 § 12. Abbildung magnetischer und elektrischer Objektfelder........278 12.1. Abbildung magnetischer Bereichsstrukturen..........278 12.2. Abbüdung elektrostatischer Objektfelder...........282 Literatur zu § 12........................284 Inhaltsverzeichnis IX B. Präparationsmethoden § 13. Objektblenden und Trägernetze.................. 286 13.1. Objektblenden....................... 286 13.2. Trägemetze........................ 287 13.3. Reinigung von Objekt- und Aperturblenden aus Edelmetallen . . 288 13.4. Aufbewahrung, Transport und Handhabung von Präparatträgern. 290 § 14. Grundlagen der Hochvakuum- und Aufdampftechnik......... 292 14.1. Aufbau von Bedampfungsanlagen.............. 292 14.2. Hochvakuumverdampfung................. 295 14.2.1. Verdampfungsquellen................ 295 14.2.2. Verdampfung von Siliziummonoxyd.......... 298 14.2.3. Kohleverdampfung................. 299 14.2.4. Verdampfung durch Elektronenstoßheizung....... 302 14.2.5. Herstellung von Platin-Kohle-Mischschichten...... 303 14.3. Schichten aus der Kathodenzerstäubung und Glimmentladung . . 305 14.4. Möglichkeiten zur Schichtdickenbestimmung von Auf dampf schichten 308 14.5. Schrägbeschattung..................... 312 14.5.1. Schräg-, Portrait-und Kegelbedampfung........ 312 14.5.2. Optimale Dicke von Beschattungsfilmen........ 314 14.5.3. Herstellung und Eigenstruktur der Beschattungsfilme. . . 315 Literatur zu § 14........................ 318 § 15. Herstellung und Eigenschaften von Trägerfolien........... 320 15.1. Kollodiumfilme...................... 320 15.2. Formvarfilme....................... 322 15.3. SiO-Filme......................... 326 15.4. Kohlefilme........................ 326 15.4.1. Kohleschichten als Verstärkung für organische Folien und Schnitte...................... 326 15.4.2. Doppelfolien.................... 327 15.4.3. Reine Kohlefolien.................. 328 15.5. Aluminiumoxyd- und andere Trägerfilme........... 329 15.6. Herstellung von Netz- und Lochfolien............. 330 Literatur zu § 15........................ 331 § 16. Oberflächenabdrücke....................... 333 16.1. Filmabdrücke....................... 333 16.1.1. Organische Filmabdrücke .............. 334 16.1.2. Filmabdrücke mit SiO oder Kohle........... 336 16.1.3. Elektrolytisch niedergeschlagene Filmabdrücke (Epitaxie- Abdrucke) ..................... 339 16.1.4. Oxydabdrücke................... 341 16.1.5. Extraktionsabdrücke................ 344 16.1.6. Dekorationsabdrücke................. 345 X Inhaltsverzeichnis 16.2. Matrizenabdrücke.....................347 16.2.1. Matrizen durch Eintrocknen von Lösungen....... 347 16.2.2. Matrizen aus Kunststoff-Folien............ 350 16.2.3. Polymerisationsmatrizen............... 353 16.2.4. Metall-Matrizen................... 354 16.2.5. Nachbehandlung von Matrizenabdrücken........ 354 16.3. Hüllabdrücke.......................357 16.4. Auflösungsvermögen von Oberflächenabdrücken........360 16.5. Zielpräparation von Oberflächenabdrücken...........364 Literatur zu § 16........................370 § 17. Herstellung durchstrahlbarer Folien aus Metallen und anderen Kristallen 375 17.1. Mechanische Verfahren...................375 17.1.1. Walzen und Hämmern................375 17.1.2. Spalten.......................375 17.1.3. Ultramikrotomie..................375 17.2. Chemische Ätzung.....................376 17.3. Ionenätzung .......................377 17.4. Elektrolytisches Polieren..................378 17.4.1. Allgemeine Grundlagen ...............378 17.4.2. Methoden für Metallfolien..............380 17.4.3. Herstellung durchstrahlbarer Folien aus kompaktem Material......................388 17.5. Durchstrahlbare Schichten durch Kristalhvachstum.......391 Literatur zu § 17........................392 § 18. Präparation von Pulvern, Suspensionen, Stäuben und Aerosolen .... 395 18.1. Pulverförmige Substanzen..................395 18.1.1. Aufstäubung....................396 18.1.2. Eintrocknen einer Suspension.............397 18.1.3. Anrühren mit einem Bindemittel...........397 18.1.4. Ultramikrotomie eingebetteter Pulver.........398 18.2. Suspensionen und Kolloide.................398 18.2.1. Eintrocknungsmethode ...............398 18.2.2. Zerstäubungsmethoden ...............400 18.3. Stäube und Aerosole....................402 18.3.1. Thermische Abscheidung...............403 18.3.2. Elektrische Abscheidung...............405 18.3.3. Membranfüter....................407 18.3.4. Ermittlung der Tropfengröße flüssiger Aerosole.....408 Literatur zu § 18........................409 § 19. Gewebefixation.........................410 19.1. Allgemeine Grundlagen...................410 19.1.1. Postmortale Veränderungen..............410 19.1.2. Entnahme von Gewebeproben.............412 19.1.3. Kriterien für die Erhaltung der sublichtmikroskopischen Struktur......................413 Inhaltsverzeichnis XI 19.2. Osmiumfixation...................... 415 19.2.1. Zusammensetzung der Fixationsgemische........ 415 19.2.2. Einfluß des pH-Wertes, der Isotonie und der Zusammen- setzung der Fixationsflüssigkeit............ 418 19.2.3. Chemischer Ablauf der Osmiumfixation......... 429 19.2.4. Dauer der Osmiumfixation.............. 431 19.3. Kalium-Permanganat-Fixation................ 432 19.4. Aldehyd-Fixation..................... 434 19.4.1. Formaldehyd.................... 434 19.4.2. Höhere Aldehyde.................. 435 19.4.3. Kontrast von aldehydfixierten Geweben........ 437 19.5. Gefrierfixationsmethoden................... 438 19.5.1. Allgemeine Grundlagen zum Gefrierprozeß....... 438 19.5.2. Gefriertrocknung.................. 443 19.5.3. Gefriersubstitution................. 445 19.5.4. Gefrierätzung.................... 446 Literatur zu § 19........................ 449 § 20. Kontrastierung und histochemische Methoden........... 453 20.1. Abgrenzung zwischen Fixierung, Kontrastierung und histochemi- schen Nachweismethoden.................. 453 20.2. Bleikontrastierung..................... 455 20.3. Andere Kontrastierungsmittel................ 459 20.4. Spezifische Kontrastierungen................. 461 20.5. Elektronenmikroskopische Darstellung der Enzymumsatzorte . . 465 20.6. Immunoferritin-Methode.................. 471 Literatur zu § 20........................ 474 §21. Einbettung........................... 479 21.1. Entwässerung....................... 479 21.2. Methacrylateinbettung................... 482 21.2.1. Zur Chemie der Methacrylat-Polymerisation....... 482 21.2.2. Der Einbettungsprozeß ............... 483 21.2.3. Vermeidung von Einbettungsartefakten........ 486 21.3. Epoxydharze....................... 488 21.3.1. Araldit ...................... 488 21.3.2. Epon....................... 490 21.3.3. Maraglas...................... 491 21.4. Polyester (speziell Vestopal W)................ 492 21.5. Wasserlösliche Einbettungsmittel.............. 492 21.5.1. Gelatine-Einbettung................. 493 21.5.2. Aquoneinbettung.................. 493 21.5.3. X 133/2097 (Durcupan)................ 494 21.5.4. Glykolmethacrylate (GMA).............. 494 21.5.5. Polyampholyte................... 495 21.6. Orientiertes und gezieltes Einbetten............. 496 Literatur zu § 21........................ 498 XII Inhaltsverzeichnis §22. Ultramikrotomie........................ 501 22.1. Prinzipielle Wirkungsweise des Ultramikrotomes........ 501 22.2. Herstellung der Schneiden................. 506 22.3. Vorbereitung der Präparate zum Schneiden.......... 509 22.4. Bemerkungen zum Schneidprozeß.............. 511 22.5. Auffangen der Schnitte................... 513 22.6. Veränderungen der Schnitte unter Elektronenbeschuß...... 517 22.7. Möglichkeiten der Schnittdickenbestimmung......... 519 22.8. Lichtmikroskopische Vergleichsschnitte und ihre Färbung . . . 522 Literatur zu § 22........................524 § 23. Präparation organischer Teilchen (Fraktionen, Homogenisate, Bakterien, Phagen und Viren).......................527 23.1. Präparation von Kulturen .................527 23.1.1. Bakterienkulturen..................527 23.1.2. Gewebekulturen ..................529 23.2. Isolation und Fragmentation................530 23.2.1. Isolation von Phagen und Viren ........... 530 23.2.2. Fragmentation von Bakterien ............ 530 23.2.3. Isolierte Zellbestandteile (Homogenisate)........ 532 23.3. Präparation von Suspensionen................ 533 23.3.1. Eintrocknen eines Tropfens auf einer Trägerfolie .... 533 23.3.2. Spreiten in einer Monolage..............535 23.3.3. Quantitative Verfahren zur Teilchenzählung in Sus- pensionen......................537 23.3.4. Gefriertrocknung und Kritische-Punkt-Methode.....539 23.3.5. Nachbehandlungen der Eintrocknungen (insbesondere Pseu- doabdrücke)....................542 23.4. Negativkontrastierung...................544 23.4.1. Kontrastentstehung und Strukturerhaltung.......544 23.4.2, Präparationsverfahren................547 Literatur zu § 23.........................551 § 24. Autoradiographie........................556 24.1. Vorteile und Auflösungsvermögen der elektronenmikroskopischen Autoradiographie......................556 24.2. Eigenschaften der radioaktiven Isotope und ihrer Träger .... 560 24.3. Präparation der Emulsionen ................561 24.4. Entwicklung der Emulsionen................564 Literatur zu § 24........................567 § 25. Monographien über Elektronenmikroskopie............. 568 § 26. Bezugsquellen-Nachweis..................... 57O Namenverzeichnis................. 574 Sachverzeichnis.................... 59Q
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