Spektroskopische Methoden in der Biochemie:
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Stuttgart u.a.
Thieme
1988
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SPEKTROSKOPISCHE METHODEN IN DER BIOCHEMIE VON HANS-JOACHIM GALLA UNTER
MITARBEIT VON HANS-JUERGEN MUELLER 214 ABBILDUNGEN, 13 TABELLEN 1988 GEORG
THIEME VERLAG STUTTGART * NEW YORK INHALTSVERZEICHNIS KAPITEL 1 STRUKTUR
UND FUNKTION BIOLOGISCHER MAKROMOLEKUELE (UNTER MITARBEIT VON H.-J.
MUELLER) 1. PROTEINE . . . . 2. NUKLEINSAEUREN 1 4 3. LIPID-MEMBRANEN 6
3.1 BIOLOGISCHE MEMBRANEN 6 3.2 MODELLMEMBRANEN 6 3.2.1 STRUKTUR VON
PHOSPHOLIPID- DOPPELSCHICHTEN 6 3.2.2 MOLEKULARE DYNAMIK IN LIPID-
MEMBRANEN 9 4. POLYSACCHARIDE 10 LITERATUR 10 KAPITEL 2
ABSORPTIONSSPEKTROSKOPIE IM UV-UND VIS-BEREICH 11 1. PHYSIKALISCHE
GRUNDLAGEN 12 1.1 WECHSELWIRKUNG DES LICHTES MIT MATERIE . . . 12 1.2
ELEKTRONISCHE UEBERGAENGE UND STRUKTUR DES SPEKTRUMS 13 1.3
MOLEKUELORBITALE UND ELEKTRONISCHE UEBERGAENGE 14 1.4 QUANTIFIZIERUNG DER
LICHTABSORP- TION 15 1.5 LOESUNGSMITTEL-EINFLUESSE 16 2. MESSTECHNIK 16 3.
ANWENDUNGSBEISPIELE 17 3.1 CHROMOPHORE 17 3.2 AMINOSAEUREN UND PEPTIDE 17
3.3 LINEARDICHROISMUS 18 3.4 HYPOCHROMIE 19 LITERATUR 21 KAPITEL 3
OPTISCHE ROTATIONSDISPERSION UND CIRCULARDICHROISMUS 22 1. PHYSIKALISCHE
GRUNDLAGEN 22 1.1 POLARISATIONSZUSTAENDE DES LICHTS . 22 1.2 OPTISCHE
ROTATIONSDISPERSION . 24 1.3 CIRCULARDICHROISMUS 25 2. KONZEPT DES
OPTISCH AKTIVEN CHRO- MOPHORS 25 3. MESSTECHNIK 26 4. ANWENDUNGSBEISPIELE
27 4.1 ANALYSE DER SEKUNDAERSTRUKTUR VON PROTEINEN 27 4.2 POLYNUKLEOTIDE
UND NUKLEINSAEUREN 30 LITERATUR 30 INHALTSVERZEICHNIS VII KAPITEL 4
INFRAROT-SPEKTROSKOPIE . 1. DAS IR-SPEKTRUM 31 2. PHYSIKALISCHE
GRUNDLAGEN 32 2.1 SCHWINGUNGEN EINES ZWEIATOMIGEN MOLEKUELS 32 2.1.1
HARMONISCHER OSZILLATOR 32 2.1.2 ANHARMONISCHER OSZILLATOR . . . . 33
2.2 IR-AKTIVE SCHWINGUNGEN EINES MEHRATOMIGEN MOLEKUELS 34 2.3
EINBEZIEHUNG DER ROTATION . . . . 36 31 3. MESSTECHNIK 36 4. SPEZIELLE
IR-TECHNIKEN . . . . . . 36 4.1 ABGESCHWAECHTE TOTALREFLEXION . . 36 4.2
FOURIER-TRANSFORM-IR-SPEKTRO- SKOPIE . . 37 5. ANWENDUNGSBEISPIELE 39
5.1 KONFORMATIONEN UND WECHSEL- WIRKUNGEN VON PROTEINEN 39 5.2
KONFORMATIONEN UND WECHSEL- WIRKUNGEN VON NUKLEINSAEUREN . . . 41 5.3
MODELL- UND BIOMEMBRANEN . . . . 42 LITERATUR 45 KAPITEL 5
FLUORESZENZ-SPEKTROSKOPIE (UNTER MITARBEIT VON H.-J. MUELLER) 46 1.
PHYSIKALISCHE GRUNDLAGEN . . . . 1.1 ABSORPTIONS- UND EMISSIONSUEBER-
GAENGE 1.2 DESAKTIVIERUNGSPROZESSE 1.2.1 STRAHLUNGSLOSE DESAKTIVIERUNG .
. 1.2.2 LUMINESZENZ 1.3 QUANTENAUSBEUTE 1.4 FLUORESZENZ-LEBENSDAUER . .
. . 1.5 LOESUNGSMITTEL-EINFLUESSE 1.6 ANREGUNGSSPEKTREN 46 46 47 47 47 48
48 48 49 2. 2.1 2.2 2.3 3. 3.1 3.2 4. KONZENTRATIONSABHAENGIGKEIT DER
FLUORESZENZ REABSORPTION EMITTIERTER FLUORES- ZENZ-STRAHLUNG
DIMEREN-BILDUNG ANGEREGTE DIMERE FLUORESZENZ-LOESCHUNG * DYNAMISCHE
FLUORESZENZ- LOESCHUNG STATISCHE FLUORESZENZ-LOESCHUNG ENERGIEUEBERTRAGUNG
. 5. FLUORESZENZ-POLARISATION . . 5.1 QUALITATIVE BESCHREIBUNG . 5.2
QUANTITATIVE BESCHREIBUNG . 5.2.1 ABSORPTIONSPROZESS 5.2.2 EMISSION
(FLUORESZENZ) . . 5.3 STATISCHE UND ZEITAUFGELOESTE
FLUORESZENZ-POLARISATION . . 50 50 50 51 51 52 53 56 56 57 57 58 60 6.
6.1 ANWENDUNGSBEISPIELE . . . . . . . 61 NATUERLICHE FLUOROPHORE UND
FLUORESZENZ-SONDEN 61 BATHOCHROME VERSCHIEBUNG DER
TRYPTOPHAN-FLUORESZENZ VON PROTEINEN 62 AENDERUNG DER QUANTENAUSBEUTE BEI
WECHSELWIRKUNG MIT MAKRO- MOLEKULAREN SYSTEMEN 62 EXCIMERE 64 BESTIMMUNG
DES LATERALEN DIFFU- SIONSKOEFFIZIENTEN 64 50 6.4.2
PHASENTRENNUNGSPHAENOMENE IN LIPID-MEMBRANEN 65 PROTEIN-ASSOZIATION 66
6.2 6.3 6.4 6.4.1 6.4.3 6.4.4 EXCIMER-LASER 66 6.5 LOKALISATION VON
FLUORESZENZ-SON- DEN DURCH FLUORESZENZ-LOESCHUNG . 66 6.6 ABSTANDSMESSUNG
DURCH ENERGIE- UEBERTRAGUNG 68 6.7 FLUORESZENZ-DEPOLARISATION . 68
6.7.1 MESSUNG DER PHASENUMWANDLUNG VON LIPID-MEMBRANEN 68 6.7.2
BESTIMMUNG DER ROTATIONSKORRELA- TIONSZEITEN VON PROTEINEN DURCH
ZEITABHAENGIGE FLUORESZENZ-DEPOLA- RISATION 70 6.8 *FLUORESCENCE RECOVERY
AFTER PHOTOBLEACHING" ; 70 LITERATUR 71 VIII INHALTSVERZEICHNIS KAPITEL
6 ELEKTRONENSPINRESONANZ 72 1. PHYSIKALISCHE GRUNDLAGEN 1.1 MAGNETISCHES
MOMENT . . 1.2 ZEEMAN-EFFEKT 1.3 LARMOR-PRAEZESSION . 1.4
RESONANZPHAENOMEN . . . 1.5 BOLTZMANN-VERTEILUNG . . 1.6
RELAXATIONSMECHANISMEN 1.6.1 SPIN-GITTER-RELAXATION . . 1.6.2
SPIN-SPIN-RELAXATION . . 1.7 G-FAKTOR 1.8 HYPERFEINSTRUKTUR . 72 72
73 74 75 76 76 76 77 77 77 2. MESSTECHNIK 78 3. UNTERSUCHUNG VON
BIOMOLEKUELEN 3.1 SPINSONDEN-TECHNIK 3.1.1 NITROXID-RADIKALSONDEN 3.1.2
SPEKTRALE ANISOTROPIE 3.1.3 SPIN-HAMILTON-OPERATOR 3.1.4 ORDNUNGSGRADE
IN LIPID-DOPPEL- SCHICHTEN 3.1.5 LIPID-PROTEIN-WECHSEL WIRKUNG . 80 80
80 81 84 84 87 3.1.6 BESTIMMUNG VON LIPIDPHASEN-UM- WANDLUNGSTEMPERATUR
ANHAND VON POLARITAETSEFFEKTEN 88 3.1.7 ROTATIONSKORRELATIONSZEIT 89
3.1.8 LATERALE DIFFUSION UND LIPID- PHASENTRENNUNG 90 3.1.9 TRANSVERSALE
DIFFUSION 92 3.2 METALL-IONEN IN PROTEINEN 93 3.2.1
ELEKTRONEN-KONFIGURATION VON UEBERGANGSMETALL-IONEN 93 3.2.2 TITRATION
VON ME 2+ -BINDESTELLEN IN PROTEINEN 94 3.2.3 CYTOCHROM C-OXIDASE 94 3.3
BIOLOGISCHE FREIE RADIKALE 95 3.3.1 FLAVIN-RADIKALE 95 3.3.2
SUBSTRAT-RADIKALE BEI ENZYM- REAKTIONEN 96 3.3.3 STRAHLENSCHAEDEN IN DNA-
STRAENGEN 97 LITERATUR 97 KAPITEL 7 KERNMAGNETISCHE RESONANZ 1. KERNSPINS
IN BIOLOGISCHEN SUBSTANZEN 98 2. PHYSIKALISCHES BILD DES NMR-
EXPERIMENTS 99 3. MESSTECHNIK 100 4. STRUKTUR DES NMR-SPEKTRUMS . 101
4.1 CHEMISCHE VERSCHIEBUNG 101 4.2 SPIN-SPIN-KOPPLUNG 102 5.
RELAXATIONSMECHANISMEN 104 5.1 SPIN-GITTER-RELAXATION, T, 105 5.2
SPIN-SPIN-RELAXATION, T 2 105 5.3 , VERGLEICH DER RELAXATIONSZEITEN . .
105 6. PULS-FOUERIER-TRANSFORM-NMR . . 105 6.1 PULSTECHNIK 106 6.2 FREIER
INDUKTIONSABFALL 106 6.3 SPIN-ECHO-METHODE ZUR MESSUNG VON T 2 107 6.4
MESSUNG VON T! 108 6.4.1 PROGRESSIVE SAETTIGUNG 108 6.4.2
INVERSIONS-ERHOLUNGSMETHODE . . .108 98 7. ANWENDUNGSBEISPIELE 109 7.1
BASEN-STAPELUNG 109 7.2 ANALYSE VON PROTEIN-SPEKTREN . 110 7.3
PROTONEN-SPINRELAXATION IN PROTEINEN UND LIPID-MEMBRANEN .111 7.4
PH-ABHAENGIGKEIT DER NMR- SPEKTREN VON AMINOSAEUREN . 112 8. MODERNE
TECHNIKEN 115 8.1 SPIN-ENTKOPPLUNG 115 8.2 ZWEIDIMENSIONALE NMR 116 9.
13 C-NMR 117 9.1 CHEMISCHE VERSCHIEBUNG 118 9.2 SPIN-SPIN-ENTKOPPLUNG
118 9.3 ISOTOPEN-ANREICHERUNG 118 9.4 DOPPELRESONANZ-TECHNIK UND
NUKLEAR-OVERHAUSER-EFFEKT . . . . 119 9.5 BESTIMMUNG VON SEGMENTBEWEG-
LICHKEITEN DURCH TI -MESSUNGEN . . 119 10. 31 P-NMR 120 LITERATUR 121
INHALTSVERZEICHNIS IX KAPITEL 8 LICHTSTREUUNG 122 (UNTER MITARBEIT VON
H.-J. MUELLER) 1. ELASTISCHE LICHTSTREUUNG 122 1.1 STREUUNG AN EINEM
ISOLIERTEN, ISOTROPEN MOLEKUEL 122 1.2 STREUUNG AN MEHREREN MOLEKUELEN .
124 1.3 STREUUNG AN VERDUENNTEN GASEN . . 124 1.4 STREUUNG AN MOLEKUELEN
IN LOESUNG 125 1.5 STREUUNG AN GROESSEREN MOLEKUELEN . 126 2. MESSTECHNIK 128
3. QUASI-ELASTISCHE LICHTSTREUUNG . . 128 4. ANWENDUNGSBEISPIELE 129
LITERATUR 129 KAPITEL 9 RAMAN-SPEKTROSKOPIE 1. PHYSIKALISCHE GRUNDLAGEN
130 3. 1.1 KLASSISCHE BESCHREIBUNG DER 3.1 POLARISIERBARKEIT 130 3.2 1.2
RAMAN-EFFEKT ALS ZWEI- 3.3 PHOTONEN-PROZESS 132 1.3 RESONANZ-RAMAN 132
1.4 AUSWAHLREGELN 132 2. MESSTECHNIK 134 130 ANWENDUNGSBEISPIELE 134
RAMAN-SPEKTREN VON PROTEINEN . . 135 PHASENUMWANDLUNGEN IN LIPIDEN .135
RESONANZ-RAMAN-SPEKTREN BIOLOGISCHER CHROMOPHORE . 137 LITERATUR 137
KAPITEL 10 ROENTGEN- UND NEUTRONEN-BEUGUNG (UNTER MITARBEIT VON H.-J.
MUELLER) 1. ROENTGEN-BEUGUNG 138 1.1 AUFNAHME VON BEUGUNGSBILDERN . 140
1.1.1 DREHKRISTALLMETHODE 140 1.1.2 PULVERMETHODE 140 138 1.2 BESTIMMUNG
VON ELEKTRONEN- DICHTEN 140 2. NEUTRONEN-BEUGUNG 143 LITERATUR 144
SACHVERZEICHNIS : 145 |
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