Melanotropin-Rezeptoren:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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1984
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| adam_text | DISS. ETH NR. 7481 MELANOTROPIN-REZEPTOREN EIN
BIOCHEMISCH^PHARMAKOLOGISCHES WIRKUNGSMODELL ABHANDLUNG ZUR ERLANGUNG
DES TITELS EINES DOKTORS DER NATURWISSENSCHAFTEN DER EIDGENOESSISCHEN
TECHNISCHEN HOCHSCHULE ZUERICH VORGELEGT VON RUDOLF WUNDERLIN DIPL.
NATURWISSENSCHAFTER ETH GEBOREN AM 25. FEBRUAR 1955 VON MUMPF AG
ANGENOMMEN AUF ANTRAG VON PROF. DR. R. SCHWYZER, REFERENT PROF. DR. G.
SEMENZA, KORREFERENT 1984 TECHNISCHEN UNIVERSITAET BRAUNSCHWEIG
INHALTSVERZEICHNIS EINLEITUNG 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 HORMONE
REZEPTOREN LIPIDE THEORIE DER HORMONWIRKUNG A-MELANOTROPIN
A-MELANOTROPIN-REZEPTOREN TABAK-MOSAIK-VIRUS ALS TRAEGER VON BIOLOGISCH
AKTIVEN POLYPEPTIDHORMONEN ZIELSETZUNGEN 9 9 10 12 14 16 20 22 25
SYNTHESE VON REAKTIVEM 5-SULFOMERCAPTOVALERYL- A-MSH PRAEPARATION VON
TMV-DISULFID-A-MSH KOMPLEXEN 27 2.1 PROBLEMSTELLUNG 27 2.2 MATERIAL 28
2.2.1 SUBSTANZEN 2 8 2.2.2 GERAETE 29 2.3 METHODEN 29 2.3.1 PUFFER 29
2.3.2 5-BROMVALERYL-P-NITROPHENYLESTER 29 2.3.3 5-BROMVALERYL-A-MSH 30
2.3.4 TEST AUF REAKTIVITAET DER BROM- VALERYLGRUPPE 31 2.3.5 TEST AUF
BILDUNG DES BUNTE SEHEN SALZES 31 2.3.6 (J-125)-5-SULFOMERCAPTOVALERYL-
31 A-MSH - 6 - 2.3.7 TMV-SS-MSH 32 N 2.3.8 SPALTUNG VON TMV-SS-MSH 33
2.3.9 POLYACRYLAMID-GEL-ELEKTROPHORESE DER DISULFID-KONJUGATE 33 2.3.10
JODIERUNG VON A-MSH ODER 5-BROM- VALERYL-A-MSH , 34 2.4 RESULTATE 2.4.1
REINIGUNG VON 5-BROMVALERYL-OC-MSH 34 2.4.2 (J-125)-SCANNING UND
DUENNSCHICHT- ELEKTROPHORESE VON 5-SULFOMERCAPTO- VALERYL-OC-MSH 35 2.4.3
REINIGUNG KLEINER MENGEN VON TMV- PRAEPARATEN 35 2.4.4 BILDUNG VON
TMV-SS-MSH ALS FUNK- TION DER ZEIT 37 2.4.5 BILDUNG VON TMV-SS-MSH ALS
FUNK- TION DES SMVM-UEBERSCHUSSES 38 2.4.6 BILDUNG VON TMV-SS-MSH ALS
FUNK- TION DER TEMPERATUR UND DER PRO- TONENKONZENTRATION 38 2.4.7
REINHEIT VON GEREINIGTEN TMV-SS- MSH KOMPLEXEN 39 2.4.8 SDS-PAGE
CHARAKTERISIERUNG VER- SCHIEDEN HERGESTELLTER TMV-SS-MSH KOMPLEXEN 40
2.4.9 REDUKTIVE SPALTUNG VON TMV-SS-MSH: ZEITLICHES VERHALTEN UND
SDS-PAGE ANALYSE 42 2.4.10 TYPISCHES BEISPIEL EINER KUPPLUNGS- REAKTION
ZUM TMV-SS-MSH KONJUGAT 45 2.4.11 SYNTHESE DES FLUORESZENZMARKERS
RHODAMIN -TMV-SS-MSH 47 2.4.12 STABILITAETSUNTERSUCHUNGEN AM TMV- SS-MSH
KONJUGAT 48 2.4.13 DISKUSSION UND ZUSAMMENFASSUNG 49 - 7 - 3 OT-MSH/
5-BROMVALERYL-A-MSH UND TMV-SS-MSH KONJUGAT: BIOLOGISCHE AKTIVITAET UND
BINDUNGSVERHALTEN 3.1 PROBLEMSTELLUNG 51 3.2 MATERIAL 51 3.2.1
SUBSTANZEN . 51 3.2.2 GERAETE 52 3.3 METHODEN 52 3.3.1 ZELLKULTUREN 52
3.3.2 BIOLOGISCHE AKTIVITAET: TYROSINASE- ASSAY 53 3.3.3
BINDUNGSMESSUNGEN 54 3.3.4 AUSWERTUNG DER EXPERIMENTELLEN DATEN 55 3.3.5
FLUORESZENZ-MIKROSKOPIE-STUDIEN 55 3.4 RESULTATE 57 3.4.1 ZEITLICHE
ABHAENGIGKEIT DER TYRO- SINASE-STIMULIERUNG 57 3.4.2
TYROSINASE-STIMULIERUNGS-POTENZ 57 3.4.3 REZEPTOR-INTERAKTIONSVERHALTEN
VON FREIEM BZW. GEBUNDENEM A-MSH 61 3.4.4 EINFLUSS VON PH-WERT UND
REDUKTIONS- MITTEL AUF DIE TYROSINASE-STIMU- LIERUNG 62 3.4.5 BINDUNG
ALS FUNKTION DER ZEIT 64 3.4.6 BINDUNG ALS FUNKTION DES PH-WERTES 69
3.4.7 BINDUNG ALS FUNKTION DER TEMPERATUR 70 3.4.8 AUSWASCHVERHALTEN VON
REZEPTOR- ASSOZIIERTEM HORMON 7 ^ 3.4.9 REDUKTIONS- UND
VERDRANGUNGSSTUDIEN IM BINDUNGS-ASSAY 72 3.4.10 FLUORESZENZVERTEILUNG 75
3.4.11 FORMULIERUNG EINES A-MELANOTROPIN- REZEPTOR REGULATIONS-MODELLS
76 3.5 ZUSAMMENFASSUNG UND DISKUSSION 78 - 8 - 4 STIMULIERUNG DER
ADENYLATCYKLASE DURCH *-MSH, BVM UND DAS DISULFID-KONJUGAT 81 4.1
PROBLEMSTELLUNG 81 4.2 MATERIAL 81 4.3 METHODEN 82 4.3.1 DURCHFUEHRUNG
UND AUSWERTUNG DES CAMP-ASSAYS 82 4.3.2 PROTEINGEHALTSBESTIMMUNGEN AN
ZELLKULTUREN 84 4.4 RESULTATE 85 4.4.1 ZEITLICHE ABHAENGIGKEIT DER ADE-
NYLATCYKLASE-STIMULIERUNG 85 4.4.2 ADENYLATCYKLASE-STIMULIERUNGS- POTENZ
86 4.4.3 ABSOLUTE STIMULIERBARKEIT DER ADENYLATCYKLASE 87 4.4.4
SOLUBILISIERUNG VON ZELLKULTUREN 90 4.5 ZUSAMMENFASSUNG UND DISKUSSION
91 5 SCHLUSSFOLGERUNGEN 97 POSTULIERUNG DES MELANOTROPIN-REZEPTOR
DISKRIMINATOR-/TRANSDUKTIONSMODELLS 100 6 ZUSAMMENFASSUNG / SUMMARY 10
7 LITERATURVERZEICHNIS LO 8 ANHANG ABKUERZUNGEN 11
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