Immunobeadsanreicherung, Immunzytologie und PCR für den Tumorzellnachweis im Knochenmark, peripheren Blut und Leukaphereseprodukten bei Patientinnen mit Mammakarzinom:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
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1998
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| Beschreibung: | Heidelberg, Univ., Diss., 1998 (Nicht für den Austausch) |
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VERZEICHNIS
I
VERZEICHNIS
VERZEICHNIS.*.1
TABELLEN VERZEICHNIS.4
ABBILDUNGSVERZEICHNIS.5
ABKUERZUNGEN.6
1. EINLEITUNG.
1.1. MAMMAKARZINOM.
1.2. TUMORWACHSTUM.
1.3. METASTASIERUNG.
1.4. NACHWEIS EINZELNER TUMORZELLEN IM BLUT UND IM KNOCHENMARK.
1.4.1. NACHWEIS MIKROMETASTATISCHER TUMORZELLEN IN BLUT
.
1.4.2. NACHWEIS MIKROMETASTATISCHER TUMORZELLEN IM KNOCHENMARK.
1. 5. ENTWICKLUNG EMPFINDLICHER METHODEN ZUM NACHWEIS
MIKROMETASTATISCHER TUMORZELLEN .
1.5.1. SEROLOGISCHER NACHWEIS.
1.5.2. IMMUNOZYTOCHEMISCHE TECHNIKEN
.
1.5.3. ANREICHERUNG DER TUMORZELLEN MIT MAGNETBEADS.
1.5.4. POLYMERASE KETTEN REAKTION (PCR)
.
1.6. ANTIGENE FUER DEN SELEKTIVEN TUMORZELLNACHWEIS IM KNOCHENMARK UND
PERIPHEREN BLUT.
/.
6.1. CK FUER DEN TUMORZELLNACHWEIS.
1.6.2. CEA FUER DEN TUMORZELLNACHWEIS
.
1.6.3. MUEZINE FUER DEN TUMORZELLNACHWEIS
.
1.6.4. GA733FUER DEN TUMORZELLNACHWEIS
.
1.7. ARBEITSZIEL.
2. MATERIAL.
2.1. ALLGEMEINER LABORBEDARF.
2.2. GERAETE.
2.3. CHEMIKALIEN.
2.4. SONSTIGE MATERIALIEN FUER IMMUNFAERBUNGEN UND MAGNETBEADSVERFAHREN.
2.5. SONSTIGE MATERIALIEN FUER DIE RT-PCR.
2.6. PUFFER UND MEDIEN.
2.7. UNTERSUCHUNGSMATERIALIEN.
2.7.1. UNTERSUCHUNGSMATERIALIEN VON PATIENTEN
.
2.7.2. UNTERSUCHUNGSMATERIAL VON NORMALEN SPENDERN
.
2.7.3. TUMORZELLINIEN
.
.8
.8
.8
.8
.9
10
10
12
12
12
13
14
15
16
17
18
19
20
22
22
22
22
22
23
25
26
26
26
26
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/955661811
VERZEICHNIS
2
2.8. DATENVERARBEITUNG.26
3. METHODEN.27
3.1. UNTERSUCHUNGSMATERIALIEN ZUR AUFARBEITUNG .,.27
3.1.1. A UFARBEITUNG DER PROBEN VON BLUT UND KNOCHENMARK
.27
3.1.2. ZELLKULTUREN
.
28
3.2. IMMUNOZYTOCHEMISCHE METHODEN.30
3.2.1. ZYTOSPINPRAEPARATE FUER DIE ROUTINEFAERBUNG
.
30
3.2.2. KOPPLUNG DER MUZINSPEZIFISCHEN ANTIKOERPER BM2 UND BM7 AN
MAGNETBEADS
.
30
3.2.3. IMMUNMAGNETISCHE TUMORZELLANREICHERUNG IN KNOCHENMARKPROBEN UND
BLUTPROBEN
.
31
3.2.4. FIXIERUNG UND LAGERUNG DER ZYTOSPINS
.
31
3.2.5. FAERBUNGEN
.
31
3.3. MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN.34
3.3.1. STERILISATION UND ARBEITSUMGEBUNG
.
34
3.3.2. A UFARBEITUNG DER ZELLMATERIALEN
.
34
3.3.3. RNA-EXTRAKTION:
.
35
3.3.4. CDNA-SYNTHESE
.
37
3.3.5. PCR
.
38
3.4. DIE KOMBINATION DER MAGNETBEADSTRENNUNG UND RT-PCR.45
3.4.1. MAGNETBEADSTRENNUNG
.
45
3.4.2. RT-PCR
.
45
3.5. PCR-PRODUKTNACHWEIS.46
3.5.1. DETEKTION UND ANALYSE VON PCR-PRODUKTEN IM AGAROSEGEL
.
46
3.5.2. DETEKTION VON PCR-PRODUKTEN MITTELS ELISA
.
46
3.5.3. DETEKTION DES PCR-PRODUKTS MIT EINEM LUMNESZENZ-IMMUNO-ASSAY
(LIA)
.
48
4. ERGEBNISSE.49
4.1. ERGEBNISSE DER ZYTOSPIN-METHODE.49
4.1.1. OPTIMIERUNG DER BEDINGUNGEN
.
49
4.1.2. SENSITIVITAET
.
49
4.1.3. SPEZIFITAET
.
50
4.2. ERGEBNISSE DER MAGNETBEADSTRENNUNG.51
4.2.1. OPTIMIERUNG DER BEDINGUNGEN
.
51
4.2.2. SENSITIVITAET DER BEADSTRENNUNG
.
52
4.2.3. SPEZIFITAET
.
52
4.3. ERGEBNISSE DER
RT-PCR
.53
4.3.1. OPTIMIERUNG DER BEDINGUNGEN
.
53
4.3.2. SENSITIVITAET DER RT-PCR FUER DEN TUMORZELLNACHWEIS MIT PRIMERN VON
GA 733-2, MUCL, CEA UND
CK 19
.
64
VERZEICHNIS
3
4.3.3. SPEZIFITAET DER RT-PCRJUR DEN TUMORZELLNACHWEIS MIT PRIMERN VON
GA733-2, MUCI, CEA UND
CK 19 67
4.3.4. DIE BRAUCHBARKEIT VERSCHIEDENER PRIMER JUR DEN NACHWEIS
MIKROMETASTATISCHER ZELLEN
.
69
4.4. ERGEBNISSE DER KOMBINATION DER MAGNETBEADSANREICHERUNG VON
TUMORZELLEN MIT DER RT-
PCR (MB-PCR).73
4.5. DIE KLINISCHE ANWENDUNG DES TUMORZELLNACHWEISES IN KNOCHENMARK UND
LEUKAPHERESEPRODUKTEN MIT DER IMMUNFAERBUNG, DER
RT-PCR
UND DER
MB-PCR
.74
4.4.1. TUMORZELLNACHWEIS IM KNOCHENMARK VON PATIENTINNEN MIT
MAMMAKARZINOM
.
74
4.4.2. NACHWEIS VON TUMORZELLEN IN LEUKAPHERESEPRODUKTEN BEI
PATIENTINNEN MIT MAMMAKARZINOM MIT
RT-PCR UND ZYTOLOGIE
.77
5. DISKUSSION.78
5.1. TUMORZELLNACHWEIS IN KNOCHENMARK.79
5.2. TUMORZELLNACHWEIS IN BLUT UND IN LEUKAPHERESEPRODUKTEN.81
5.3. IMMUNZYTOLOGISCHE VERFAHREN FUER DEN TUMORZELLNACHWEIS.82
5.3.1 SENSITIVITAET DER IMMUNZYTOLOGIE.
.
82
5.3.2. SPEZIFITAET DER IMMUNZYTOLOGIE
.
83
5.4.
DIE
RT-PCR
FUER DEN TUMORZELLNACHWEIS.85
5.4.1. DIE MUZIN-RT-PCR FUER DEN TUMORZELLNACHWEIS
.
86
5.4.2. DIE GA733-2-RT-PCRFUER DEN TUMORZELLNACHWEIS
.
87
5.4.3. DIE CEA-RT-PCRFUER DEN TUMORZELLNACHWEIS
.
87
5.4.4. DIE ZYTOKERATIN-RT-PCR FUER DEN TUMORZELLNACHWEIS
.
89
5.5. DIE KOMBINATION VON IMMUNOBEADSANREICHERUNG UND
PCR
FUER DEN TUMORZELLNACHWEIS.91
5.6. KLINISCHE ANWENDUNG.93
6. ZUSAMMENFASSUNG.94
7. LITERATURVERZEICHNIS.96
8. LEBENSLAUF.106
9. DANKSAGUNG
108 |
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