Mechanismus der Apoptose-Sensitivierung durch den Tumorsuppressorgen-Kandidaten DRO 1:
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| Veröffentlicht: |
2012
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
I) EINLEITUNG 6
1. DAS KOLOREKTALE KARZINOM 6
1.1. AETIOLOGIE 6
1.2. KLASSIFIZIERUNG, KLINIK UND THERAPIE 6
1.3. MOLEKULARE GRUNDLAGEN 9
2. GRUNDLAGEN DER KARZINOGENESE 12
3. APOPTOSE 15
3.1. DER REZEPTOR-VERMITTELTE APOPTOSEWEG 18
3.2. DER INTRINSISCHE APOPTOSEWEG 19
3.3. ER-STRESS VERMITTELTE APOPTOSE 20
3.4. APOPTOSERESISTENZMECHANISMEN 20
4. DROL - STAND DER FORSCHUNG 23
5. FRAGESTELLUNG 27
II) MATERIAL UND METHODEN 29
1. REAGENZIEN 29
1.1. ZELLKULTUR 29
1.2. APOPTOSEASSAYS 29
1.3. WESTERN BLOT 31
2. METHODEN 34
2.1. ZELLKULTUR 34
2.2. APOPTOSEASSAYS 36
2.2.1. MESSUNG DER APOPTOSERATE MITTELS DURCHFLUSSZYTOMETRIE 37
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IMAGE 2
INHALTSVERZEICHNIS
2.2.2. HOECHST-STAINING 33342 38
2.3. WESTERN BLOT UND IMMUNDETEKTION 39
2.3.1. HERSTELLUNG DER ZELLLYSATE 39
2.3.2. PROTEINBESTIMMUNG 40
2.3.3. VORBEREITUNG DER PROBEN FUER DIE PROTEIN-GELELEKTROPHORESE 41
2.3.4. GELELEKTROPHORESE 41
2.3.5. WESTERN BLOT 42
2.3.6. IMMUNDETEKTION 42
2.3.7. FAERBEMETHODEN 43
III) ERGEBNISSE 45
1. GENERIERUNG MONOKLONALER KOLOREKTALER KARZINOMZELLLINIEN, DIE
INDUZIERBAR
DROL EXPRIMIEREN 45
2. DROL REGULIERT APOPTOSE UEBER DEN EXTRINSISCHEN APOPTOSEWEG 47
3. OROI HAT KEINEN EFFEKT AUF DEN INTRINSISCHEN APOPTOSEWEG 57
4. DROL HAT KEINEN EFFEKT AUF DEN ER-STRESS-VERMITTELTEN APOPTOSEWEG 58
IV) DISKUSSION 60
V) ZUSAMMENFASSUNG 69
VI) ABBILDUNGSVERZEICHNIS 70
VII) LITERATURVERZEICHNIS 71
VIII)DANKSAGUN G 77
5
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