Nephelometrische Untersuchungen zur Wirkung von Cyclodextrinen auf verschiedene Candida-Spezies:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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| adam_text | Titel: Nephelometrische Untersuchungen zur Wirkung von Cyclodextrinen auf verschiedene Candida-Spezies
Autor: Weißbrich, Alexander
Jahr: 2008
I. INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG 1
1.1. Cyclodextrine 1
1.1.1. Geschichte 1
1.1.2. Herstellung 2
1.1.3. Struktur der Cyclodextrine 3
1.1.4. Eigenschaften 4
1.1.5. Toxizität 5
1.1.6. Komplexbildung 6
1.1.7. Wirkprinzipien 7
1.1.8. Anwendungsbereiche 7
1.2. Nephelometrie 9
1.3. Candida Spezies 10
1.3.1. Taxonomie 11
1.3.2. Genom 11
1.3.3. Fortpflanzung 11
1.3.4. Morphologie 12
1.3.5. Pathophysiologie 12
1.4. Zielsetzung 14
2. MATERIALIEN UND METHODEN 15
2.1. Materialien 15
2.1.1. Chemikalien 15
2.1.2. Geräte 15
2.2. Candida Stämme und Kulturbedingungen 16
2.3. Zellzahlbestimmung und Zellsuspensions-Herstellung 16
2.4. Herstellung der Cyclodextrinlösungen 17
2.5. Standardisierung nach McFarland 18
2.6. Beschicken der Mikrotiterplatten 18
2.7. Messung im Nephelometer 19
2.8. Untersuchung der Kulturen nach 24h Nephelometermessung 19
2.9. Fluoreszenzfärbung mit Yeast Viability 19
2.10. Auswertung und Statistik 20
2.11. Untersuchung der metabolischen Aktivität mit der FUN-1 Färbung 21
3. ERGEBNISSE 22
3.1. Zellzahlbestimmung 22
3.2. Wachstum in Sabouraud-Glukose-Bouillon 22
3.3. Einfluss der Cyclodextrine auf die Candida-Spezies 24
3.3.1. Einfluss von a-Cyclodextrin 24
3.3.1.1. Einfluss von a-Cyclodextrin auf Candida albicans 24
3.3.1.2. Einfluss von a-Cyclodextrin auf Candida glabrata 26
3.3.1.3. Einfluss von a-Cyclodextrin auf Candida krusei 28
3.3.1.4. Einfluss von a-Cyclodextrin auf Candidaparapsilosis 30
3.3.2. Einfluss von ß-Cyclodextrin 32
3.3.2.1. Einfluss von ß-Cyclodextrin auf Candida albicans 32
3.3.2.2. Einfluss von ß-Cyclodextrinen auf Candida glabrata 34
3.3.2.3. Einfluss von ß-Cyclodextrinen auf Candida krusei 36
3.3.2.4. Einfluss von ß-Cyclodextrin auf Candida parapsilosis 38
3.3.3. Einfluss von y-Cyclodextrin 40
3.3.3.1. Einfluss von y-Cyclodextrin auf Candida albicans 40
3.3.3.2. Einfluss von y-Cyclodextrin auf Candida glabrata 42
3.3.3.3. Einfluss von y-Cyclodextrin auf Candida krusei 44
3.3.3.4. Einfluss von y-Cyclodextrin auf Candida parapsilosis 46
3.4. Untersuchung der Kulturen nach 24h Nephelometermessung 48
4. DISKUSSION 49
4.1. Voruntersuchung 49
4.2. Hauptuntersuchung 50
5. LITERATURVERZEICHNIS 61
6. LINKVERZEICHNIS 70
7. ANHANG 71
7.1. Danksagung 71
7.2. Lebenslauf 72
7.3. Ehrenwörtliche Erklärung 73
III. VERZEICHNIS DER ABBILDUNGEN
Abbildung 1: Strukturformeln von a-Cyclodextrin, ß-Cyclodextrin und y-Cyclodextrin
(www.wacker. com)
Abbildung 2: Schematische Darstellung der Wirkungsweise von Cyclodextrin-
Glycosyltransferasen (CGTasen) (www.wacker.com)
Abbildung 3: a-Glucosemolekül in der „Sesselkonformation (www.wacker.com)
Abbildung 4: Schematische Darstellung des molekularen Aufbaus der Cyclodextrine
(Www.wacker.com)
Abbildung 5: Molekulare Größen von Cyclodextrinen (www.wacker.com)
Abbildung 6: Löslichkeit der Cyclodextrine in Wasser (www.wacker.com)
Abbildung 7: Schematische Darstellung der Komplexbildung (www.wacker.com)
Abbildung 8: Schematische Darstellung der Turbidimetrie und Nephelometrie (Hipler,
2003)
Abbildung 9: Schematische Darstellung des Messprinzips eines Laser-Nephelometers
(Hipler, 2003)
Abbildung 10: Ausdruck des CASY-Cellcounters
Abbildung 11: Wachstumskurven der verschiedenen Candida-Spezies ohne Zugabe von
Cyclodextrinen
Abbildung 12:Mikroskopische Bilder der Cyclodextrine in SGB und FUN-1
Abbildung 13:Nephelometrische Messungen zum Einfluss von a-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida albicans
Abbildung 14: Mikroskopische Bilder zum Einfluss von a-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida albicans
Abbildung 15:Nephelometrische Messungen zum Einfluss von a-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida glabrata
Abbildung 16:Mikroskopische Bilder zum Einfluss von a-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida glabrata
Abbildung 17:Nephelometrische Messungen zum Einfluss von a-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida krusei
Abbildung 18:Mikroskopische Bilder zum Einfluss von a-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida krusei
Abbildung 19:Nephelometrische Messungen zum Einfluss von a-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida parapsilosis
Abbildung 20: Mikroskopische Bilder zum Einfluss von a-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida parapsilosis
Abbildung 21:Nephelometrische Messungen zum Einfluss von ß-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida albicans
Abbildung 22: Mikroskopische Bilder zum Einfluss von ß-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida albicans
Abbildung 23:Nephelometrische Messungen zum Einfluss von ß-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida glabrata
Abbildung 24: Mikroskopische Bilder zum Einfluss von ß-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida glabrata
Abbildung 25:Nephelometrische Messungen zum Einfluss von ß-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida krusei
Abbildung 26: Mikroskopische Bilder zum Einfluss von ß-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida krusei
Abbildung 27:Nephelometrische Messungen zum Einfluss von ß-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida parapsilosis
Abbildung 28: Mikroskopische Bilder zum Einfluss von ß-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida parapsilosis
Abbildung 29:Nephelometrische Messungen zum Einfluss von y-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida albicans
Abbildung 30: Mikroskopische Bilder zum Einfluss von y-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida albicans
Abbildung 31: Nephelometrische Messungen zum Einfluss von y-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida glabrata
Abbildung 32: Mikroskopische Bilder zum Einfluss von y-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida glabrata
Abbildung 33: Nephelometrische Messungen zum Einfluss von y-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida krusei
Abbildung 34: Mikroskopische Bilder zum Einfluss von y-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida knisei
Abbildung 35:Nephelometrische Messungen zum Einfluss von y-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida parapsilosis
Abbildung 36: Mikroskopische Bilder zum Einfluss von y-Cyclodextrin in
unterschiedlichen Konzentrationen auf das Proliferationsverhalten von
Candida parapsilosis
Abbildung 37: Schematische Darstellung der Zellwandstruktur von C. albicans, die das
Vorhandensein von unterschiedlichen Schichten zeigt, die mit einzelnen
Komponenten angereichert sind (JeanChaffin et al., 1998)
Abbildung 38: Potentielle Angriffsorte von Antimykotika bei Candida-Spezies (Kurtz, 1999)
Tabelle 1: Potentielle Pathogenitätsfaktoren von Candida und Wirtsabwehr in der
Pathogenese von Candida-Infektionen. (Odds, 1994)
Tabelle 2: Schema der Beschickung einer 96-Well-Mkrotiterplatte in dieser Arbeit
Tabelle 3: Übersicht zur antiproliferativen Wirkung der untersuchten Cyclodextrine auf
die verschiedenen Candida-Spezies
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