Untersuchungen zum Gentransfer bei der Kompostierung gentechnisch veränderter herbizidresistenter Maispflanzen: Forschungsbericht 296 33 905
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Berlin
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2000
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Titel: Untersuchungen zum Gentransfer bei der Kompostierung gentechnisch veränderter herbizidresistenter M
Autor: Peters, Sabine
Jahr: 2000
INHALTSVERZEICHNIS
Seite
1. Einleitung und Aufgabenstellung 1
2. Methoden 6
2.1 Kompostierungsverfahren 6
2.2 Physikalische und chemische Parameter des Kompostierungsprozesses 8
2.3 DNA-Extraktion aus Kompost 9
2.4 Nachweis despat-Gms in DNA-Extrakten aus Kompost 9
2.4.1 Überprüfung der PCR auf,.Falsch-Negative" Ergebnisse 11
2.5 DNA-Isolierung aus Speisechampignons 11
2.6 Anzucht von Tomatenpflanzen auf Kompost 12
2.7 DNA-Extraktion aus Tomatenfrüchten 12
2.8 Temperaturabhängigkeit der Zersetzung despat-Gens 13
2.9 Zersetzungskinetik des pat-Gens im Boden 13
2.10 Überprüfung der BASTA®-Resistenz von isolierten
Mikroorganismen aus Kompost 14
2.11 Ökotoxikologische Bewertung des Kompostes mit dem
Leuchtbakterientest (nach DIN 3 8 412, L34) 14
2.12 Identifizierung der aus Kompost isolierten Mikroorganismen 15
2.13 Genetische Profile von nicht-kultivierbarer Kompost-Mikroflora 17
3. Ergebnisse 19
3.1 Kompostierungsverlauf 19
3.2 Bestimmung der Nachweisgrenze des pat-Gens in
DNA-Extrakten aus Maispflanzen 20
3.3 Persistenz des pat-Gens in der Heißrotte 20
3.4 Überprüfung des Temperatureinflusses auf die Persistenz des pat-Gens 22
3.5 Untersuchungen zum Auftreten despat-Gens in
DNA-Extrakten aus Champignonfruchtkörpern und Tomatenfrüchten 22
3.6 Untersuchungen zum Gentransfer vom Kompost auf kultivierbare
Mikroorganismen aus Kompost 23
3.7 Ökotoxikologische Bewertung des Kompostes mit dem
Leuchtbakterientest (DIN 38 412, L34) 24
3.8 Vorkommen kultivierbarer Mikroorganismen im Kompost 24
3.9 Identifizierung von isolierten Mikroorganismen 25
3.10 Charakterisierung der Mikroorganismen mit kultivierungs-
unabhängigen, molekularbiologischen Methoden . 26
3.11 Identifizierung molekularer Isolate 28
4. Diskussion 30
4.1 Allgemeine Bemerkungen 30
4.2 Persistenz pflanzlicher DNA unter Kompostierungsbedingungen
im Vergleich zu Boden 31
4.3 Sukzession von Mikroorganismen im Kompostierungsprozess 33
4.4 Transfer der rekombinanten Gene von Pflanzenmaterial auf
Mikroorganismen 36
4.5 Schlussfolgerungen ¦ 38
5. Zusammenfassung 40
6. Summary 40
7. Literaturverzeichnis 41
8. Anhang 48
Tabellen 48-52
Abbildungen 53-65 |
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