Rolle der Myeloperoxidase in der hepatischen Fibrogenese:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Hamburg
2020
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adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
I.
ARBEITSHYPOTHESE
...................................................................................
1
II.
EINLEITUNG
................................................................................................
2
11.1
SYMPTOME
UND
KOMPLIKATIONEN
DER
LEBERZIRRHOSE
..........................
2
IL2
DIAGNOSTIK
DER
LEBERZIRRHOSE
...........................................................
4
11.
3
THERAPIE
DER
LEBERZIRRHOSE
..............................................................
4
11.
4
PATHOGENESE
DER
LEBERZIRRHOSE
.......................................................
5
11.4.1
HEPATISCHE
STERNZELLEN
(HSC)
................................................
5
IL5
MYELOPEROXIDASE
...............................................................................
7
IL6
LOW
DENSITY
LIPOPROTEINS
ALS
MOEGLICHER
PROFIBROTISCHER
MEDIATOR...
9
III.
MATERIAL
UND
METHODEN
......................................................................
11
111.1
MATERIAL
...........................................................................................
11
111.
1.1
PRAEPARATION
GENOMISCHER
DNA
............................................
11
111.
1.2
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
.......................................
11
II
1.1.3
DNA-GELELEKTROPHORESE
.......................................................
11
111.1.4
TETRACHLORKOHLENSTOFF-MAUSMODELL
(CCK-MAUSMODELL)
...
11
III.
1.5
SAKRIFIZIERUNG
DER
VERSUCHSTIERE
..........................................
11
111.
1.6
HISTOLOGISCHE
AUFBEREITUNG
..................................................
11
111.1.7
ISOLATION
HEPATISCHER
STERNZELLEN
.........................................
12
111.
1.8
PRAEPARATION
UND
OXIDATION
HUMANER
LDL
............................
12
II
1.1.9
RNA-ISOLATION
........................................................................
13
111.
1.10
HERSTELLUNG
KOMPLEMENTAERER
DNA
(CDNA)
........................
13
111.1.11
QUANTITATIVE
REAL-TIME
PCR
(QPCR)
..................................
13
II
1.1.12
VERBRAUCHSMATERIALIEN
.......................................................
13
II
1.1.13
PUFFER
UND
LOESUNGEN
..........................................................
13
111.1.14
GERAETE
.................................................................................
15
111.1.15
SOFTWARE
..............................................................................
16
111.
2
METHODEN
.......................................................................................
16
111.2.1
VERSUCHSTIERHALTUNG
..............................................................
16
111.
2.2
PRAEPARATION
GENOMISCHER
DNA
AUS
VERSUCHSTIEREN
...........
17
111.2.3
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
.......................................
17
111.2.4
DNA-GELELEKTROPHORESE
.......................................................
19
111.2.5
TETRACHLORKOHLENSTOFF-MAUSMODELL
(CCK-MAUSMODELL)
......
19
111.2.6
MDR2-MPO-DOPPELKNOCKOUT
MAUSMODELL
.........................
19
111.
2.7
PRAEPARATION
DER
VERSUCHSTIERE
.............................................
20
111.2.8
AKTIVITAETSBESTIMMUNG
DER
ALANIN-AMINOTRANSFERASE
(ALT).
21
111.2.9
HISTOLOGISCHE
FIXIERUNG
........................................................
21
111.2.10
ANFERTIGUNG
VON
GEWEBSSCHNITTEN
....................................
21
111.2.11
SIRIUSROTFAERBUNG
..................................................................
22
111.2.12
PLANIMETRISCHE
ERFASSUNG
HISTOLOGISCHER
SCHNITTE
.............
22
111.2.13
DIGITALE
QUANTIFIZIERUNG
HISTOLOGISCHER
DATEN
....................
23
II
1.2.14
ISOLATION
HEPATISCHER
STERNZELLEN
......................................
23
111.2.15
REINHEITSBESTIMMUNG
ISOLIERTER
HSC
................................25
111.
2.16
PRAEPARATION
HUMANER
LDL
..................................................26
111.2.17
ENZYMATISCHE
LDL-OXIDATION
.............................................26
111.2.18
IN
VITRO
STIMULATION
HEPATISCHER
STERNZELLEN
......................
27
II
1.2.19
RNA-ISOLATION
AUS
GEWEBE
UND
ZELLEN
.............................27
IIL2.20
MESSUNG
DER
RNA-KONZENTRATION
.....................................27
111.2.21
HERSTELLUNG
EINER
KOMPLEMENTAEREN
DNA
(CDNA)
.............27
111.
2.22
QUANTITATIVE
REAL-TIME
PCR
(QPCR)
..................................28
111.
2.23
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
.....................................................
28
IV.
ERGEBNISSE
..........................................................................................28
IV.
1
ROLLE
VON
MPO
IM
CHRONISCHEN
CCK-MAUSMODELL
....................28
IV.
1.1
AKTIVITAET
DER
ALANIN-AMINOTRANSFERASE
(ALT)
.......................
28
IV.
1.2
HISTOLOGISCHE
QUANTIFIZIERUNG
DER
LEBERFIBROSE
...............29
IV.
1.3
ANALYSE
DER
EXPRESSION
FIBROSE-ASSOZIIERTER
GENE
.........
30
IV.2
ROLLE
VON
MPO
IM
MDR2-KNOCKOUT-MAUSMODELL
........................
33
IV.2.1
AKTIVITAET
DER
ALANIN-AMINOTRANSFERASE
(ALT)
.......................
33
IV.2.2
HISTOLOGISCHE
QUANTIFIZIERUNG
DER
FIBROSE
..........................
34
IV.
3
IN
VITRO
STIMULATION
VON
HSC
MIT
MPO-OXIDIERTEN
LDL
.................
35
IV.3.1
GENEXPRESSION
AUF
MRNA-EBENE
RUHENDER
HSC
.............
35
IV.3.2
GENEXPRESSION
AUF
MRNA-EBENE
AKTIVIERTER
HSC
............
37
V.
DISKUSSION
............................................................................................
38
V.
1
ROLLE
VON
MPO
IM
CHRONISCHEN
CCK-MAUSMODELL
........................
38
V.
2
ROLLE
VON
MPO
IM
MDR2-MPO-DOPPELKNOCKOUT
MAUSMODELL
....39
V.
3
ROLLE
VON
MPO-OXIDIERTEN
LDL
AUF
PRIMAERE
HSC
..........................40
VI.
ZUSAMMENFASSUNG
............................................................................
44
VII.
ABSTRACT
.............................................................................................
45
VIII.
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
..................................................................
46
IX.
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
....................................................................46
X.
TABELLENVERZEICHNIS
.................
47
XI.
LITERATURVERZEICHNIS
...........................................................................48
XII.
DANKSAGUNG
......................................................................................54
XIII.
LEBENSLAUF
........................................................................................
55
XIV.
EIDESSTATTLICHE
VERSICHERUNG
........................................................
56
|
adam_txt |
INHALTSVERZEICHNIS
I.
ARBEITSHYPOTHESE
.
1
II.
EINLEITUNG
.
2
11.1
SYMPTOME
UND
KOMPLIKATIONEN
DER
LEBERZIRRHOSE
.
2
IL2
DIAGNOSTIK
DER
LEBERZIRRHOSE
.
4
11.
3
THERAPIE
DER
LEBERZIRRHOSE
.
4
11.
4
PATHOGENESE
DER
LEBERZIRRHOSE
.
5
11.4.1
HEPATISCHE
STERNZELLEN
(HSC)
.
5
IL5
MYELOPEROXIDASE
.
7
IL6
LOW
DENSITY
LIPOPROTEINS
ALS
MOEGLICHER
PROFIBROTISCHER
MEDIATOR.
9
III.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
11
111.1
MATERIAL
.
11
111.
1.1
PRAEPARATION
GENOMISCHER
DNA
.
11
111.
1.2
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
.
11
II
1.1.3
DNA-GELELEKTROPHORESE
.
11
111.1.4
TETRACHLORKOHLENSTOFF-MAUSMODELL
(CCK-MAUSMODELL)
.
11
III.
1.5
SAKRIFIZIERUNG
DER
VERSUCHSTIERE
.
11
111.
1.6
HISTOLOGISCHE
AUFBEREITUNG
.
11
111.1.7
ISOLATION
HEPATISCHER
STERNZELLEN
.
12
111.
1.8
PRAEPARATION
UND
OXIDATION
HUMANER
LDL
.
12
II
1.1.9
RNA-ISOLATION
.
13
111.
1.10
HERSTELLUNG
KOMPLEMENTAERER
DNA
(CDNA)
.
13
111.1.11
QUANTITATIVE
REAL-TIME
PCR
(QPCR)
.
13
II
1.1.12
VERBRAUCHSMATERIALIEN
.
13
II
1.1.13
PUFFER
UND
LOESUNGEN
.
13
111.1.14
GERAETE
.
15
111.1.15
SOFTWARE
.
16
111.
2
METHODEN
.
16
111.2.1
VERSUCHSTIERHALTUNG
.
16
111.
2.2
PRAEPARATION
GENOMISCHER
DNA
AUS
VERSUCHSTIEREN
.
17
111.2.3
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
.
17
111.2.4
DNA-GELELEKTROPHORESE
.
19
111.2.5
TETRACHLORKOHLENSTOFF-MAUSMODELL
(CCK-MAUSMODELL)
.
19
111.2.6
MDR2-MPO-DOPPELKNOCKOUT
MAUSMODELL
.
19
111.
2.7
PRAEPARATION
DER
VERSUCHSTIERE
.
20
111.2.8
AKTIVITAETSBESTIMMUNG
DER
ALANIN-AMINOTRANSFERASE
(ALT).
21
111.2.9
HISTOLOGISCHE
FIXIERUNG
.
21
111.2.10
ANFERTIGUNG
VON
GEWEBSSCHNITTEN
.
21
111.2.11
SIRIUSROTFAERBUNG
.
22
111.2.12
PLANIMETRISCHE
ERFASSUNG
HISTOLOGISCHER
SCHNITTE
.
22
111.2.13
DIGITALE
QUANTIFIZIERUNG
HISTOLOGISCHER
DATEN
.
23
II
1.2.14
ISOLATION
HEPATISCHER
STERNZELLEN
.
23
111.2.15
REINHEITSBESTIMMUNG
ISOLIERTER
HSC
.25
111.
2.16
PRAEPARATION
HUMANER
LDL
.26
111.2.17
ENZYMATISCHE
LDL-OXIDATION
.26
111.2.18
IN
VITRO
STIMULATION
HEPATISCHER
STERNZELLEN
.
27
II
1.2.19
RNA-ISOLATION
AUS
GEWEBE
UND
ZELLEN
.27
IIL2.20
MESSUNG
DER
RNA-KONZENTRATION
.27
111.2.21
HERSTELLUNG
EINER
KOMPLEMENTAEREN
DNA
(CDNA)
.27
111.
2.22
QUANTITATIVE
REAL-TIME
PCR
(QPCR)
.28
111.
2.23
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
.
28
IV.
ERGEBNISSE
.28
IV.
1
ROLLE
VON
MPO
IM
CHRONISCHEN
CCK-MAUSMODELL
.28
IV.
1.1
AKTIVITAET
DER
ALANIN-AMINOTRANSFERASE
(ALT)
.
28
IV.
1.2
HISTOLOGISCHE
QUANTIFIZIERUNG
DER
LEBERFIBROSE
.29
IV.
1.3
ANALYSE
DER
EXPRESSION
FIBROSE-ASSOZIIERTER
GENE
.
30
IV.2
ROLLE
VON
MPO
IM
MDR2-KNOCKOUT-MAUSMODELL
.
33
IV.2.1
AKTIVITAET
DER
ALANIN-AMINOTRANSFERASE
(ALT)
.
33
IV.2.2
HISTOLOGISCHE
QUANTIFIZIERUNG
DER
FIBROSE
.
34
IV.
3
IN
VITRO
STIMULATION
VON
HSC
MIT
MPO-OXIDIERTEN
LDL
.
35
IV.3.1
GENEXPRESSION
AUF
MRNA-EBENE
RUHENDER
HSC
.
35
IV.3.2
GENEXPRESSION
AUF
MRNA-EBENE
AKTIVIERTER
HSC
.
37
V.
DISKUSSION
.
38
V.
1
ROLLE
VON
MPO
IM
CHRONISCHEN
CCK-MAUSMODELL
.
38
V.
2
ROLLE
VON
MPO
IM
MDR2-MPO-DOPPELKNOCKOUT
MAUSMODELL
.39
V.
3
ROLLE
VON
MPO-OXIDIERTEN
LDL
AUF
PRIMAERE
HSC
.40
VI.
ZUSAMMENFASSUNG
.
44
VII.
ABSTRACT
.
45
VIII.
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
46
IX.
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
.46
X.
TABELLENVERZEICHNIS
.
47
XI.
LITERATURVERZEICHNIS
.48
XII.
DANKSAGUNG
.54
XIII.
LEBENSLAUF
.
55
XIV.
EIDESSTATTLICHE
VERSICHERUNG
.
56 |
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