Identifizierung von pathogenen Sproßpilzen mit molekularbiologischen Verfahren:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Format: | Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
1998
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Beschreibung: | Ulm, Univ., Diss., 2000 |
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
INHALTSVERZEICHNIS
.
I
ABKUERZUNGSVEZEICHNIS
.
III
1
EINLEITUNG
_
1
1.1
INVASIVE
CANDIDOSEN
-
EIN
ZUNEHMENDES
PROBLEM
.
.
.
1
1.1.1
EPIDEMIOLOGIE
.
1
1.1.2
KLINIK
.
3
1.1.3
PATHOGENESE
EINER
SPROSSPILZSEPSIS
.
5
1.1.4
DIAGNOSTIK
.
6
1.1.5
THERAPIE
.
8
1.2
PROBLEMSTELLUNG
.
8
ITUAU
YYEEEEEOOEEAEOEEEEOOEEOEEOEEOEEEEEEEEEOEEOEEEEEEE
SO
YYYYYYYYYYYYYYEEEEEEAEEEEEEEEEOEA
2.1
MIKROBIOLOGISCHE
METHODIK
.
.9
2.1.1
KULTIVIERUNG
UND
DIFFERENZIERUNG
VON
SPROSSPILZEN
.
9
2.1.2
BESTIMMUNG
VON
MINIMALEN
HEMMKONZENTRATIONEN
(-MHK)
.
10
2.2
MOLEKULARBIOLOGISCHE
DIAGNOSTIK
_
_
_
-
.12
2.2.1
NACHWEIS
VON
CANDIDA
ALBICANS
DURCH
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
.
12
2.2.1.1
UEBERSICHT
UEBER
ARBEITSABLAUF
.
12
2.2.1.2
DNA-EXTRAKTION
.
12
22.1.2.1
ZELLYSE
.
12
2.2.1.2.2
REINIGUNG
VON
DNA
DURCH
SAEULENEXTRAKTION
.
12
2.2.1.2.3
DURCHFUEHRUNG
VON
ZELLYSE
UND
DNA-EXTRAKTION
IM
BLUT
.
13
22.
1.2.4
DURCHFUEHRUNG
VON
ZELLYSE
UND
DNA-EXTRAKTION
IM
GEWEBE
.
13
2.2.1.3
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
.
15
22.1.3.1
BESTANDTEILE
DER
PCR
.
15
2.2.1.3.2
PRINZIP
DER
PCR
.
16
2.2.1.3.3
DURCHFUEHRUNG
VON
PCR
.
18
2.2.1.3.4
PRINZIP
DER
NESTED
PCR
.
19
2.2.1.3.5
DURCHFUEHRUNG
VON
NESTED
PCR
(2.PCR)
.
19
2.2.1.3.6
NACHWEIS
VON
C.
ALBICANS
DURCH
PCR
UND
NESTED
PCR
.
20
2.2.1.3.7
1.
UND
2.
PCR
IM
VERGLEICH
.
21
2.2.1.4
PRINZIP
DER
ELEKTROPHORESE
UND
SICHTBARMACHUNG
VON
DNA
.
21
22.1.4.1
DURCHFUEHRUNG
DER
ELEKTROPHORESE
UND
SICHTBARMACHUNG.
22
22.1.5
EXPERIMENTELLE
UNTERSUCHUNGEN
IN
VITRO
.
23
2.2.1.5.1
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
SPEZIFITAET
DER
PCR-METHODE
.
23
22.1.5.2
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
SENSITIVITAET
DER
PCR-METHODE
.
23
2.2.1.6
EXPERIMENTELLE
UNTERSUCHUNGEN
IN
VIVO
.26
22.1.6.1
INFEKTIONSVERSUCH
VON
MAEUSEN
MIT
C.
ALBICANS:
.26
2.2.1.6.2
EINFLUSS
DES
ANTIMYKOTIKUM
AUF
DEN
NACHWEIS
VON
C.
ALBICANS
IN
DER
MAUS
.
27
2.2.1.6.3
VERTEILUNG
VON
C.
ALBICANS
NACH
ORALER
GABE
IN
BLUT
UND
ORGANEN
DER
MAUS
.
28
2.2.2
IDENTIFIZIERUNG
VON
CANDIDA
SPP.
MIT
PCR-FINGERPRINTING
.
29
2.2.2.1
UEBERSICHT
UEBER
DEN
ARBEITSABLAUF.
.
29
222.2
PHENOLEXTRAKTION
.
30
2.2.2.3
PRINZIP
DES
PCR-FINGERPRINTING
(RAPD-PCR)
.
31
2.2.2
4
PCR-FINGERPRINTING,
ANGEWENDET
BEI
CANDIDA
SPP
.
33
2.2.2.5
DURCHFUEHRUNG
DES
PCR-FINGERPRINTING
.
33
22.2.6
IDENTIFIZIERUNG
VON
CANDIDA
SPP.
ISOLATEN
EINES
PATIENTEN
MIT
PCR-FINGERPRINTING
.
35
22.2.7
VERLAUFSBEOBACHTUNG
DER
BESIEDLUNG
DER
MUNDHOEHLE
VON
PATIENTEN
MIT
CANDIDIA
SPP.
DURCH
PCR
FINGERPRINTING
.
36
3
ERGEBNISSE
.
.
.
37
3.1
MIKROBIOLOGISCHE
UNTERSUCHUNGEN
.
.
.
.
.
.37
3.1.1
KULTIVIERUNG
UND
DIFFERENZIERUNG
VON
SPROSSPILZEN
.
37
3.1.2
BESTIMMUNG
VON
MINIMALEN
HEMMKONZENTRATIONEN
DER
ANTIMYKOTIKA
.
40
3.2
MOLEKUIARBIOLOGISCHE
UNTERSUCHUNGEN
.
.
_
41
32.1
EXPERIMENTELLE
RESULTATE
IN
VITRO
.
41
32.1.1
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
SPEZIFITAET
DER
PCR-METHODE
ZUM
NACHWEIS
VON
C.
ALBICANS
.
41
32.1.2
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
SENSITIVITAET
DER
PCR-METHODE
ZUM
NACHWEIS
VON
C.
ALBICANS
.
43
32.1.3
VERDUENNUNGSREIHEN
MIT
C.
ALBICANS
IN
PHYS.
KOCHSALZLOESUNG
.
43
32.1.4
VERDUENNUNGSREIHEN
MIT
C.
ALBICANS
IN
HUMANBLUT
.
44
32.1.5
VERDUENNUNGSREIHEN
VON
C.
ALBICANS
IN
BLUT
UND
GEWEBE
VON
MAEUSEN
.
44
32.1.6
VERGLEICH
DER
SENSITIVITAET
ZWISCHEN
1.
+
2.
PRIMER-PAAR
ZUM
NACHWEIS
VON
C.
ALBICANS
.
49
3.2.2
EXPERIMENTELLE
RESULTATE
IN
VIVO
.
50
3.22.1
INFEKTIONSVERSUCH
VON
MAEUSEN
MIT
C.
ALBICANS
.
50
3.2.22
EINFLUSS
DES
ANTIMYKOTIKUMS
FLUCONAZOL
AUF
DEN
NACHWEIS
VON
C.
ALBICANS
IN
DER
MAUS
.
54
32.2.3
VERTEILUNG
VON
C.
ALBICANS
NACH
ORALER
GABE
IN
BLUT
UND
ORGANEN
DER
MAUS
.
66
32.3
IDENTIFIZIERUNG
VON
CANDIDA
SPP.
MIT
PCR-FINGERPRINTING
.
69
32.3.1
IDENTIFIZIERUNG
VON
CANDIDA
SPP. ISOLATEN
EINES
PATIENTEN
MIT
PCR-FINGERPRINTING
.
69
3.2.32
VERLAUFSBEOBACHUNG
DER
BESIEDELUNG
DER
MUNDHOEHLE
VON
PATIENTEN
MIT
CANDIDA
SPP.
DURCH
PCR-FINGERPRINTING
.
71
4
DISKUSSION
.
78
4.1
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
.
78
4.2
PCR-FINGERPRINTING
.
82
5
ZUSAMMENFASSUNG
-----------------------------------------------------------
84
LITERATURVERZEICHNIS
.
86
DANKSAGUNG
.
91
II |
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