Apoptose und Proliferation von Herzmuskelzellen rechtsventrikulärer Biopsieproben bei Patienten mit und ohne Rejektion:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2000
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Berlin, Humboldt-Univ., Diss., 2000 |
| Beschreibung: | 90 Bl. Ill., graph. Darst. : 31 cm |
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GLIEDERUNG
5
GLIEDERUNG
KAPITEL SEITE
1 EINLEITUNG 9
11 FRAGESTELLUNG 10
2 APOPTOSE UND NEKROSE 11
2.1 HISTORISCHES ZUM BEGRIFF APOPTOSE 11
2.2 APOPTOSE 11
2.3 NEKROSE 13
2.4 UNTERSCHIEDE ZWISCHEN APOPTOSE UND NEKROSE 14
3 MATERIAL UND METHODEN 15
3.1 PATIENTEN 15
3.1.1 AUSWAHL DER PATIENTEN 15
3.1.2 AUSSCHLUSSKRITERIEN FUER DIE AUSWAHL DER PATIENTEN 15
3.1.3 MEDIKAMENTOESE THERAPIE DER PATIENTEN NACH DER 16
TRANSPLANTATION
3.1.4 GEWINNUNG DES UNTERSUCHUNGSMATERIALS 16
3.1.5 VERGLEICHSGRUPPE 16
3.2 LICHTMIKROSKOPISCHE UNTERSUCHUNG UND KLASSIFIZIERUNG DER BIOPSIEN 17
3.3 FIXIERUNG DER BIOPSIEN 17
3.4 IN SITU NACHWEISMETHODEN VON APOPTOSE UND PROLIFERATION AM 18
PARAFFINSCHNITT
3.4.1 APOPTOSE DETEKTION KIT 18
3.4.2 METHODISCHES PRINZIP DER IN SITU APOPTOSE DETEKTION 19
3.4.3 APOPTOSE REGULIERENDE PROTEINE 20
3.4.3.1 BAX 20
3.4.3.2 BCL-2 21
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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GLIEDERUNG
6
3.4.3 3 P53 21
3.4.4 ZELLPROLIFERATIONSMARKER 21
3.4.4.1PCNA 21
3.5 PROTOKOLL FUER DIE IN SITU APOPTOSE DETEKTION MIT DEM TREVIGEN
YY
22
TACS 2TDT BLUE LABEL KIT
3.5.1 BENOETIGTE MATERIALIEN UND GERAETE 22
3.5.2 BENOETIGTE REAGENZIEN 23
3.5.3 MITGELIEFERTE REAGENZIEN DER FIRMA TREVIGEN
YY
24
3.5.3.1 PUFFERZUSAMMENSETZUNG 24
3.5.4 ENTPARAFFINISIEREN DER SCHNITTE 24
3.5.5 VORBEREITUNG DER REAGENZIEN 25
3.5.6 CYTO PORE
YY
BEHANDLUNG 25
3.5.7 DNASE I BEHANDLUNG ZUR HERSTELLUNG VON POSITIVKONTROLLEN 26
3.5.8 INAKTIVIERUNG DER ENDOGENEN PEROXIDASE 27
3.5.9 VORBEREITUNG UND ZUSAMMENSETZUNG DES TDT LABELING 27
REAKTION
3.5.10HERSTELLUNGVONN EGATIVKONTROLLEN 28
3.5.11 TACS BLUE LABEL DETEKTION 29
3.5.12 GEGENFAERBUNG MIT KEMECHT-ROT C 30
3.6 NACHWEIS DER APOPTOSE REGULIERENDEN PROTEINE BCL-2, BAX, P53 UND 30
DES ZELLPROLIFERATIONSMARKERS PCNA
3.6.1 IMMUNHISTOCHEMISCHE FAERBUNG MIT DER 30
BIOTIN-STREPTAVIDIN-METHODE AM PARAFFMSCHNITT
3.6.2 IMMUNHISTOCHEMISCHE FAERBUNG MIT DER APAAP-METHODE AM 32
PARAFFMSCHNITT
3.7 MORPHOMETRISCHE UNTERSUCHUNG 35
3.8 STATISTISCHE ANALYSE 36
GLIEDERUNG
7
4 ERGEBNISSE 37
4.1 PATIENTEN 37
4.2 LICHTMIKROSKOPISCHE UNTERSUCHUNG UND KLASSIFIZIERUNG DER BIOPSIEN 38
4.3 FIXIERUNG DER BIOPSIEN 38
4.4 IN SITU NACHWEISMOEGLICHKEITEN VON APOPTOSE UND PROLIFERATION AM 38
PARAFFINSCHNITT
4.5 TDT-D-UTP LABELING DER HERZMUSKELZELLEN ZUR IN SITU APOPTOSE 38
DETEKTION MIT DEM TREVIGEN
YY
TACS 2TDT BLUE LABEL KIT (TUNEL-
METHODE)
4.5.1 POSITIVKONTROLLEN 40
4.5.2 NEGATIVKONTROLLEN 41
4.6 NACHWEISMOEGLICHKEITEN DER APOPTOSE REGULIERENDEN PROTEINE BCI-2, 41
BAX, P53 UND DES ZELLPROLIFERATIONSMARKERS PCNA
4.6. 1 IMMUNHISTOCHEMISCHE FAERBUNG MIT DER STREPTAVIDIN-BIOTIN-METHODE
41
4.6.1.1 BCL-2 LABELING DER HERMUSKELZELLEN 42
4.6.1.2 PCNA LABELING DER HERMUSKELZELLEN 43
4.6.2 IMMUNHISTOCHEMISCHE FAERBUNG MIT DER APAAP-METHODE 44
4.6.2.1 BAX LABELING DER HERMUSKELZELLEN 44
4.6.2.2 P53 LABELING DER HERMUSKELZELLEN 45
4.7 ERGEBNISSE DER MORPHOMETRISCHEN AUSWERTUNG 45
4.7.1 APOPTOSE EXPRESSION DER HTX-PATIENTEN BEI REJEKTION 46
4.7.2 BCL-2 EXPRESSION DER HTX-PATIENTEN BEI REJEKTION 47
4.7.3 BAX EXPRESSION DER HTX-PATIENTEN BEI REJEKTION 48
4.7.4 PCNA EXPRESSION DER HTX-PATIENTEN BEI REJEKTION 49
4.7.5 APOPTOSE EXPRESSION DER HTX-PATIENTEN OHNE REJEKTION 50
4.7.6 BCL-2 EXPRESSION DER HTX-PATIENTEN OHNE REJEKTION 51
4.7.7 BAX EXPRESSION DER HTX-PATIENTEN OHNE REJEKTION 52
4.7.8 PCNA EXPRESSION DER HTX-PATIENTEN OHNE REJEKTION 53
4.7.9 APOPTOSE EXPRESSION DER PATIENTEN DER VERLEICHSGRUPPE 54
4.7.10 BCL-2 EXPRESSION DER PATIENTEN DER VERGLEICHSGRUPPE 55
GLIEDERUNG
8
4.7.11 BAX EXPRESSION DER PATIENTEN DER VERGLEICHSGRUPPE 56
4.7.12 PCNA EXPRESSION DER PATIENTEN DER VERGLEICHSGRUPPE 57
4.7.13 MITTELWERTE ALLER DATEN DER HTX-PATIENTEN BEI REJ EKTION 5 8
4.7.14 MITTELWERTE ALLER DATEN DER HTX-PATIENTEN OHNE REJEKTION 59
4.7.15 MITTELWERTE ALLER DATEN DER PATIENTEN DER VERGLEICHSGRUPPE 60
5 DISKUSSION 61
6 ZUSAMMENFASSUNG 76
7 LITERATURVERZEICHNIS 77
8 DANKSAGUNG 88
9 LEBENSLAUF 89 |
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