Molekulare Untersuchungen von Knochenmorphogenese- und Couplingfaktoren: ein Beitrag zur Pathophysiologie des gestörten Knochenumsatzes der Hyperostosis-Corticalis-Deformans-Juvenilis
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
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2004
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3
INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1.
EINLEITUNG
9
1.1.1.
ZUR
TRADITION
DER
DIAGNOSTIK
UND
THERAPIE
VON
ERKRANKUNGEN
DES
SKELETTES
UND
DES
9
BINDEGEWEBES
IN
DER
KLINIK
FUER
KINDER
UND
JUGENDMEDIZIN
DER
FRIEDRICH-SCHILLER-
UNIVERSITAET
JENA
1.2.
DIE
REGULATION
DES
KNOCHENUMBAUS
11
1.2.1.
KNOCHENUMBAU
UND
PEAK
BONE
MASS
11
1.2.2.
HORMONE
-
SYSTEMISCHE
REGULATIONSFAKTOREN
13
1.2.3.
CYTOKINE
ALS
LOKALE
REGULATIONSFAKTOREN
DES
KNOCHENUMBAUS
15
1.2.3.1.
CYTOKINE
ALS
DIFFERENZIERUNGS
UND
AKTIVIERUNGSFAKTOREN
DER
OSTEOKLASTEN
17
1.2.3.2.
CYTOKINE
ALS
INHIBITOREN
DER
OSTEOKLASTEN
FORMATION
UND
STIMULATOREN
DER
22
OSTEOBLASTEN
DIFFERENZIERUNG
1.2.4.
COUPLING
DAS
GESPRAECH
ZWISCHEN
OSTEOBLAST
UND
OSTEOKLAST
25
1.2.4.1.
TRANSFORMING
GROWTH
FACTOR
BETA
(TGFSS)
25
1.2.4.2.
ZUR
BEDEUTUNG
VASKULAERER
FAKTOREN
AUF
DAS
COUPLING
28
1.2.4.3.
DAS
YYNEUE
"
COUPLING-SYSTEM
(RANKL/RANK,
OPG/RANKL)
30
1.2.5.
KNOCHENMORPHOGENESEFAKTOREN
32
1.2.5.1.
BONE
MORPHOGENETIC
PROTEINS
(BMP'S)
32
1.2.5.2.
BMP
-
REZEPTOREN
35
1.2.5.3.
BMP/SMAD
VERMITTELTE
SIGNALUEBERTRAGUNG
36
1.2.5.4.
BMP
-
NETZWERK
UND
KNOCHENENTWICKLUNG
38
1.2.5.5.
REGULATION
DES
BMP
NETZWERKS
45
1.3.
FRAGESTELLUNG
49
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
51
2.1.
FALLDEMONSTRATION
DER
INDEXPATIENTIN
PD
51
2.2.
UNTERSUCHUNGSMATERIAL
UND
LABORMETHODEN
52
2.2.1.
UNTERSUCHUNGSMATERIAL
52
2.2.1.1.
AUSWAHL
DER
PARAMETER
52
2.2.1.2.
PROBANDEN
UND
PATIENTEN
53
2.2.2.
LABORMETHODEN
57
2.2.2.1.
ISOLIERUNG
VON
LEUKOZYTEN
57
2.2.2.2.
LEUKOZYTENSEPARATION
MITTELS
MAGNETISCHER
ZELLSEPARATION
/
MACS
57
4
2.2.2.3.
ZELLKULTUR
UND
PRAEPARATION
VON
OSTEOSARKOMZELLEN
(SAOS2)
UND
OSTEOBLASTEN
NACH
60
PRIMAERER
KNOCHENZELLKULTUR
2.2.2.4.
MIKROSKOPIE
64
2.2.2.5.
MOLEKULARE
UNTERSUCHUNGSMETHODEN
65
2.2.2.6.
AUSWERTUNG
UND
DATENANALYSE
72
2.2.2.7.
BESTIMMUNG
VON
KNOCHENUMSATZ-REGULATIONSFAKTOREN
UND
KNOCHENMATRIXPROTEINEN
74
MITTELS
ENZYM-ASSAY
(ELISA)
UND
RADIO-IMMUNO
ASSAY
(RIA)
3.
ERGEBNISSE
75
3.1.
FALLDEMONSTRATION
PATIENTIN
PD,
DIAGNOSE:
HYPEROSTOSIS
CORTICALIS
DEFORMANS
75
JUVENILIS
(HCDJ)
3.2.
UNTERSUCHUNG
DER
EXPRESSION
VON
MITGLIEDERN
DES
BMP
NETZWERKES
IN
PERIPHEREN
83
LEUKOZYTEN
3.2.1.
BMP
EXPRESSION
VON
NORMALPERSONEN
83
3.2.2.
ERGEBNISSE
DER
UNTERSUCHUNGEN
DES
BMP
NETZWERKES
BEI
PATIENTEN
MIT
84
HYPEROSTOSIS
CORTICALIS
DEFORMANS
JUVENILIS
(HCDJ)
3.2.3.
BMP
EXPRESSION
BEI
HCDJ
PATIENTEN
VOR
UND
NACH
THERAPIE
MIT
BISPHOSPHONAT
86
3.2.4.
BMP
EXPRESSION
BEI
TRANSIENTER
HYPERPHOSPHATASIE
(THPI)
89
3.2.5.
BAFP-EXPRESSION
BEI
HYPOPHOSPHATASIE
(NHPI)
90
3.2.6.
BMP
EXPRESSION
BEI
HYPOPHOSPHATASIE
(NHPI)
VOR
UND
NACH
BISPHOSPHONAT-
91
THERAPIE
3.2.7.
VERGLEICH
DER
BMP
EXPRESSION
ZWISCHEN
PATIENTEN
MIT
HCDJ
UND
92
HYPOPHOSPHATASIE
(NHPI)
3.3.
EXPRESSION
DES
BMP
NETZWERKES
IN
OSTEOBLASTAEREN
ZELLEN
DES
PATIENTEN
MIT
93
HYPOPHOSPHATASIE
NACH
PRIMAERER
OSTEOBLASTENKULTUR
IM
VERGLEICH
ZU
NORMALZELLEN
3.4.
EXPRESSION
VON
MITGLIEDERN
DES
BMP
NETZWERKES
UND
VON
KNOCHENMARKEM
IN
94
LEUKOZYTEN-SUBPOPULATIONEN
3.4.1.
EXPRESSION
VON
BMP-5,
AP,
CBFA-1
UND
TGFSSL,2
IN
LEUKOZYTENSUBPOPULATIONEN
94
VON
NORMALPERSONEN
3.4.2.
EXPRESSION
VON
BMP-5
UND
KNOCHENMARKEM
IN
SEPARIERTEN
UND
GESAMT
97
LEUKOZYTEN
VOR
UND
NACH
BISPHOSPHONAT-THERAPIE
BEI
PATIENTEN
MIT
GESTOERTER
REGULATION
DER
ALKALISCHEN
PHOSPHATASE
(AP)
5
3.4.3.
VERGLEICH
DER
EXPRESSION
VON
MITGLIEDERN
DES
BMP
NETZWERKES
UND
KNOCHEN
101
MARKEM
IN
GESAMT-LEUKOZYTEN
UND
LEUKOZYTENSUBPOPULATIONEN
VOR
UND
NACH
BISPHOSPHONAT-THERAPIE
ZWISCHEN
PATIENTEN
MIT
UND
OHNE
GESTOERTER
REGULATION
DER
ALKALISCHEN
PHOSPHATASE
(AP)
3.4.4.
EXPRESSION
VON
MITGLIEDERN
DES
BMP
NETZWERKES
UND
VON
KNOCHENMARKEM
IN
105
SAOS2
ZELLEN
VOR
UND
NACH
EINER
BISPHOSPHONAT-THERAPIE
3.5.
ERGEBNISSE
DER
UNTERSUCHUNGEN
VON
COUPLINGFAKTOREN
UND
KNOCHENMARKEM
IM
111
SERUM
UND
KNOCHENZELLKULTUR-MEDIUM
3.5.1.
OPG
UND
SRANKL
EXPRESSION
IM
SERUM
UND
IM
KULTURMEDIUM
OSTEOBLASTAERER
ZELLEN
111
3.5.2.
ERGEBNISSE
DER
UNTERSUCHUNG
VON
KNOCHENMATRIXPROTEINEN
IM
SERUM
VON
PATIENTEN
113
UND
NORMALKONTROLLEN
3.6.
UEBERPRUEFUNG
DER
ERGEBNISSE
DER
MOLEKULAREN
UNTERSUCHUNG
MITTELS
STATISTISCHER
115
VERFAHREN
3.6.1.
STATISTISCHE
PRUEFUNG
DER
ERGEBNISSE
DER
MOLEKULAREN
UNTERSUCHUNGEN
VON
116
KNOCHENMORPHOGENESEFAKTOREN
UND
KNOCHENMARKEM
3.6.2.
STATISTISCHE
UEBERPRUEFUNG
DER
ERGEBNISSE
DER
UNTERSUCHUNG
VON
COUPLING-
117
FAKTOREN
UND
KNOCHENMATRIXPROTEINEN
3.7.
ERGEBNISSE
DER
KULTUR
OSTEOBLASTAERER
ZELLEN
AUS
PRIMAEREM
KNOCHENGEWEBE
118
3.7.1.
PRIMAERE
KNOCHENZELLKULTUR
118
3.7.2.
ALKALISCHE
PHOSPHATASE
(AP)
ZELLFARBUNG
NACH
GERDES
119
4.
DISKUSSION
120
4.1.
EINBEZOGENE
PATIENTEN
UND
ERKRANKUNGEN
121
4.2.
MOLEKULARE
UNTERSUCHUNGEN
135
4.2.1.
ZUM
METHODISCHEN
ANSATZ
135
4.3.
DISKUSSION
WESENTLICHER
UNTERSUCHUNGSERGEBNISSE
138
4.4.
ZU
AUSWIRKUNGEN
VON
MUTATIONEN
IN
KNOCHENMORPHOGENESEFAKTOREN
IM
143
TIERMODELL
UND
BEIM
MENSCHEN
4.5.
ZUR
ANWENDUNG
VON
BISPHOSPHONATEN
151
4.6.
EINE
WENDE
IM
INDEXFALL
161
5.
ZUSAMMENFASSUNG
UND
AUSBLICK
168
6.
DANKSAGUNG
173
7.
LITERATUR
175
8.
ANHANG:
LEBENSLAUF,
EHRENWOERTLICHE
ERKLAERUNG
203 |
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