Untersuchung sekundärer Immunglobulin-Gen-Umlagerungen während der B-Zell-Entwicklung:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
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2000
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
_
1
1.1
DIE
ENTSTEHUNG
DER
ANTIKOERPER-VIELFALT
.
1
1.2
DIE
STADIEN
DER
B-ZELL-ENTWICKLUNG
.
4
1.2.1
DIE
ENTWICKLUNG
VON
B-L
-ZELLEN
.
7
1.3
DIE
MECHANISMEN
DER
B-ZELL-TOLERANZ
.
8
1.4
SEKUNDAERE
V(D)J-REKOMBINATIONEN
IN
PERIPHEREN
B-ZELLEN
.
10
1.5
ZIELE
DER
ARBEIT
.
11
2
MATERIAL
UND
METHODEN
_
12
2.1
CHEMIKALIEN
UND
LOESUNGEN
.
12
2.2
MAEUSE
.12
2.3
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
.
12
2.4
IMMUNFLUORESZENZ
UND
ZELLSORTIERUNG
.
13
2.4.1
MAGNETISCHE
ZELLSORTIERUNG
.
13
2.4.2
INTRAZELLULAERE
K-FAERBUNG
VON
PRAE-B-ZELLEN
.
14
2.4.3
ISOLIERUNG
VON
EINZELZELLEN
MITTELS
FACS
.
14
2.5
ISOLIERUNG
GENOMISCHER
DNA
AUS
GEWEBEN
UND
FACS-AUFGEREINIGTEN
ZELLEN
.
15
2.6
SOUTHERN-BLOT
HYBRIDISIERUNG
.
15
2.6.1
QUANTIFIZIERUNG
VON SOUTHERN-BLOTS
.16
2.7
SYNTHETISCHE
OLIGONUKLEOTIDE
.16
2.8
PCR
UND
RT-PCR
REAKTIONEN
.
19
2.8.1
GENOMISCHE
IGH
UND
IGL-PCR
VON
EINZELNEN
ZELLEN
.
19
2.8.2
RT-PCR
VON
EINZELNEN
ZELLEN
.
20
2.8.2.1
RT-PCR
VON
VHDNJH-GENKOMPLEXEN
.
20
2.8.2.2
RT-PCR
VON
VTCLK-GENKOMPLEXEN
.21
2.8.3
KONTROLLREAKTIONEN
.
21
2.9
SEQUENZIERUNG
DER
PCR-PRODUKTE.
22
2.10
DATENBANKVERGLEICH
DER
IG-GENFRAGMENTE
.
22
3 ERGEBNISSE
_
23
3.1
DIE
ANWESENHEIT
EINES
NEO
R
-GENS
HAT
KEINEN
EINFLUB
AUF
DIE
ZERSTOERUNG
DES
VUTLSI-GENSEGMENTES
IN
T15I
MAEUSEN
.23
3.2
SEKUNDAERE
IGH-REKOMBINATIONSEREIGNISSE
SIND
SELTEN
IN
BL-81
MAEUSEN
.
26
3.3
RECEPTOR
EDITING
IN
KLEINEN
PRAE-B-ZELLEN
AUS
TIANSGENEN
MAEUSEN
MIT
AUTOREAKTIVEM
BCR
.
29
3.4
SEKUNDAERE
REKOMBINATIONSEREIGNISSE,
WELCHE
ZUM
VERLUST
DES
IDIOTYPS
IN
B-L-ZELLEN
VON
BL-8I*";
3-83ID*'
-
MAEUSEN
FUEHREN,
BETREFFEN
SOWOHL
DEN
IGL
ALS
AUCH
DEN
IGH-GENLOCUS
.
34
3.5
SEKUNDAERE
GENUMLAGERUNGEN
IN
MAEUSEN
MIT
EINEM
NORMALEN
IG-GEN-REPERTOIRE
.41
4
DISKUSSION
_
.49
4.1
DIE
UNTERSCHIEDLICHE
STABILITAET
DES
IGH-GENLOCUS
IN
VERSCHIEDENEN
IGHI
MAEUSEN
WIRD
DURCH
UNBEKANNTE
FAKTOREN
BESTIMMT
.
49
4.2
DER
ZEITPUNKT
SEKUNDAERER
IGL-GEN-REKOMBINATIONEN
IN
AUTOREAKTIVEN
3-83HI;
3-83ID
MAEUSEN
.
51
4.3
SEKUNDAERE
REKOMBINATIONEN
IN
B-L-ZELLEN
.
53
4.4
SEKUNDAERE
GENUMLAGERUNGEN
IN
IGWT
MAEUSEN
.
55
4.4.1
BEWERTUNG
DES
EXPERIMENTELLEN
ANSATZES
.
55
4.4.2
DAS
HAEUFIGE
AUFTRETEN
SEKUNDAERER
REKOMBINATIONEN
IN
SIGM
+
B-ZELL-STADIEN
AUS
IEKL'
17
MAEUSEN
.
57
4.4.3
DAS
PRAE-B-ZELL-KOMPARTIMENT
IN
IGWT
MAEUSEN
.
62
4.4.4
RECEPTOR
REVISUM
IN
PERIPHEREN
B-ZELLEN
IST
EIN
SELTENES
EREIGNIS
.
4.4.5
DIE
IEIDR
"
'
MAUS
ALS
MODELL
ZUR
UNTERSUCHUNG
SEKUNDAERER
REKOMBINATIONSEREIGNISSE
4.5
SCHLUSSBETTACHTUNGEN
.
67
5
ZUSAMMENFASSUNG
_
70
8
8
6
LITERATURVERZEICHNIS
_
72
7
ANHANG
_
ANMERKUNGEN
LEBENSLAUF |
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