Effekte einer Vagusnervstimulation auf neurophysiologische Parameter und die zelluläre Immunantwort im Gehirn der Ratte während einer systemischen Entzündungsreaktion:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
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Gießen, Lahn
VVB Laufersweiler Verlag
2016
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EINLEITUNG...........................................................................................................6
1 BEDEUTUNG DER
SEPSIS...........................................................................................
6
1.1
DEFINITION...........................................................................................................
6
1.2
INZIDENZ.............................................................................................................7
1.3 PATHOPHYSIOLOGIE DER SEPSIS UND DER LPS INDUZIERTEN SYSTEMISCHEN
INFLAMMATION.....................................................................................................8
2 HUMORALER WEG DER KOMMUNIKATION ZWISCHEN IMMUNSYSTEM UND GEHIRN ....
11
2.1.1 DIE BLUT-HIRN
SCHRANKE...........................................................................
12
2.1.2 CIRCUMVENTRIKULAERE ORGANE (CVOS) UND
PLEXUS CHOROIDEUS
...................
13
2.2 TRANSKRIPTIONSFAKTOREN
.....................................................................................
15
2.2.1 NF
K
B UND I
K
B
CX
.......................................................................................
15
2.2.2 STAT3 UND
SOCS3.................................................................................
16
2.2.3
NF-IL6.....................................................................................................
17
3 ZELLULAERER WEG DER KOMMUNIKATION ZWISCHEN IMMUNSYSTEM UND GEHIRN
.......
18
3.1 REKRUTIERUNG VON
IMMUNZELLEN........................................................................18
3.1.1
DIAPEDESE.................................................................................................18
3.1.2
LEPTIN.......................................................................................................20
3.2 IMMUNZELLEN DES
GEHIRNS...............................................................................20
3.2.1
MIKROGLIA................................................................................................
21
3.2.2 MONOZYTEN / MAKROPHAGEN UND
MASTZELLEN............................................22
3.2.3 LYMPHOZYTEN
..........................................................................................
22
3.2.4 NEUTROPHILE
GRANULOZYTEN.......................................................................24
4 NEURONALER WEG DER KOMMUNIKATION ZWISCHEN IMMUNSYSTEM UND GEHIRN....
25
4.1 VAGALE
AFFERENZEN...........................................................................................25
4.2 DER CHOLINERGE ANTI-INFLAMMATORISCHE
WEG....................................................26
5 SEPSIS ASSOZIIERTES
DELIRIUM..............................................................................28
6
MIKROZIRKULATION...............................................................................................
31
6.1 DIE NEUROVASKULAERE
EINHEIT.............................................................................
31
6.2 NEUROVASKULAERE KOPPLUNG - BEDARFSADAPTIERTE DURCHBLUTUNG
.......................
32
6.3 PATHOPHYSIOLOGIE DER
MIKROZIRKULATION..........................................................34
7 ZIEL DER
ARBEIT...................................................................................................
35
II. MATERIAL UND
METHODEN.....................................................................................38
1 VERWENDETE MATERIALIEN ALLGEMEIN
....................................................................
38
2 IN VIVO
VERSUCH..................................................................................................
39
2.1 MATERIALIEN FUER DEN TIERVERSUCH
......................................................................
39
2.2
VERSUCHSTIERE..................................................................................................
41
2.3 V
ERSUCHSPROTOKOLL...........................................................................................
42
2.4 OPERATIVE PRAEPARATION DER VERSUCHSTIERE
........................................................
43
2.4.1 INHALATIONSNARKOSE
....................................................................................
43
2.4.2 KANUELIERUNG DER
ARTERIA UND VENA FEMORALIS
..........................................
43
2.4.3 INJEKTIONSNARKOSE UND MUSKELRELAXATION
.................................................
44
2.4.4 TRACHEOTOMIE, INTUBATION UND BEATMUNG
................................................
45
2.4.5 PRAEPARATION DES NERVUS VAGUS
..................................................................
45
2.4.6
SCHAEDELPRAEPARATION..................................................................................
46
2.4.7 DIE LASER-DOPPLER-FLUSSMETRIE - ERFASSUNG DES EVOZIERTEN
BLUTFLUSSES 47
2.4.8 ERFASSUNG DER
SEPS..................................................................................
49
2.5 UEBERSICHT UEBER DEN VERSUCHSAUFBAU
...............................................................
52
2.6 ZEITLICHER VERSUCHSABLAUF
...............................................................................
53
2.7 PROBENNAHME UND BIOLOGISCHES MATERIAL
........................................................
54
2.8
BLUTUNTERSUCHUNGEN.........................................................................................
55
3
IMMUNHISTOLOGIE...............................................................................................55
3.1 HERSTELLUNG DER
GEFRIERSCHNITTE........................................................................
55
3.2 GRUNDLAGE DER METHODE
..................................................................................
56
3.3 MATERIALIEN FUER DIE IMMUNHISTOCHEMIE
..........................................................
57
3.4
ANTIKOERPER.......................................................................................................
59
3.4.1 PRIMAERE
ANTIKOERPER...................................................................................
59
3.4.2 SEKUNDAERE ANTIKOERPER
..............................................................................
60
3.4.3 KEMFAERBUNGEN -
GEGENFAERBUNG...............................................................
60
3.5
ARBEITSPROTOKOLL...............................................................................................
60
3.5.1 IMMUNFLUORESZENZ
...................................................................................
60
3.5.2
DAB-FAERBUNG..........................................................................................
61
3.6
MIKROSKOPIE...................................................................................................
62
3.7 QUANTIFIZIERUNG DER ERGEBNISSE
......................................................................
63
-II-
3.7.1 NEUTROPHILE
GRANULOZYTEN......................................................................
63
3.7.2
ICAM-1...................................................................................................64
3.7.3 KOLOKALISATION NEUTROPHILER GRANULOZYTEN UND IC AM-1
........................
65
3.7.4
NF-IL6.....................................................................................................66
3.7.5
T-LYMPHOZYTEN.......................................................................................67
4
PCR....................................................................................................................67
4.1 GRUNDLAGE DER
METHODE..................................................................................
67
4.2 MATERIALIEN FUER DIE
PCR..................................................................................69
4.3 RNA
EXTRAKTION..............................................................................................70
4.4 REVERSE
TRANSKRIPTION.....................................................................................72
4.5 ARBEITSPROTOKOLL -P C R
...................................................................................73
4.6 BESTIMMUNG DES
REFERENZGENS.......................................................................74
4.7
AUSWERTUNG.....................................................................................................75
5
ELISA................................................................................................................76
5.1 GRUNDLAGE DER METHODE
..................................................................................
76
5.2 MATERIALIEN FUER DIE
ELISAS............................................................................76
5.3
ARBEITSPROTOKOLL..............................................................................................
77
5.4
AUSWERTUNG.....................................................................................................79
6
STATISTIK...............................................................................................................79
III.
ERGEBNISSE..........................................................................................................80
1 EINFLUESSE EINER VGX UND VGX+VNS AUF KLINISCHE UND NEUROPHYSIOLOGISCHE
PARAMETER WAEHREND EINER EPS INDUZIERTEN SYSTEMISCHEN ENTZUENDUNG
.............
80
1.1 NEUROPHYSIOLOGISCHE
PARAMETER......................................................................80
1.2 KLINISCHE
PARAMETER.........................................................................................81
2 EINFLUESSE EINER VGX UND EINER VGX+VNS AUF FAKTOREN DES HUMORALEN UND
ZELLULAEREN SIGNALWEGS WAEHREND EINER EPS INDUZIERTEN SYSTEMISCHEN
ENTZUENDUNG........................................................................................................85
2.1
PERIPHERIE........................................................................................................85
2.1.1
ZYTOKINE...................................................................................................85
2.2
HYPOTHALAMUS.................................................................................................87
2.2.1
ZYTOKINE...................................................................................................87
2.2.2
TRANSKRIPTIONSFAKTOREN............................................................................89
2.2.3
ZIELGENE....................................................................................................91
2.2.4 LYMPHOZYTEN UND MIKROGLIA
...................................................................
92
2.2.5 FAKTOREN MIT BEDEUTUNG FUER DIE ADHAESION UND MIGRATION VON
IMMUNZELLEN.............................................................................................94
2.2.6 NEUTROPHILE GRANULOZYTEN
.......................................................................
97
2.3
CORTEX.............................................................................................................100
2.3.1
ZYTOKINE..................................................................................................100
2.3.2
TRANSKRIPTIONSFAKTOREN...........................................................................103
2.3.3
ZIELGENE..................................................................................................105
2.3.4 T-LYMPHOZYTEN UND
MIKROGLIA..............................................................106
2.3.5 FAKTOREN MIT BEDEUTUNG FUER DIE ADHAESION UND MIGRATION VON
IMMUNZELLEN...........................................................................................108
2.3.6 NEUTROPHILE
GRANULOZYTEN......................................................................111
2.4
LEPTIN.............................................................................................................116
IV.
DISKUSSION...........................................................................................117
1 DAS TIERMODELL UND DER VERSUCHSABLAUF.
........................................................
117
1.1 DAS TIER- UND
SEPSISMODELL............................................................................
117
1.2 NARKOSE MIT CHLORALOSE UND RELAXATION MIT PANCURONIUM
................................
118
1.3 PARAMETER ZUR SICHERSTELLUNG DER STABILITAET DES
VERSUCHSPROTOKOLLS..............119
2 AUSWIRKUNGEN EINER VGX UND VGX+VNS AUF KLINISCHE UND
NEUROPHYSIOLOGISCHE PARAMETER WAEHREND EINER LPS BEDINGTEN INFLAMMATION
120
2.1 KREISLAUF UND
METABOLISMUS...........................................................................
120
2.2 SOMATOSENSORISCH EVOZIERTE POTENZIALE UND DIE EVOZIERTE FLUSSANTWORT
.......
121
3 AUSWIRKUNGEN EINER VGX UND VGX+VNS AUF FAKTOREN DES HUMORALEN WEGS
WAEHREND EINER LPS BEDINGTEN SYSTEMISCHEN INFLAMMATION
...........................
124
3.1 PERIPHERE
ZYTOKINE..........................................................................................124
3.2 ZYTOKINE IM
GEHIRN........................................................................................128
3.3
TRANSKRIPTIONSFAKTOREN...................................................................................134
3.4
ZIELGENE.........................................................................................................140
4 AUSWIRKUNGEN EINER VGX UND VGX+VNS AUF FAKTOREN DES ZELLULAEREN WEGS
WAEHREND EINER LPS BEDINGTEN SYSTEMISCHEN INFLAMMATION
...........................
144
4.1
T-LYMPHOZYTEN..............................................................................................
144
4.2
MIKROGLIA......................................................................................................
145
4.3 ICAM-1 UND
CXCL1....................................................................................
146
4.4 NG UND
KOLOKALISATION.................................................................................
150
4.5
LEPTIN............................................................................................................
152
5 FAZIT UND
AUSBLICK............................................................................................155
V.
ZUSAMMENFASSUNG............................................................................................
161
VI.
SUMMARY..........................................................................................................
163
VII.
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS....................................................................................
165
VIII.
LITERATURVERZEICHNIS.........................................................................................
169
IX.
ANHANG.............................................................................................................207
1 EIGENE
PUBLIKATIONEN.......................................................................................207
2
DANKSAGUNG......................................................................................................208
3 EIDESSTATTLICHE
ERKLAERUNG.................................................................................210
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| spelling | Schweighöfer, Hanna Verfasser aut Effekte einer Vagusnervstimulation auf neurophysiologische Parameter und die zelluläre Immunantwort im Gehirn der Ratte während einer systemischen Entzündungsreaktion eingereicht von Hanna Schweighöfer, Biberach an der Riss Gießen, Lahn VVB Laufersweiler Verlag 2016 V, 210 Seiten Illustration txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Edition Scientifique Dissertation Justus-Liebig-Universität Gießen 2016 cabi rat cabi cells cabi brain cabi immunology cabi peripheral nerves cabi neurophysiology Doktorarbeit Uni Wissenschaft (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content VVB LAUFERSWEILER Verlag (DE-588)1065553803 pbl DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=030369524&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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| topic | cabi rat cabi cells cabi brain cabi immunology cabi peripheral nerves cabi neurophysiology |
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