Untersuchungen zu den molekularen Mechanismen der Matrixexpression und Blutdruckregulation in humanen Endothelin-1 transgenen Mäusen:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2000
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| adam_text | Titel: Untersuchungen zu den molekularen Mechanismen der Matrixexpression und Blutdruckregulation in human
Autor: Schwarz, Anja
Jahr: 2000
Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung und Zielsetzung der Arbeit 4
2. Literaturübersicht 6
2.1 Das Endothelinsystem 6
2.1.1. Entdeckung und Aufbau der Endotheline 6
2.1.2. Lokalisation und Synthese 6
2.1.3. Endothelinrezeptoren 9
2.1.4. Wechselwirkung mit anderen parakrin wirkenden Hormonen 11
2.1.5. Abbau der Endotheline 11
2.2. Die Bedeutung des Endothelins für kardiovaskuläre Erkrankungen 12
2.2.1. Endothelin und Hypertonie 12
2.2.2. Endothelin und Niere 13
2.3. Transgene Tiere und Endothelin 17
2.3.1. Human Endothelin-1 transgene Mäuse 17
2.4 Endothelin und NO-System 18
2.4.1. NO-System allgemein 18
2.4.2. Effekte von NO auf die Nierenfunktion 19
2.4.3. Wechselwirkung von Endothelin und NO 20
2.5. Endothelin und Matrixsynthese 21
2.5.1. Endothelin als Mediator der Nierenfibrose 21
2.5.2. Endothelin und Proliferation kardialer Fibroblasten 21
3. Eigene Untersuchungen
3.1. Material und Methoden 23
3.1.1. Material 23
3.1.1.1. Geräte 23
3.1.1.2. Materialien 24
3.1.2. Methoden 26
3.1.2.1 Biochemische Methoden 26
3.1.2.1.1 Albuminbestimmung anhand des Enzyme-Linked
Immuno Sorbent-Assay (ELiSA) 26
3.1.2.2. Histologische Methoden 29
3.1.2.2.1. Fixierung 29
3.1.2.2.2. Paraffineinbettung 29
3.1.2.2.3. Sirius Red Färbung 29
3.1.2.3. Molekularbiologische Methoden 31
3.1.2.3.1.Nachweis PCNA-positiver Zellen in der Niere 31
3.1.2.3.2.Nachweis apoptotischer Zellen in der Niere 32
3.1.2.3.2. LTUNEL-Methode 32
3.1.2.3.2.2.Propidiumiodidfärbung 34
3.1.2.4. Immunhistochemische Methoden 35
3.1.2.4.1. Nachweis der Expression der induzierbaren NO Synthase
(iNOS) in der Niere 35
3.1.2.4.2. Immunhistochemischer Nachweis der Matrixproteine
in Herz und Niere 35
3.1.2.4.3. Immunhistochemische Charakterisierung
der perivaskulären Infiltrate in der Niere 37
3.1.2.4.3.1. Nachweis der Makrophagen 38
3.1.2.4.3.2. Nachweis der CD4/CD8 positiven Zellen 39
3.1.2.5. Physiologische Methoden 40
3.1.2.5.1. Blutdruckmessung nach pharmakologischer Blockade
des NO Systems durch L-NAME 40
3.1.2.5.2. Instrumentierung und Durchführung der Akutexperimente 41
3.1.2.5.3. Hämodynamische Messungen 41
3.1.2.6. Untersuchungen im Stoffwechselkäfig 42
3.1.2.6.1. Versuchsdurchführung 42
3.1.2.6.2. Bestimmung des Nitrit/Nitratgehaltes im Harn 43
3.1.2.6.3. Berechnung des Elektrolytgehaltes im Harn 45
3.1.2.7. Tiere 45
3.1.2.8. Statistik 46
3.2. Ergebnisse 47
3.2.1. Zusammensetzung der Matrix in Niere und Herz 47
3.2.1.1. Matrixexpression in den Nieren 47
3.2.1.2. Matrixexpression in den Herzen 52
3.2.2. Regulation des Zellzyklus in den Nieren 58
3.2.3. Blutdruckregulation 60
3.2.3.1. Messung des Blutdrucks nach pharmakologischer Blockade
des NO Systems 60
3.2.3.2. Vertauf des mittieren arteriellen Blutdrucks nach selektiver
Blockade der iNOS 61
3.2.3.3.lmmunhistologischer Nachweis der Expression der iNOS
in den Nieren hu ET-1 transgener Mäuse 62
3.2.3.4.Bestimmung wichtiger renaler Parameter im Urin heterozygoter
ET-1 transgener Mäuse 65
3.2.3.5. Charakterisierung perivaskulärer Infiltrate in den Nieren 67
4. Diskussion 72
4.1. Matrixexpression in hu ET-1 transgenen Mäusen 72
4.2. Regulation des Zelizyklus in der Niere 75
4.3. Blutdruckregulation in hu ET-1 transgenen Mäusen 77
5. Zusammenfassung 84
5.1. Summary 86
6. Abkürzungsverzeichnis 87
7. Literaturverzeichnis 90
Danksagung 105
Persönliche Daten 106
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