Rekonstitution der immunologischen Funktion zytostatikabehandelter Effektorzellen durch Thiolverbindungen:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2000
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
.
1
1.1
OXAZAPHOSPHORINE
.
1
1.1.1
ENTWICKLUNG
DER
OXAZAPHOSPHORINE
.
1
1.1.2
UEBERBLICK
UEBER
DEN
OXAZAPHOSPHORINSTOFFWECHSEL
AM
BEISPIEL
DES
IFOSFAMIDS
.
3
1.1.3
WIRKUNGEN
UND NEBENWIRKUNGEN
EINER
OXAZAPHOSPHORINTHERAPIE
.
4
1.2
GLUTATHION
.
6
1.2.1
BIOLOGISCHE
FUNKTIONEN
UND
STOFFWECHSEL
DES
GLUTATHIONS
.
6
1.2.2
ERKENNTNISSE
AUS
EXPERIMENTELLER
GSH-DEPLETION
UND
ANGEBORENEN
STOFIWECHSELDEFEKTEN.9
1.2
3
ZUSAMMENHANG
ZWISCHEN
GSH
UND
KARZINOGENESE
.
10
1.3
ZELLVERMITTELTE
IMMUNANTWORT
VON
T-LYMPHOTYTEN,
NK
UND
LAK-ZELLEN
.
11
1.3.1
ROLLE
DES
GLUTATHIONS
BEI
DER
INDUKTION
EINER
ZELLVERMITTELTEN
IMMUNANTWORT
.
14
1.3.2
BLOCKIERUNG
DER
IMMUNANTWORT
DURCH
OXAZAPHOSPHORIN-INDUZIERTE
GSH-DEPLETION
.
16
1.4
EINFLUSS
VON
THIOLEN
AUF
DEN
LYMPHOZYTAEREN
GSH-GEHALT
.
17
1.4.1
N-ACETYL-CYSTEIN
.
17
1.4.2
DIHYDROLIPONSAEURE
UND
A-LIPONSAEURE
.
19
1.5
ZIELSETZUNGEN
.
20
1.5.1
IN
V/7RO-UNTERSUCHUNGEN
.
20
1.5.2
IN
V/VO-UNTERSUCHUNGEN
.
22
2
MATERIAL
UND
METHODEN
.
25
2.1
CHEMIKALIEN
UND
ZELLKULTURMATERIALIEN.
25
2.1.1
SPEZIELLE
SUBSTANZEN
.
25
2.1.2
SONSTIGE
CHEMIKALIEN
.
25
2.1.3
ZELLKULTURMATERIALIEN
.
25
2.1.4
RADIOCHEMIKALIEN
.
26
2.1
5
KONJUGIERTE
ANTIKOERPER
FUER
DIE
IMMUNFLUORESZENZANALYSE
(DURCHFLUSSZYTOMETRIE)
.
26
2.1.6
UNKONJUGIERTER
ANTIKOERPER
FUER
DIE
IMMUNFLUORESZENZANALYSE
(DURCHFLUSSZYTOMETRIE)
.
27
2.1.7
SEKUNDAER-ANTIKOERPER
UND
KONJUGATE
.
.27
2.2
GERAETE
.
27
2.3
ZELLEN
.
28
2.3.1
T-LYMPHOZYTEN
(LAK)
.
28
2.3.2
HUMANE
TUMORZELL-LINIEN
.
29
2.3.2.1
EWING'S-SARKOM-ZELLEN
(ES)
.
29
2.3.2.2
K562-ZELLEN
.
29
2.4
DIE
IFOSFAMIDBEHANDLUNG
DER
ZELLEN
IN
VITRO
.
29
2.5
DIE
THIOLBEHANDLUNG
DER
ZELLEN
IN
VITRO
.
30
2.6
DIE
BESTIMMUNG
DES
INTRAZELLULAEREN
GLUTHATIONS
.
30
2.6.1
AUFSCHLUSS
DER
ZELLEN
UND
DERIVATISIERUNG
.
31
2.6.2
QUANTIFIZIERUNG
VON
GLUTATHIONS
DURCH
HPLC
(HIGH
PERFORMANCE
LIQUID
CHROMATOGRAPHY)
.
31
2.7
PROTEINBESTIMMUNG
NACH
LOWRY
.
32
2.8
DER
NACHWEIS
FREIER
SH-GRUPPEN
.
33
2.9
3
H-THYMIDIN-INKORPORATIONSTEST
-
PROLIFERATIONSASSAY
FUER
T-LYMPHOZYTEN
(LAK)34
2.10
KLONOGENER
WACHSTUMSTEST
.
34
2.11
ZYTOTOXIZITAETSMESSUNG
MIT
DEM
51
CR-FREISETZUNGSTEST
(YYCELL
MEDIATED
LYMPHOLYSIS
"
;
CML)
.
35
2.12
IMMUNFLUORESZENZANALYSE
UND
DURCHFLUSSZYTOMTRIE
ZUR
BESTIMMUNG
VON
ZELLOBERFLAECHENMARKEM
.
35
2.13
DIE
APPLIKATION
VON
IFOSFAMID
IN
VIVO
.
36
3
ERGEBNISSE
.
39
3.1
IN
W'FRO-UNTERSUCHUNGEN
.
39
3.1.1
IMMUNFLUORESZENZANALYSE DER
INTERLEUKIN
2-STIMULIERTEN
LYMPHOZYTEN
FUER
IN
VITRO
UNTERSUCHUNGEN
.
39
3.1.2
EINFLUSS
DER
THIOLE
DHLA,
LA
NAC
UND
LA+NAC
IN
KOMBINATION
AUF
4-OH
IFOSFAMIDBEHANDELTE
ZELLEN
(LAK/ES)
.
40
3.1.2.1
GSH-GEHALT
VON
LAK-ZELLEN
.
40
3.1.2.2
GSH-GEHALT
EINER
HUMANEN
EWING
'
S-SARKOM-ZELLLINIE
(ES)
.
42
3.1.2.3
PROLIFERATIONSKAPAZITAET
VON
LAK-ZELLEN
.
44
3.1.2.4
PROLIFERATIONSKAPAZITAET
EINER
HUMANEN
EWING'S-SARKOM-ZELLLINIE
.
45
3.1.2.5
ZYTOTOXISCHE
FUNKTION
VON
LAK-ZELLEN
.
47
3.2
IN
VIVO-UNTERSUCHUNGEN
.
50
3.2.1
VERAENDERUNGEN
DES
LYMPHOZYTAEREN
GSH-GEHALTES
DURCH
EINE
IFOSFAMIDHALTIGE
THERAPIE.
.59
3.2.2
REDUKTION
DER
LYMPHOZYTENSUBPOPULATIONSZAHLEN
DURCH
EINE
IFOSFAMIDHALTIGE
THERAPIE.
60
3.2.3
KORRELATION
ZWISCHEN
ANSPRECHEN
AUF
DIE
THERAPIE
UND
VERHALTEN
DER
INTRAZELLULAEREN
GSH-WERTE
IN
LYMPHOZYTEN
.
62
4
DISKUSSION
.
65
II
4.1
IN
V/TRO-UNTERSUCHUNGEN
.
65
4.1.1
LAK-ZELLEN
UND
EWING'S
SARKOMZELLEN
REAGIEREN
UNTERSCHIEDLICH
STARK
AUF
EINE
4-OH
IFOSFAMIDBEHANDLUNG
BEZUEGLICH
DER
GSH-DEPLETION
.
65
4.1.2
LAK-ZELLEN
UND
ES-ZELLEN
REAGIEREN
UNTERSCHIEDLICH
STARK
AUF
EINE
ANSCHLIESSENDE
THIOLBEHANDLUNG
.
67
4.1.3
DIE
VIER
THIOLBEHANDLUNGEN
MIT
DHLA,
LA,
NAC
UND
LA+NAC
IN
KOMBINATION
HABEN
EINEN
UNTERSCHIEDLICHEN
EINFLUSS
AUF
4-OH-IFOSFAMIDBEHANDELTE
ZELLEN
.
67
4.1.4
DIE
AUSWIRKUNGEN
AUF
PROLIFERATION
UND
ZELLVERMITTELTE
ZYTOTOXIZITAET
VON
LAK-ZELLEN
SIND
UNTERSCHIEDLICH
.
70
4.1.5
KLINISCHE
ASPEKTE DER
DURCHGEFUEHRTEN
IN
VITRO
UNTERSUCHUNGEN
.
74
4.2
IN
VRVO-UNTERSUCHUNGEN
.
76
4.2.
1
IN
VIVO
IFBSFAMIDBEHANDELTE
LYMPHOZYTEN
REAGIEREN
NICHT
IN
ALLEN
FAELLEN
WIE
IN
VITRO
BEHANDELTE
LYMPHOZYTEN
BEZUEGLICH
DES
GSH-SPIEGELS
.
76
4.2.2
DER
LYMPHOZYTAERE
GSH-GEHALT
KORRELIERT
NICHT
MIT
DEM
VERHALTEN
DER
ZELLZAHLEN
.
78
4.2.3
KLINISCHE
BEWERTUNG
DER
GSH-MESSUNG
AN
PATIENTEN-LYMPHOZYTEN
.
79
5
ZUSAMMENFASSUNG
.
81
6
LITERATUR
.
83
IN |
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