Vergleich des Einflusses verschiedener Aktivierungsmethoden und Kultivierungsmedien auf die Vorkernausbildung nach intrazytoplasmatischer Injektion equiner Spermien in bovine Oozyten:
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| Format: | Thesis Book |
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| Published: |
Gießen, Lahn
VVB Laufersweiler Verlag
2019
|
| Series: | Edition Scientifique
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| Online Access: | Inhaltsverzeichnis |
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
----------------------------------------------------------------------------------------------------
1
1.
EINLEITUNG
-------------------------------------------------------------------------------------------------------------
5
2.
LITERATUR----------------------------------------------------------------------------------------------------------------
7
2.1
PHYSIOLOGISCHE
GRUNDLAGEN
----------------------------------------------------------------------------------
7
2.1.1
EIZELLENTWICKLUNG
-----------------------------------------------------------------------------------------
7
2.1.2
SYNGAMIE
----------------------------------------------------------------------------------------------------
8
2.2
IN-VITRO-PRODUKTION
EQUINER
EMBRYONEN
----------------------------------------------------------------
8
2.2.1
EIZELLGEWINNUNG
-----------------------------------------------------------------------------------------
9
2.2.1.1 EIZELLGEWINNUNG VON
LEBENDEN
STUTEN
-------------------------------------------------------
9
2.2.1.2
POSTMORTALE
EIZELLGEWINNUNG
-----------------------------------------------------------------
10
2.2.1.3
KUMULUS-OOZYTEN-KOMPLEXE
------------------------------------------------------------------
11
2.2.2
IN-VITRO-MATURATION
------------------------------------------------------------------------------------
13
2.2.3
IN-VITRO-FERTILISATION
---------------------------------------------------------------------------------
15
2.2.4
IN-VITRO-KULTIVIERUNG
---------------------------------------------------------------------------------
17
2.3
ARTIFIZIELLE
AKTIVIERUNG
--------------------------------------------------------------------------------------
19
2.3.1
GRUNDLAGEN
DER
AKTIVIERUNG
-------------------------------------------------------------------------
19
2.3.2
PARTHENOGENESE
----------------------------------------------------------------------------------------
20
2.3.3
NACHWEIS
DER
MITOCHONDRIEN
IM
SPERMIENMITTELSTUECK
------------------------------------
21
2.3.4
UNTERSCHEIDUNG
ZWISCHEN
*HAPLOIDER
UND
DIPLOIDER
AKTIVIERUNG
-----------------------
22
2.3.5
MOEGLICHKEITEN
DER
ARTIFIZIELLEN
AKTIVIERUNG
----------------------------------------------------
25
2.3.5.1
ARTIFIZIELLE
AKTIVIERUNG
EQUINER
OOZYTEN
--------------------------------------------------
27
2.3.5.2
ARTIFIZIELLE
AKTIVIERUNG
BOVINER
OOZYTEN
-----------------------------------------------
28
2.3.6
MIKROTUBULAERE
VERAENDERUNGEN
IM
RAHMEN
DER
ARTIFIZIELLEN
AKTIVIERUNG
-------------
30
2.4
INTRAZYTOPLASMATISCHE
SPERMIENINJEKTION
(ICSI)
----------------------------------------------------
31
2.4.1
GESCHICHTE
DER
INTRAZYTOPLASMATISCHEN
SPERMIENINJEKTION
-------------------------------
31
2.4.2
VOR-
UND
NACHTEILE
DER
INTRAZYTOPLASMATISCHEN
SPERMIENINJEKTION
--------------------
32
2.4.3
INTRAZYTOPLASMATISCHE
SPERMIENINJEKTION
BEIM
PFERD
--------------------------------------
33
2.5
HETEROLOGE
INTRAZYTOPLASMATISCHE
SPERMIENINJEKTION
--------------------------------------------35
2.5.1
INTRAZYTOPLASMATISCHE
INJEKTION
VON
PFERDESPERMIEN
IN
BOVINE
OOZYTEN
------------
36
2.6
GLUKOSEMETABOLISMUS
DES
EMBRYOS
--------------------------------------------------------------------
36
2.6.1
PFERD
-------------------------------------------------------------------------------------------------------
36
2.6.2
RIND
--------------------------------------------------------------------------------------------------------
38
2.7
ZIELE
DES
VORLIEGENDEN
PROJEKTS
--------------------------------------------------------------------------
39
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
---------------------------------------------------------------------------------------
41
3.1
ICSI
BEIM
PFERD
---------------------------------------------------------------------------------------------
41
3.1.1
GEWINNUNG
DER
KUMULUS-OOZYTEN-KOMPLEXE
----------------------------------------------
41
1
INHALTSVERZEICHNIS
3.1.2 KLASSIFIZIERUNG
DER
KUMULUS-OOZYTEN-KOMPLEXE
------------------------
42
3.1.3
IN-VITRO-MATURATION
------------------------------------------------------------------------------------
45
3.1.4
ENTFERNEN
DER
KUMULUSZELLEN
----------------------------------------------------------------------
45
3.1.5
ICSI-SCHALE
------------------------------------------------------------------------------------------------
45
3.1.6
AUFBEREITUNG
DER
SPERMIEN
-------------------------------------------------------------------------
46
3.1.7
MIKROSKOP
UND
MIKROMANIPULATOREN
-------------------------------------------------------------
47
3.1.8
AUSWAHL
UND
MANIPULATION
DER
SPERMIEN
------------------------------------------------------
47
3.1.9 AUSWAHL
DER
EIZELLEN
FUER
DIE
ICSI
------------------------------------------------------------------
48
3.1.10
ABLAUF
DER
ICSI
----------------------------------------------------------------------------------------
48
3.1.11
IN-VITRO-KULTIVIERUNG
---------------------------------------------------------------------------------
50
3.1.12
MORPHOLOGISCHE
BEURTEILUNG
DER
EMBRYONEN
------------------------------------------------
50
3.2
DIE
HETERO
LOEGE
INTRAZYTOPLASMATISCHE
SPERMIENINJEKTION
---------------------------------------
50
3.2.1.
GEWINNUNG
DER
KUMULUS-OOZYTEN-KOMPLEXE
------------------------------------------------
51
3.2.2
BEURTEILUNG
DER
KUMULUS-OOZYTEN-KOMPLEXE
-------------------------------------------------
51
3.2.3
IN-VITRO-MATURATION
------------------------------------------------------------------------------------
53
3.2.4
ENTFERNUNG
DER
KUMULUSZELLEN
---------------------------------------------------------------------
53
3.2.5
ICSI-SCHALE
------------------------------------------------------------------------------------------------
54
3.2.6
VORBEREITUNG
DES
MITOTRACKER
GREEN
FM
----------------------------------------------------
54
3.2.7
AUFBEREITUNG
DES
SPERMAS---------------------------------------------------------------------------
54
3.2.8
MIKROSKOP
UND
MIKROMANIPULATOREN
-------------------------------------------------------------
55
3.2.9 AUSWAHL
UND
MANIPULATION
DER
SPERMIEN
------------------------------------------------------
55
3.2.10 AUSWAHL
DER
EIZELLEN
FUER
DIE
ICSI
-----------------------------------------------------------------
56
3.2.11
ABLAUF
DER
ICSI
----------------------------------------------------------------------------------------
56
3.2.12
SHAM-INJEKTION
UND
CHEMISCHE
AKTIVIERUNG
--------------------------------------------------
56
3.2.13
AKTIVIERUNG
DER
OOZYTEN
----------------------------------------------------------------------------
57
3.2.13.1
MECHANISCHE
AKTIVIERUNG
MITHILFE
DES
PIEZO-ELEMENTS
-----------------------------
57
3.2.13.2
CHEMISCHE
AKTIVIERUNG
------------------------------------------------------------------------
57
3.2.13.3
MECHANISCHE
AKTIVIERUNG
MITHILFE
DES
PIEZO-ELEMENTS
UND
ANSCHLIESSEND
CHEMISCHE
AKTIVIERUNG
------------------------------------------------------------------------------------
58
3.2.14
IN-VITRO-KULTIVIERUNG
---------------------------------------------------------------------------------
58
3.2.15
BEURTEILUNG
DER
TEILUNGSRATEN
--------------------------------------------------------------------
59
3.2.16
FAERBUNG
MIT
HOECHST
33342
ZUR
DARSTELLUNG
DER
VORKERNE
UND
POLKOERPER
--------
59
3.2.17
AUSWERTUNG
DER
FAERBUNGEN
-----------------------------------------------------------------------
59
3.2.17.1
UEBERSICHT:
AUSWERTUNG
DER
FAERBUNGEN
--------------------------------------------------
61
3.2.17.2
LEGENDE
DER
UEBERSICHT:
AUSWERTUNG
DER
FAERBUNGEN
--------------------------------
62
3.2.18
BESTIMMUNG
DER
GLUKOSEKONZENTRATION
IM
KULTIVIERUNGSMEDIUM
--------------------
63
3.3
ALLGEMEINER
VERSUCHSAUFBAU
-----------------------------------------------------------------------------
64
3.3.1
ICSI
BEIM
PFERD
-----------------------------------------------------------------------------------------
64
3.3.2
HETERELOGE
SPERMIEN
INJEKTION
---------------------------------------------------------------------
65
3.3.2.1
UEBERSICHT
DER
ICSI-GRUPPEN-------------------------------------------------------------------
65
3.3.2.2
UEBERSICHT
DER
SHAM-GRUPPEN
-----------------------------------------------------------------
66
3.3.2.3
UEBERSICHT
DER
CHEMISCH
AKTIVIERTEN
GRUPPE
----------------------------------------------
67
3.4
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
DER
ERGEBNISSE
---------------------------------------------------------------
67
2
INHALTSVERZEICHNIS
4.
ERGEBNISSE
----------------------------------------------------------------------------------------------------------
68
4.1
ERGEBNISSE
DER
ICSI
BEIM
PFERD
--------------------------------------------------------------------------
68
4.1.1
ERMITTLUNG
DER
REIFUNGS-
UND
TEILUNGSRATEN
--------------------------------------------------
68
4.2
ERGEBNISSE
DER
HETERO
LOGEN
ICSI
-------------------------------------------------------------------------
69
4.2.1
VORKERNAUSBILDUNG
NACH
HETEROLOGER
ICSI
------------------------------------------------------
69
4.2.1.1
AUSWIRKUNG
VERSCHIEDENER
GLUKOSEKONZENTRATIONEN
IM
KULTIVIERUNGSMEDIUM
AUF
DIE
VORKERNAUSBILDUNG
------------------------------------------------------------------------------
70
4.2.1.2
AUSWIRKUNG
VERSCHIEDENER
AKTIVIERUNGSMETHODEN
AUF
DIE
VORKERNAUSBILDUNG
72
4.2.2
BESTIMMUNGEN
DER
GLUKOSEKONZENTRATION
IN
DEN
UNTERSCHIEDLICHEN
KULTIVIERUNGSMEDIEN
-------------------------------------------------------------------------------------------
74
4.2.3.
TEILUNGSRATEN
IM
RAHMEN
DER
KULTIVIERUNG
---------------------------------------------------
76
5.
DISKUSSION
----------------------------------------------------------------------------------------------------------
77
5.1
REIFUNGS-
UND
TEILUNGSRATEN
DER
ICSI
BEIM
PFERD
---------------------------------------------------
77
5.1.1 REIFUNGSRATEN
NACH
ICSI
BEIM
PFERD
-------------------------------------------------------------
77
5.1.2
TEILUNGSRATEN
NACH
ICSI
BEIM
PFERD
--------------------------------------------------------------
78
5.2
ERGEBNISSE
DER
HETERO
LOGEN
ICSI
-------------------------------------------------------------------------
81
5.2.1
VORKERNAUSBILDUNG
NACH
HETEROLOGER
ICSI
------------------------------------------------------
82
5.2.1.1
AUSWIRKUNG
DER
GLUKOSEKONZENTRATION
IM
KULTIVIERUNGSMEDIUM
-----------------
82
5.2.1.2
AUSWIRKUNG
VERSCHIEDENER
AKTIVIERUNGSMETHODEN
AUF
DIE
VORKERNAUSBILDUNG
84
5.2.2
BESTIMMUNG
DER
GLUKOSEKONZENTRATION
IN
DEN
UNTERSCHIEDLICHEN
KULTIVIERUNGSMEDIEN
----------------------------------------------------------------------------------------
88
5.2.3
TEILUNGSRATEN
IM
RAHMEN
DER
KULTIVIERUNG
-----------------------------------------------------
89
6.
ZUSAMMENFASSUNG
-----------------------------------------------------------------------------------------------
92
7.
SUMMARY
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------
95
8.
VERZEICHNISSE
-----------------------------------------------------------------------------------------------------
97
8.1
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
-------------------------------------------------------------------------------------
97
8.2
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
--------------------------------------------------------------------------------------
98
8.3
TABELLENVERZEICHNIS
-----------------------------------------------------------------------------------------
99
8.4
VERZEICHNIS
DER
DIAGRAMME
------------------------------------------------------------------------------
99
8.5
LITERATURVERZEICHNIS
---------------------------------------------------------------------------------------
99
9.
ANHAENGE
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------
114
9.1
TABELLEN
-----------------------------------------------------------------------------------------------------
114
9.1.1
ERGEBNISSE
----------------------------------------------------------------------------------------------
114
9.1.2 STATISTISCHE
AUSWERTUNG:
ONE-WAY
ANOVA
-------------------------------------------------
121
9.1.3 STATISTISCHE
AUSWERTUNG:
TUKEY-TEST
-----------------------------------------------------------
124
3
INHALTSVERZEICHNIS
9.2
MEDIEN
---------------------------------------------------------------------------------------------------------
127
9.2.1
MEDIEN
FUER
DIE
IVP
-----------------------------------------------------------------------------------
127
9.2.2
MEDIEN
FUER
DIE
CHEMISCHE
AKTIVIERUNG
-------------------------------------
130
9.2.3
MEDIEN
FUER
DIE
FAERBUNG
MIT
MITOTRACKER
GREEN
FM
UND
HOECHST
33342
--------
131
9.3 GERAETE
UND
LABORMATERIALIEN
---------------------------------------------------------------------------
131
10.
EIDESSTATTLICHE
ERKLAERUNG
-----------------------------------------------------------------------------------
133
11.
DANKSAGUNGEN
-------------------------------------------------------------------------------------------------
134
4
|
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