Effekt der Phosphatidylinositol-3-Kinase-Inhibition auf charakteristische Eigenschaften mesenchymaler Stromazellen der Ratte:
Gespeichert in:
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Köln
2019
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| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
..................................................................................................................
7
1
EINLEITUNG
................................................................................................................................
9
1.1
MESENCHYMALE
STROMAZELLEN
..........................................................................................
9
1.2
EIGENSCHAFTEN
MESENCHYMALER
STROMAZELLEN
................................................................
11
1.2.1
ISOLATION,
CHARAKTERISIERUNG
UND
DIFFERENZIERUNGSPOTENTIAL
.................................
11
1.2.2
PARAKRINE
EIGENSCHAFTEN
..........................................................................................
11
1.2.3
IMMUNOLOGISCHE
EIGENSCHAFTEN
..............................................................................
16
1.3
KLINISCHE
ANWENDUNGEN
...............................................................................................
18
1.4
PHOSPHATIDYLINOSITOL-3-KINASEN
...................................................................................
20
1.4.1
AUFBAU
.....................................................................................................................
20
1.4.2
AKTIVIERUNG
UND
SUBSTRATPHOSPHORYLIERUNG
..........................................................
22
1.4.3
BIOLOGISCHE
FUNKTIONEN
...........................................................................................
22
1.5
FRAGESTELLUNG
..................................................................................................................
24
2
MATERIAL
UND
METHODEN
........................................................................................................
26
2.1
MATERIALIEN
....................................................................................................................
26
2.1.1
ANTIKOERPER
UND
ZYTOKINE
........................................................................................26
2.1.2
GERAETE
......................................................................................................................
26
2.1.3
MEDIEN
UND
CHEMIKALIEN
........................................................................................27
2.1.4
RTPCR
PRIMER
..........................................................................................................
28
2.1.5
SOFTWARE
..................................................................................................................
28
2.1.6
TIERE
.........................................................................................................................
29
2.1.7
VERBRAUCHSMATERIAL
.................................................................................................
29
2.2
METHODEN
.......................................................................................................................
29
2.2.1
ISOLATION
VON
RMSC
.................................................................................................29
2.2.2
KULTIVIERUNG
VON
RMSC
..........................................................................................30
2.2.3
ZELLPASSAGE
..............................................................................................................30
2.2.4
FACS
PHAENOTYPISIERUNG
DER
RMSC
.......................................................................
31
2.2.5
DIFFERENZIERUNGSPOTENTIAL
DER
RMSC
.....................................................................
31
2.2.6
PROLIFERATIONSMESSUNG
DER
RMSC
..........................................................................
34
2.2.7
BESTIMMUNG
DER
ZYTOKINSEKRETION
........................................................................
35
2.2.8
BESTIMMUNG
DER
ZYTOKINEXPRESSION
MITTELS
RTPCR
..............................................
37
2.2.9
VERSUCHE
ZUR
IMMUNMODULATION
DER
RMSC
.........................................................
38
2.2.10
VERSUCHE
ZU
ANTIAPOPTOTISCHEN
EFFEKTEN
DER
RMSC
..............................................
40
2.2.11
STATISTIK
....................................................................................................................
40
3
ERGEBNISSE
.............................................................................................................................
42
5
3.1
KULTURBEDINGUNGEN
UND
PASSAGE
DER
RMSC
................................................................. 42
3.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
RMSC
........................................................................................
43
3.2.1
IDENTIFIZIERUNG
VON
OBERFLAECHENANTIGENEN
MITTELS
FACS-ANALYSE
......................
43
3.2.2
DIFFERENZIERUNGSPOTENTIAL
DER
RMSC
......................................................................
45
3.3
ZELLPROLIFERATION
............................................................................................................
47
3.4
ZYTOKINSEKRETION
.............................................................................................................
47
3.5
ZYTOKINEXPRESSION
.........................................................................................................
50
3.6
IMMUNMODULATION
.........................................................................................................
52
3.6.1
REINHEITSMESSUNG
DER
CD8
+
T-LYMPHOZYTEN
.......................................................
52
3.6.2
IMMUNMODULATION
...................................................................................................
53
3.6.3
KOKULTUR
VON
RMSC
MIT
CD8
+
T-LYMPHOZYTEN
...................................................
53
3.6.4
ZYTOKINSEKRETION
DER
RMSC
UNTER
IL2-EINFLUSS
....................................................
55
3.7
ANTIAPOPTOTISCHE
EFFEKTE
..............................................................................................
57
4
DISKUSSION
..............................................................................................................................
59
4.1
ZELLISOLATION,
KULTUR
UND
CHARAKTERISIERUNG
DER
RMSC
............................................... 59
4.2
ZELLPROLIFERATION
............................................................................................................
60
4.3
ZYTOKINSEKRETION
............................................................................................................
61
4.4
ZYTOKINEXPRESSION
.........................................................................................................
63
4.5
IMMUNMODULATION
.........................................................................................................
64
4.6
ANTIAPOPTOTISCHE
EFFEKTE
...............................................................................................66
5
ZUSAMMENFASSUNG
.................................................................................................................
68
6
LITERATURVERZEICHNIS
...............................................................................................................
69
7
ANHANG
...................................................................................................................................
82
7.1
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
..................................................................................................
82
7.2
TABELLENVERZEICHNIS
........................................................................................................
83
7.3
ROHDATEN
DER
RTPCR-EXPERIMENTE
................................................................................
84
8
LEBENSLAUF
..............................................................................................................................
85
6
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