Expression und Modulation der Oberflächenrezeptoren für Tumor Nekrose Faktor alpha auf neoplastischen B-Lymphozyten der chronischen lymphatischen Leukämie:
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1994
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INHALTSVERZEICHNIS
I. EINLEITUNG.1
1.1 ALLGEMEINE EINFUEHRUNG UND ERLAEUTERUNG DER FRAGESTELLUNG.1
1.2 BESPRECHUNG DER BISHERIGEN LITERATUR.3
1.2.1 TUMOR NEKROSE FAKTOR-A.3
1.2.1.1 GESCHICHTE VON TNF-A.3
1.2.1.2 STRUKTUR UND BIOSYNTHESE VON TNF-A. 4
1.2.1.3 BIOLOGISCHE WIRKUNGEN VON TNF-A.5
1.2.1.4 REZEPTOREN FUER TNF-A.6
1.2.2 CHRONISCHE LYMPHATISCHE LEUKAEMIE.7
1.2.2.1 IMMUNOLOGISCHE CHARAKTERISTIKEN.8
1.2.2.2 ZELLDIFFERENZIERUNG.9
1.2.2.3 IMMUNFUNKTION DER B-CLL ZELLEN.9
/ I.2.2.4 STADIENEINTEILUNG UND PROGNOSTISCHE FAKTOREN.9
1.2.2.5 THERAPIEANSAETZE BEI DER CLL.10
II. MATERIALIEN UND METHODEN.12
II. 1 MEDIEN, LOESUNGEN UND REAGENTIEN.12
11.2 ZYTOKINE UND FAKTOREN.15
11.3 ANTIKOERPER.16
11.4 PATIENTEN UND ZELLMATERIAL.17
11.5 ZELLSEPARATION UNDZELLKULTIVIERUNG. 17
11.5.1 GEWINNUNG DER MONONUKLEAEREN ZELLPOPULATION (MNZ).17
11.5.2 ZELLZAEHLUNG.19
11.5.3 ENTFERNUNG DER MAKROPHAGEN.19
11.5.4 ABTRENNEN DER T-LYMPHOZYTEN.19
11.5.5 ZELLKULTIVIERUNG.20
11.6 IMMUNOLOGISCHE PHAENOTYPISIERUNG.20
11.7 EINFRIEREN UND AUFTAUEN VON ZELLEN.21
11.8 RADIOAKTIVE MARKIERUNG VON RTNF-A MIT NA
125J.21
11.8.1 DURCHFUEHRUNG DER MARKIERUNG.22
11.9 BESTIMMUNG DER MAXIMALEN BINDUNGSKAPAZITAET UND DER SPEZIFISCHEN
RADIOAK
TIVITAET VON
125J-RTNF-A.23
11.9.1 MAXIMALE BINDUNGSKAPAZITAET (B^J.24
11.9.2 SPEZIFISCHE RADIOAKTIVITAET.25
II. 10 REZEPTORBINDUNGSASSAY FUER
123J-RTNF-A.27
II. 11 KINETIKEN DER TNF-REZEPTOREXPRESSION.28
11.12 INTEMALISATION UND DEGRADIERUNG DES REZEPTOR-RTNF-A KOMPLEXES.28
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/943170303
11.13 ENTFERNEN VON REZEPTORGEBUNDENEM RTNF-A.
II. 14 MESSUNG DER DNA-SYNTHESE.
II. 15 MESSUNG DER PROTEINSYNTHESE.
II. 16 AUTORADIOGRAPHIE.
II. 17 NORTHERN BLOT ANALYSEN.
III. DARSTELLUNG DER EIGENEN UNTERSUCHUNGEN.
111 1 EXPRESSION V
" REZEPTOREN FUER RTNF-A AUF ANGEREICHERTEN NEOPLASTISCHEN B-
CLL ZELLEN.
III. 1.1 AUSSCHLUSS EINER ZWEITEN REZEPTORPOPULATION.
III. 1.2 ZEITVERLAUF DER TNF-REZEPTOREXPRESSION WAEHREND DER ERSTEN 24
STUNDEN BEI
INKUBATION IN VITRO.
III. 1.3 EINFLUSS DER PROTEINSYNTHESEHENTMUNG MIT CYCLOHEXITRTIDE AUF DIE
TNF-.
REZEPTORNEUEXPRESSION.
111.2 CHARAKTERISTIKEN DER "J-RTNF-A BINDUNG AN DEN B-CLL ZDLENLZZII 36
HI
2-1 TEMPERATURABHAENGIGKEIT DER BINDUNG.
111.2-2 REZEPTORHALBWERTSZEIT.
I1I.2.3 INTEMALISATION UND DEGRADIERUNG DES "J-RTNF-A-REZEPTOR
KOMPLEXES.
.3 AUSSCHLUSS MOEGLICHER URSACHEN FUER DAS FEHLEN VON TNF-REZEPTOREN AUF
DEN
FRISCH SEPARIERTEN NEOPLASTISCHEN B-CLL ZELLEN
111.3.1 EINFLUSS DES ANTIKOAGULANS.
111.3.2 EINFLUSS DER ZELL SEPARATION.
111.3.3 AUSSCHLUSS EINER REZEPTORMASKIERUNG DURCH IN VIVO PRODUZIERTES
TNF.
40
USSCHLUSS EINER AKTIVIERUNG DER NEOPLASTISCHEN B-CLL ZELLEN BEI
KULTIVIERUNG
UNTER STANDARDBEDINGUNGEN.
III.4.1 MESSUNG DER DNA-SYNTHESE.
M*4-2 MESSUNG DER PROTEINSYNTHESE. .
II 1.4.3 EXPRESSION VON PROTOONKOGENEN.
M.5 MODULATION DER TNF-REZEPTOREN UNTER DEM EINFLUSS VERS'CH^DE'NER
S'UTETANZ^N
UND ZYTOKINE.
!!!{'
PIN"U EMER AK,IVIERU"S POLYKLONALER ANTI-P ANTU^Z.Z.ZZZ'43
HI.5.2 EINFLUSS VON KORTIKOSTEROIDEN.
111.5.3 EINFLUSS VON PATIENTENEIGENSERUM ^
111.5.4 EINFLUSS VON ZYTOKINEN. .
111.5.4.1 RLNTERFERON-A UND RLNTERFERON-Y. .
.
111.5.4.2 RLNTERLEUKINE.
4**
111.5.4.3 RTNF-A.
49
.29
.29
.30
.30
.30
.32
.32
.34
.34
.35
.36
.37
.38
.39
.39
.39
.42
.42
.42
.42
YYI
6 I W H WACHSTUMSVERHALTEN NEOPLASTISCHER B-CLL ZELLEN 50
HI 6*
1 WACHSTUMSVERHALTEN DER NEOPLASTISCHEN B-CLL ZELLEN IR
GAEBE VON ZYTOKINEN.
.50
IN VITRO OHNE HINZU-
111.6.2 DOSISABHAENGIGE PROLIFERATION DER NEOPLASTISCHEN B-CLL ZELLEN AUF
RTNF-A.52
111.6.3 AENDERUNG VON ZELLZAHL UND ZELLMORPHOLOGIE UNTER RTNF-A
INDUZIERTER PROLI
FERATION .52
IV. DISKUSSION.57
V. ZUSAMMENFASSUNG. 63
V. L VERWENDETE ABKUERZUNGEN.64
VI. LITERATURVERZEICHNIS. 65
VII. DANKSAGUNGEN.83
VIII. LEBENSLAUF.84 |
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