Herstellung und Charakterisierung humaner scFv-Antikörperfragmente gegen Helicobacter pylori mittels Phage Display:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
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2002
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
1
ZUSAMMENFASSUNG
3
1
EINLEITUNG
5
1.1
DIE
BEDEUTUNG
VON
HELICOBACTER
PYLORI
FUER
DIE
CHRONISCHE
GASTRITIS
.
5
1.2
HELICOBACTER
PYLORI
UND
BAKTERIELLE
VIRULENZFAKTOREN
.
5
1.2.1
VACA
.
6
1.2.2
CAGA
.
7
1.2.3
UREASE
.
8
1.3
DIE
WIRTSREAKTION
BEI
DER
H.
PYLORI-GASTRITIS
.
9
1.4
REKOMBINANTE
ANTIKOERPER
.
9
1.5
DIE
METHODE
DES
PHAGE
DISPLAY
.
11
1.5.1
PHAGEMID-VEKTOREN
.
12
1.5.2
FILAMENTOESE
BAKTERIOPHAGEN
.
13
1.5.3
AFFINITAETSSELEKTION
(PANNING)
.
14
1.6
ZIELE
DIESER
ARBEIT
.
15
2
MATERIAL
UND
METHODEN
16
2.1
MATERIAL
.
16
2.1.1
CHEMIKALIEN
.
16
2.1.2
NAEHRMEDIEN
FUER
BAKTERIEN
.
16
2.1.3
ANTIKOERPER
UND
ENZYME
.
16
2.1.4
VEKTOREN
UND
PRIMER
.
17
2.1.5
BAKTERIEN
UND
BAKTERIOPHAGEN
.
20
2.1.6
PROTEINE
UND
BAKTERIENLYSATE
.21
2.1.7
PATIENTEN
.21
2.2
METHODEN
.
21
2.2.1
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
.
21
2.2.2
ARBEITEN
MIT
BAKTERIEN
UND
BAKTERIOPHAGEN
.
28
2.2.3
BIOCHEMISCHE
METHODEN
.
34
3
ERGEBNISSE
40
3.1
HERSTELLUNG
EINER
IMMUNEN
PHAGE
DISPLAY
LIBRARY
HUMANER
SINGLE-CHAIN
FV
(SCFV)
ANTIKOERPERFRAGMENTE
.
40
3.1.1
AMPLIFIKATION
HUMANER
V-GENE
UND
ANFIIGEN
VON
SCHNITTSTELLEN
.
40
3.1.2
KLONIERUNG
EINER
CDNA-BANK
HUMANER
V-GENE
.
41
3.2
ISOLIERUNG
UND
CHARAKTERISIERUNG
VON
ANTIKOERPERFRAGMENTEN
GEGEN
H.
PYLORI
ANTIGENE
.
42
3.2.1
PANNING
MIT
H.
PYLORI-LYSAT
.
43
3.2.2
PANNING
MIT
H.
PYLORI-UREASE
.
45
3.2.3
ISOLIERUNG
MONOKLONALER
SCFV-PHAGEN
.
45
3.2.4
CHARAKTERISIERUNG
MONOKLONALER
ANTI-H.
PYLORI
SCFV'S
.
47
3.3
SEQUENZANALYSE
MONOKLONALER
SCFV'S
.
51
4
DISKUSSION
54
4.1
REKOMBINANTE
ANTIKOERPER
ZUR
UNTERSUCHUNG
DER
HUMORALEN
IMMUNANTWORT
BEI
DER
H.
PYLORI
INFEKTION
.
54
4.2
GENBIBLIOTHEKEN
HUMANER
V-GENE
UND
PHAGE
DISPLAY
.
56
4.3
AUSBLICK
.
59
LITERATURVERZEICHNIS
62
ABKUERZUNGEN
70
LEBENSLAUF
72
DANKSAGUNG
73 |
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