Effekt von S-Lost in HaCaT-Zellkulturen: Induktion der Apoptose und Effekt eines PARP-Inhibitors
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2008
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| adam_text | Titel: Effekt von S-Lost in HaCaT-Zellkulturen
Autor: Raithel, Kerstin
Jahr: 2008
1 einleitung 3
1.1 Schwefellost 3
1.1.1 Entdeckung und Bezeichnung 3
1.1.2 Risiken durch Schwefellost 4
1.1.3 Physikalisch-chemische Eigenschaften 5
1.1.4 Klinik der Hautschäden 6
1.1.5 Wirkmechanismus 8
1.2 Formen des Zelltodes 9
1.3 poly-adp-ribose polymerase 11
1.3.1 funktion 11
1.3.2 PARP-Hypothese 13
1.3.3 Klinische Bedeutung 13
1.4 Ziel und Fragestellung 14
2 MATERIAL UND METHODEN 15
2.1 Material 15
2.1.1 Hacat-zellkulturen 15
2.1.2 dichlordiethylsulf1d 15
2.1.3 Aminobenzamid 16
2.1.4. Geräte und Arbeitsmaterialien 17
2.1.5. Software 18
2.1.6. Chemikalien und Substanzen 19
2.2 methoden 26
2.2.1 herstellung der schwefellost-verdunnung 26
2.2.2 Zellzahlbestimmung 26
2.2.3 Kultivierung von HaCaT-Zellen 26
2.2.4 Fluoreszenzmikroskopische Untersuchungen 27
2.2.4.1 Bestimmung des Mitoseindex 27
2.2.4.2 Bestimmung der Apoptoserate 27
2.2.5 zell vitalitätstest 29
2.2.6 prol1ferationstest 30
2.2.7 Bestimmuno des ATP-Gehalts 31
2.2.8 Bestimmung des Proteingehalts 32
2.2.9nachweish1stonassoz1erterdns 32
2.2.10 SDS-PAGE und Westernblot 34
2.3 Statistik 37
1
3 ergebnisse 3*
3.1 Wirkung von Schwefellost auf Apoptose- und Mitoserate von HaCaT-Zellen 38
3.2 Wirkung von Schwefellost auf die Apoptoserate von HaCaT-Zellen 41
3.3 Wirkung von Schwefellost auf die Vitalität von HaCaT-Zellen unter Einsatz eines PARP-
inh1bitors 43
3.4 Wirkung von Schwefellost auf die Proliferation von HaCaT-Zellen unter Einsatz eines
PARP-Inhibitors 45
3.5 Vergleich desXTT-Assays mit dem BrdU-ELISA 47
3.6 Wirkung von Schwefellost auf ATP-Gehalt von HaCaT-Zellen unter Einsatz eines PARP-
Inhibitors 50
3.7 Wirkung von Schwefellost auf Apoptose-Nekrose-Sequenz von HaCaT-Zellen unter Einsatz
EINES PARP-lNHIBrTORS — 52
3.8 Wirkung von Schwefellost auf PARP-Abbau in HaCaT-Zellen unter Einsatz eines PARP-
Inhibitors 56
4 diskussion 58
4.1 Zusammenschau der Untersuchungen an HaCaT-Zellen 58
4.2 Medizinische und therapeutische Aspekte 64
5 ZUSAMMENFASSUNG 65
6 ABKÜRZUNGSVERZEICHNIS 67
7 LITERATUR 70
2
|
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Titel: Effekt von S-Lost in HaCaT-Zellkulturen
Autor: Raithel, Kerstin
Jahr: 2008
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1.1.1 Entdeckung und Bezeichnung 3
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3.1 Wirkung von Schwefellost auf Apoptose- und Mitoserate von HaCaT-Zellen 38
3.2 Wirkung von Schwefellost auf die Apoptoserate von HaCaT-Zellen 41
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3.6 Wirkung von Schwefellost auf ATP-Gehalt von HaCaT-Zellen unter Einsatz eines PARP-
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3.7 Wirkung von Schwefellost auf Apoptose-Nekrose-Sequenz von HaCaT-Zellen unter Einsatz
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3.8 Wirkung von Schwefellost auf PARP-Abbau in HaCaT-Zellen unter Einsatz eines PARP-
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4 diskussion 58
4.1 Zusammenschau der Untersuchungen an HaCaT-Zellen 58
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