Einfluss von postprandialen Lipoproteinen auf die Adhäsionsmolekülexpression durch Endothelzellen: Abhängigkeit von Art und Erhitzungsgrad des Nahrungsfettes
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2004
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Inhaltsverzeichnis
Seite
Abkürzungsverzeichnis IV
Verzeichnis der Tabellen V
Verzeichnis der Abbildungen V
1 Einleitung und Zielsetzung 1
1.1 Pathogenese der Arteriosklerose I
1.2 Risikofaktoren der Arteriosklerose unter besonderer Berücksichtigung
postprandialer Lipoproteine 3
1.3 Adhäsionsmoleküle 7
1.4 Einfluss von oxidierten LDLauf die Adhäsionsmolekülexpression 8
1.5 Einfluss von postprandialen Lipoproteinen auf die Endothelzellfunktion unter
besonderer Berücksichtigung der Adhäsionsmolekülexpression 10
1.6 Einfluss von Fettsäuren auf die Adhäsionsmolekülexpression 12
1.7 Zielsetzung 15
2 Methodik 16
2.1 Probanden und Versuchsmahlzeiten 16
2.1.1 Probanden 16
2.1.2 Versuchsmahlzeiten 16
2.2 Isolierung und Züchtung von Endothelzellen aus humaner Nabelschnur 18
2.2.1 Materialien 18
2.2.2 Methodik 20
2.3 Chylomikronengewinnung 21
2.3.1 Materialien 21
2.3.2 Gewinnung 21
2.4 Chylomikronenoxidation 22
2.4.1 Materialien 22
2.4.2 Methode 22
2.5 Inkubation der Zellen mit den Chylomikrönen 23
2.6 Adhäsionsmolekülassay 25
2.6.1 Materialien 25
2.6.2 Ansetzen der Lösungen 25
2.6.3 Nachweis von E-Selectin 26
2.6.4 Versuchsprotokoll 26
2.7 Statistik 27
3 Ergebnisse 28
3.1 Vorversuch: Oxidationsnachweis der Öle in Abhängigkeit von Stärke und
Dauer der Erhitzung 28
3.2 Oxidierbarkeit der Chylomikronen nach Kupferinkubation und Dialyse 28
3.3 Tests der Kontrollen: Stimulation der Adhäsionsmolekülexpression von
HUVEC durch TNFa und direkt zugefügtem CuSO4 31
3.4 Einfluss von Chylomikronen auf die Adhäsionsmolekülexpression durch
HUVEC 32
3.4.1 Einfluss von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin nach
Aufnahme von Olivenöl 32
3.4.2 Einfluss von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin nach
Aufnahme von nativem Distelöl 33
3.4.3 Einfluss von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin nach
Aufnahme von erhitztem Distelöl (3 Stunden bei 100°C) 34
3.4.4 Einfluss von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin nach
Aufnahme von stark erhitztem Distelöl (3 Stunden bei 240 °C) 35
3.4.5 Einfluss des Oxidationszustandes von Chylomikronen auf die Expression
von E-Selectin: Zusammenfassung aller Öle 36
3.5 Vergleich des Einflusses von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin
nach Aufnahme von unerhitztem Distelöl und Olivenöl 37
3.6 Vergleich des Einflusses von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin
nach Aufnahme von unterschiedlich stark erhitztem Distelöl 38
3.7 Einfluss der Dialyse auf die Expression von E-Selectin 40
4 Diskussion 41
4.1 Oxidationszustand der Chylomikronen 42
4.1.1 Auswirkungen der Testmahlzeiten auf den Oxidationszustand der nativen
Chylomikronen 42
4.1.2 Veränderung der Konzentration an konjugierten Dienen durch die in-vitro-
Oxidation 44
4.2 Einfluss der m-vi/ro-Oxidation auf die Adhäsionsmolekülexpression von
Chylomikronen 46
4.3 Vergleich der Auswirkungen der Chylomikronen auf die Adhäsionsmolekül¬
expression nach Aufnahme von Olivenöl und nativem Distelöl 48
4.4 Vergleich der Auswirkungen der Chylomikronen auf die Adhäsionsmolekül-
expression nach Aufnahme von unterschiedlich stark erhitztem Distelöl 50
4.5 Beeinflussung der Adhäsionsmolekülexpression durch postprandiale
Lipoproteine und deren Komponenten 51
4.6 Zytotoxische Effekte stark oxidierter Lipoproteine 54
4.7 Einfluss von Komplement auf die Adhäsionsmolekülexpression 56
4.8 Einfluss der Dialyse auf die Adhäsionsmolekülexpression von HUVEC 58
m
5 Zusammenfassung 60
6 Literaturverzeichnis 62
7 Danksagung 73
8 Curriculum Vitae 74
V
Verzeichnis der Tabellen
Tab. 1: Energie- und Nährstoffzusammensetzung der Versuchskost 17
Tab. 2: Übersicht über die eingesetzten Dialyseansätze 23
Tab. 3: Übersicht über die unterschiedlichen Versuchsansätze 24
Verzeichnis der Abbildungen
Abb. 1: Einfluss der Erhitzung von Homilla Distelöl auf die Konzentration von
konjugierten Dienen 28
Abb. 2: Vergleich des Oxidationszustandes der nativen Chylomikronen in absoluten
Dienekonzentrationen (MW+SEM; n = 9; *: p 0,05) 29
Abb. 3: Vergleich des Oxidationszustandes der Chylomikronen nach m-vjfra-Oxidation
mit CUSO4 anhand der Konzentrationsveränderung der konjugierten Diene (n = 9;
*: p = 0,05 Distelöl 100 °C vs. Olivenöl; a: p = 0,01 vs. andere Oxidationsstufen)..,30
Abb. 4: Stimulation der E-Selectin-Expression durch TNFoc im Vergleich mit dem
Basalwert und verschiedenen nicht oxidierten Chylomikronen (MW+SEM, 100 %
= MW des Basalwertes; ***:p 0,001) 31
Abb. 5: Einfluss von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin bei HUVECs nach
Aufnahme von nativem Olivenöl (MW+SEM, 100 % = MW des Basalwertes; *: p
0,05) 32
Abb. 6: Einfluss von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin bei HUVECs nach
Aufnahme von nativem Distelöl (MW+SEM, 100 % = MW des Basalwertes ;* p
0,05; direkt über der Säule: avs. bb: p 0,01) 33
Abb. 7: Einfluss von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin bei HUVECs nach
Aufnahme von erhitztem Distelöl (3 h, 100°C) (MW±SEM; 100 % = MW des
Basalwertes ; *: = p 0,05; a vs. b: p 0,05) 34
Abb. 8: Einfluss von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin bei HUVECs nach
Aufnahme von stark erhitztem Distelöl (3 h, 240°C) (MW+SEM, 100 % = MW
des Basalwertes; *: p 0,05 vs. basal) 35
Abb. 9: Einfluss von Chylomikronen auf die E-Selectin-Expression: Zusammenfassung
aller Öle (MW+SEM, 100 % = MW des Basalwertes; *: p 0,05, **: p 0,01,
***: p 0,001; a vs. b: p 0,05; a vs. bb: p 0,01; a vs. bbb: p 0,001) 36
Abb. 10: Vergleich des Einflusses von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin
in Abhängigkeit vom Oxidationszustand nach Aufnahme verschiedener nicht
erhitzter Öle (MW±SEM, 100 % = MW des Basalwertes) 37
Abb. 11: Vergleich des Einflusses von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin
nach Aufnahme von unterschiedlich hoch erhitztem Distelöl in Abhängigkeit vom
Oxidationszustand (MW + SEM, 100 % = MW des Basalwertes) 38
VI
Abb. 12: Einfluss der Dialyse auf die Expression von E-Selectin bei nicht oxidierten und
oxidierten Chylomikronen (MW+SEM, 100 % = MW des Basalwertes ; *: p
0,05, **: p 0,01; über der Säule a vs. b: p 0,05) 40
Abb. 13: Vergleich der Expression von E-Selectin nach Inkubation mit oxidierten
Chylomikronen, gewonnen nach Verzehr von Distelöl oder Olivenöl, zwischen der
vorliegenden Arbeit und Moers et al. (1997) 48
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I
Inhaltsverzeichnis
Seite
Abkürzungsverzeichnis IV
Verzeichnis der Tabellen V
Verzeichnis der Abbildungen V
1 Einleitung und Zielsetzung 1
1.1 Pathogenese der Arteriosklerose I
1.2 Risikofaktoren der Arteriosklerose unter besonderer Berücksichtigung
postprandialer Lipoproteine 3
1.3 Adhäsionsmoleküle 7
1.4 Einfluss von oxidierten LDLauf die Adhäsionsmolekülexpression 8
1.5 Einfluss von postprandialen Lipoproteinen auf die Endothelzellfunktion unter
besonderer Berücksichtigung der Adhäsionsmolekülexpression 10
1.6 Einfluss von Fettsäuren auf die Adhäsionsmolekülexpression 12
1.7 Zielsetzung 15
2 Methodik 16
2.1 Probanden und Versuchsmahlzeiten 16
2.1.1 Probanden 16
2.1.2 Versuchsmahlzeiten 16
2.2 Isolierung und Züchtung von Endothelzellen aus humaner Nabelschnur 18
2.2.1 Materialien 18
2.2.2 Methodik 20
2.3 Chylomikronengewinnung 21
2.3.1 Materialien 21
2.3.2 Gewinnung 21
2.4 Chylomikronenoxidation 22
2.4.1 Materialien 22
2.4.2 Methode 22
2.5 Inkubation der Zellen mit den Chylomikrönen 23
2.6 Adhäsionsmolekülassay 25
2.6.1 Materialien 25
2.6.2 Ansetzen der Lösungen 25
2.6.3 Nachweis von E-Selectin 26
2.6.4 Versuchsprotokoll 26
2.7 Statistik 27
3 Ergebnisse 28
3.1 Vorversuch: Oxidationsnachweis der Öle in Abhängigkeit von Stärke und
Dauer der Erhitzung 28
3.2 Oxidierbarkeit der Chylomikronen nach Kupferinkubation und Dialyse 28
3.3 Tests der Kontrollen: Stimulation der Adhäsionsmolekülexpression von
HUVEC durch TNFa und direkt zugefügtem CuSO4 31
3.4 Einfluss von Chylomikronen auf die Adhäsionsmolekülexpression durch
HUVEC 32
3.4.1 Einfluss von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin nach
Aufnahme von Olivenöl 32
3.4.2 Einfluss von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin nach
Aufnahme von nativem Distelöl 33
3.4.3 Einfluss von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin nach
Aufnahme von erhitztem Distelöl (3 Stunden bei 100°C) 34
3.4.4 Einfluss von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin nach
Aufnahme von stark erhitztem Distelöl (3 Stunden bei 240 °C) 35
3.4.5 Einfluss des Oxidationszustandes von Chylomikronen auf die Expression
von E-Selectin: Zusammenfassung aller Öle 36
3.5 Vergleich des Einflusses von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin
nach Aufnahme von unerhitztem Distelöl und Olivenöl 37
3.6 Vergleich des Einflusses von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin
nach Aufnahme von unterschiedlich stark erhitztem Distelöl 38
3.7 Einfluss der Dialyse auf die Expression von E-Selectin 40
4 Diskussion 41
4.1 Oxidationszustand der Chylomikronen 42
4.1.1 Auswirkungen der Testmahlzeiten auf den Oxidationszustand der nativen
Chylomikronen 42
4.1.2 Veränderung der Konzentration an konjugierten Dienen durch die in-vitro-
Oxidation 44
4.2 Einfluss der m-vi/ro-Oxidation auf die Adhäsionsmolekülexpression von
Chylomikronen 46
4.3 Vergleich der Auswirkungen der Chylomikronen auf die Adhäsionsmolekül¬
expression nach Aufnahme von Olivenöl und nativem Distelöl 48
4.4 Vergleich der Auswirkungen der Chylomikronen auf die Adhäsionsmolekül-
expression nach Aufnahme von unterschiedlich stark erhitztem Distelöl 50
4.5 Beeinflussung der Adhäsionsmolekülexpression durch postprandiale
Lipoproteine und deren Komponenten 51
4.6 Zytotoxische Effekte stark oxidierter Lipoproteine 54
4.7 Einfluss von Komplement auf die Adhäsionsmolekülexpression 56
4.8 Einfluss der Dialyse auf die Adhäsionsmolekülexpression von HUVEC 58
m
5 Zusammenfassung 60
6 Literaturverzeichnis 62
7 Danksagung 73
8 Curriculum Vitae 74
V
Verzeichnis der Tabellen
Tab. 1: Energie- und Nährstoffzusammensetzung der Versuchskost 17
Tab. 2: Übersicht über die eingesetzten Dialyseansätze 23
Tab. 3: Übersicht über die unterschiedlichen Versuchsansätze 24
Verzeichnis der Abbildungen
Abb. 1: Einfluss der Erhitzung von Homilla Distelöl auf die Konzentration von
konjugierten Dienen 28
Abb. 2: Vergleich des Oxidationszustandes der nativen Chylomikronen in absoluten
Dienekonzentrationen (MW+SEM; n = 9; *: p 0,05) 29
Abb. 3: Vergleich des Oxidationszustandes der Chylomikronen nach m-vjfra-Oxidation
mit CUSO4 anhand der Konzentrationsveränderung der konjugierten Diene (n = 9;
*: p = 0,05 Distelöl 100 °C vs. Olivenöl; a: p = 0,01 vs. andere Oxidationsstufen).,30
Abb. 4: Stimulation der E-Selectin-Expression durch TNFoc im Vergleich mit dem
Basalwert und verschiedenen nicht oxidierten Chylomikronen (MW+SEM, 100 %
= MW des Basalwertes; ***:p 0,001) 31
Abb. 5: Einfluss von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin bei HUVECs nach
Aufnahme von nativem Olivenöl (MW+SEM, 100 % = MW des Basalwertes; *: p
0,05) 32
Abb. 6: Einfluss von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin bei HUVECs nach
Aufnahme von nativem Distelöl (MW+SEM, 100 % = MW des Basalwertes ;* p
0,05; direkt über der Säule: avs. bb: p 0,01) 33
Abb. 7: Einfluss von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin bei HUVECs nach
Aufnahme von erhitztem Distelöl (3 h, 100°C) (MW±SEM; 100 % = MW des
Basalwertes ; *: = p 0,05; a vs. b: p 0,05) 34
Abb. 8: Einfluss von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin bei HUVECs nach
Aufnahme von stark erhitztem Distelöl (3 h, 240°C) (MW+SEM, 100 % = MW
des Basalwertes; *: p 0,05 vs. basal) 35
Abb. 9: Einfluss von Chylomikronen auf die E-Selectin-Expression: Zusammenfassung
aller Öle (MW+SEM, 100 % = MW des Basalwertes; *: p 0,05, **: p 0,01,
***: p 0,001; a vs. b: p 0,05; a vs. bb: p 0,01; a vs. bbb: p 0,001) 36
Abb. 10: Vergleich des Einflusses von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin
in Abhängigkeit vom Oxidationszustand nach Aufnahme verschiedener nicht
erhitzter Öle (MW±SEM, 100 % = MW des Basalwertes) 37
Abb. 11: Vergleich des Einflusses von Chylomikronen auf die Expression von E-Selectin
nach Aufnahme von unterschiedlich hoch erhitztem Distelöl in Abhängigkeit vom
Oxidationszustand (MW + SEM, 100 % = MW des Basalwertes) 38
VI
Abb. 12: Einfluss der Dialyse auf die Expression von E-Selectin bei nicht oxidierten und
oxidierten Chylomikronen (MW+SEM, 100 % = MW des Basalwertes ; *: p
0,05, **: p 0,01; über der Säule a vs. b: p 0,05) 40
Abb. 13: Vergleich der Expression von E-Selectin nach Inkubation mit oxidierten
Chylomikronen, gewonnen nach Verzehr von Distelöl oder Olivenöl, zwischen der
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spelling | Pieke, Oliver 1974- Verfasser (DE-588)129227137 aut Einfluss von postprandialen Lipoproteinen auf die Adhäsionsmolekülexpression durch Endothelzellen Abhängigkeit von Art und Erhitzungsgrad des Nahrungsfettes vorgelegt von Oliver Pieke 2004 VI, 74 Bl. graph. Darst. txt rdacontent h rdamedia he rdacarrier Kiel, Univ., Diss., 2004 Mikroform-Ausgabe 2004 1 Mikrofiche : 24x Mikrofiche-Ausg.: [Mikrofiche-Ausg.] Signatur des reproduzierten Kulturobjekts: DBL_x001C_2004 MF 621 Signatur des reproduzierten Kulturobjekts: DBF_x001C_2004 MF 566 s2004 (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Reproduktion von Pieke, Oliver, 1974- Einfluss von postprandialen Lipoproteinen auf die Adhäsionsmolekülexpression durch Endothelzellen 2004 HBZ Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=014190217&sequence=000002&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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