Erforschung der Modulation zellulärer Stressresistenz mittels Präkonditionierung in C. elegans:
Gespeichert in:
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
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Veröffentlicht: |
Köln
[2019]
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adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
5
INHALTSVERZEICHNIS
1.
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
......................................................................
7
2.
EINLEITUNG
..................................................................................................................................
9
2.1.
RENALE
(PATHO-)
PHYSIOLOGIE
............................................................................................
9
2.1.1.
FUNKTION
DER
NIERE
..................................................................................................
9
2.1.2.
AKUTES
NIERENVERSAGEN
...........................................................................................
9
2.2.
CAENORHABDITIS
ELEGANS
ALS
MODELLORGANISMUS
............................................................
11
2.3.
LANGLEBIGKEIT
UND
PRAEKONDITIONIERUNG
..........................................................................
13
2.3.1.
SIGNALWEGE
IN
DER
REGULATION
VON
LEBENSSPANNE
UND
STRESSRESISTENZ
...............
14
2.4.
FRAGESTELLUNG
..................................................................................................................
24
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
.......................................................................................................
25
3.1.
MATERIAL
..........................................................................................................................
25
3.1.1.
LOESUNGEN
UND
PUFFER
.............................................................................................
25
3.1.2.
ANTIKOERPER
..............................................................................................................
26
3.1.3.
REAGENZIEN
.............................................................................................................
27
3.1.4.
GERAETE
.....................................................................................................................
30
3.1.5.
VERBRAUCHSMATERIALIEN
..........................................................................................
31
3.1.6.
PRIMER
.....................................................................................................................
33
3.1.7.
RNAI
KONSTRUKTE
....................................................................................................
33
3.1.8.
STAEMME
..................................................................................................................
33
3.1.9.
SOFTWARE
.................................................................................................................
35
3.2.
METHODEN
.......................................................................................................................
36
3.2.1.
AGARPLATTEN
GIESSEN
................................................................................................
36
3.2.2.
WESTERN
BLOT
...........................................................................................................
37
3.2.3. SYNCHRONISIEREN
DER
WUERMER
/
PRAEPARATION
VON
WURMEIERN
..............................
40
3.2.4.
KRYOPRAESERVATION
VON
WUERMERN
...........................................................................
41
3.2.5.
GENOTYPISIERUNGS-PCR...........................................................................................
41
3.2.6.
BAKTERIENKULTUREN
.................................................................................................
43
3.2.7.
RNAI
SEQUENZIERUNG
..............................................................................................
44
3.2.8. KNOCKDOWN
VON
WUERMERN
MITTELS
RNAI
...............................................................
44
INHALTSVERZEICHNIS
6
3.2.9.
HITZESTRESS
.............................................................................................................
45
3.2.10.
HYPOXIE-BEHANDLUNG
.............................................................................................
46
3.2.11.
MASSENSPEKTROMETRIE
...........................................................................................
46
3.2.12.
KOLLAGEN
QUANTIFIZIERUNG
.......................................................................................
47
3.2.13.
STATISTIKEN
..............................................................................................................
48
4.
ERGEBNISSE
..............................................................................................................................
49
4.1.
UNTERSUCHUNG
DER
HYPOXISCHEN
PRAEKONDITIONIERUNG
UNTER
VERWENDUNG
DES
HITZESTRESSMODELLS
IM
NEMATODEN
C.
ELEGANS
..............................................................
49
4.1.1.
ETABLIERUNG
DES
HITZESTRESS-TESTS
UND
GENERELLER
EFFEKT
VON
HYPOXIE
................ 49
4.1.2.
HYPOXIE-SIGNALWEG
UND
STRESSRESISTENZ
...............................................................
52
4.1.3.
DOSIS-WIRKUNGS-BEZIEHUNG
DER
HYPOXIE
..............................................................
52
4.2.
IDENTIFIZIERUNG
VON
MEDIATOREN
DER
STRESSRESISTENZ
....................................................
54
4.2.1.
MAP-KINASEN
.........................................................................................................
55
4.2.2.
TFEB
ORTHOLOG
HLH
30
...........................................................................................
61
4.2.3.
KOLLAGEN
.................................................................................................................
64
4.2.4.
SCHWEFELWASSERSTOFF
..............................................................................................
64
4.2.5.
IDENTIFIZIERUNG
ENTSCHEIDENDER
FAKTOREN
BEI
HITZERESISTENZ
DURCH
DIE
QUANTITATIVE
MASSENSPEKTROMETRISCHE
ANALYSE
IN
HYPOXIE
REGULIERTER
PROTEINE
.
66
5.
DISKUSSION
..............................................................................................................................
78
5.1.
HYPOXIE
ALS
PRAEKONDITIONIERUNG
IN
C.
ELEGANS
ERHOEHT
DIE
STRESSRESISTENZ
..................
78
5.2.
IDENTIFIZIERUNG
VON
MEDIATOREN
DER
STRESSRESISTENZ
IN
INTERAKTION
MIT
HIF-S/GNA//NG
80
5.2.1.
MAP-KINASEN
.........................................................................................................
81
5.2.2.
TFEB
ORTHOLOG
HLH-30
...........................................................................................
83
5.2.3.
KOLLAGEN
.................................................................................................................
85
5.2.4.
SCHWEFELWASSERSTOFF
..............................................................................................
86
5.2.5.
MASSENSPEKTROMETRISCHE
ANALYSE
DER
PROTEINREGULATION
DURCH
HYPOXISCHE
PRAEKONDITIONIERUNG
UND
VERBINDUNG
ZUR
DOSIS-WIRKUNGS-BEZIEHUNG
...................
88
6.
ZUSAMMENFASSUNG
................................................................................................................
94
7.
LITERATURVERZEICHNIS
...............................................................................................................
95
8.
ANHANG
.................................................................................................................................
111
9.
LEBENSLAUF...........................................................................................................................
120
|
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