T-Zellantworten gegen Hämoglobinaddukte des reaktiven Benzolmetaboliten 1,4-Benzochinon:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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1998
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1
INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
6
1.
ZUSAMMENFASSUNG
9
2.
EINLEITUNG
11
2.1.
BENZOL
11
2.1.1.
VORKOMMEN,
VERWENDUNG
UND
VERBREITUNG
11
2.1.2.
METABOLISMUS
DES
BENZOLS
12
2.1.3.
TOXIKOLOGIE
DES
BENZOLS
UND
SEINER
METABOLITEN
16
2.1.3.1.
EFFEKTE
AUF
DIE
HAEMATOPOESE
17
2.1.3.2.
IMMUNOLOGISCHE
EFFEKTE
IN
DER
BENZOLTOXIKOLOGIE
19
2.2.
T-ZELLREAKTIONEN
GEGEN
CHEMIKALIEN
21
2.2.1.
DIE
T-ZELLVERMITTELTE
IMMUNANTWORT
21
2.2.2.
HAPTENERKENNUNG
DURCH
T-ZELLEN
24
2.2.3.
T-ZELLREAKTIONEN
GEGEN
KRYPTISCHE
PEPTIDE
26
2.2.4.
HAEMOGLOBIN
ALS
TRAEGERPROTEIN
FUER
CHEMIKALIEN
28
2.3.
FRAGESTELLUNGEN
29
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
31
3.1.
VERSUCHSTIERE
31
2
SEITE
3.2.
ZELLINIEN
31
3.3.
VERBRAUCHSMATERIAL
31
3.3.1.
PLASTIKARTIKEL
31
3.3.2.
CHEMIKALIEN
32
3.3.3.
KULTURMEDIEN
UND
LOESUNGEN
32
3.4.
ANTIGENE:
PRAEPARATION
UND
CHARAKTERISIERUNG
34
3.4.1.
HAEMOGLOBINPRAEPARATION
34
3.4.2.
KOPPLUNG
VON
1
,4-BENZOCHINON,
4-AMINOPHENOL,
1
,4-PHENYLENDIAMIN
UND
BANDROWSKIS
BASE
AN
HAEMOGLOBIN
35
3.4.3.
PEPTIDE
35
3.4.4.
KOPPLUNG
VON
1
,4-BENZOCHINON
UND
4-AMINOPHENOL
AN
PEPTIDE
39
3.4.5.
PROTEINBESTIMMUNG
NACH
B
RADFORD
39
3.4.6.
MESSUNG
REDUZIERTER
SULFHYDRYLGRUPPEN
NACH
E
LLMAN
40
3.4.7.
PHOTOMETRISCHE
UNTERSUCHUNGEN
40
3.4.8.
ANALYSE
UND
AUFREINIGUNG
MITTELS
UMKEHRPHASEN-HOCHLEISTUNGS
FLUESSIGCHROMATOGRAPHIE
(RP-HPLC)
40
3.4.9.
ZYTOTOXIZITAETSTEST
41
3.5.
T-ZELLKULTUR
UND
IN-VIVO-VERSUCHE
41
3.5.1.
KULTUR
VON
ZELLEN
41
3.5.2.
ZENTRIFUGATION
VON
ZELLEN
41
3.5.3.
ZELLZAEHLUNG
41
3.5.4.
EINFRIEREN
UND
AUFTAUEN
VON
ZELLEN
42
3.5.5.
INAKTIVIERUNG
VON
ZELLEN
42
3.5.6.
IMMUNISIERUNG
42
3.5.7.
GEWINNUNG
VON
MILZLEUKOZYTEN
42
3
SEITE
3.5.8.
ABTRENNUNG
TOTER
ZELLEN
UEBER
EINEN
FICOLL-GRADIENTEN
43
3.5.9.
ANREICHERUNG
VON
T-ZELLEN
MIT
NYLONWOLLSAEULEN
43
3.5.10.
RESTIMULATION
VON
T-ZELLEN
44
3.5.11.
EXPANSION
STIMULIERTER
T-ZELLEN
44
3.5.12.
FUSION
VON
T-ZELLBLASTEN
MIT
BW5147-ZELLEN
44
3.5.13.
SPEZIFITAETSTEST
MIT
T-ZELLHYBRIDOMEN
45
3.5.14.
LNTERLEUKIN-2-BIOTEST
45
3.5.15.
MESSUNG
DER
PROLIFERATION
DURCH
[
3
H]-THYMIDINEINBAU
45
3.5.16.
SUBKLONIERUNG
VON
T-ZELLHYBRIDOMEN
46
3.5.17.
STIMULATIONSTEST
MIT
T-ZELLHYBRIDOMEN
46
3.5.18.
MHC-IL-BLOCKIERUNG
46
3.5.19.
EXPOSITION
VON
MAEUSEN
GEGEN
BENZOL
46
3.5.20.
POPLITEALLYMPHKNOTEN-TEST
(PLKT)
47
4.
ERGEBNISSE
48
4.1.
ANTIGENE:
PRAEPARATION
UND
CHARAKTERISIERUNG
48
4.2.
/N-V'/TRO-RESTIMULATION
1
,4-BENZOCHINON-GLOBIN
SENSIBILISIERTER
T-ZELLEN
55
4.3.
HERSTELLUNG
1
,4-BENZOCHINON-SPEZIFISCHER
CD4
+
T-ZELLHYBRIDOME
56
4.3.1.
KONZENTRATIONSABHAENGIGKEIT
DER
ANTIGENERKENNUNG
UND
KREUZREAKTIVITAET
GEGEN
HAPTENISIERTES
ALLOGENES
GLOBIN
57
4.3.2.
1
,4-BENZOCHINON-SPEZIFISCHE
T-ZELLHYBRIDOME
ERKENNEN
HAPTENISIERTE
SELBSTPEPTIDE
58
4.3.3.
DIE
ERKENNUNG
DES
1
,4-BENZOCHINONS
IST
MHC-ABHAENGIG
61
4
SEITE
4.3.4.
1
,4-BENZOCHINON-SPEZIFISCHE
T-ZELLHYBRIDOME
REAGIEREN
NICHT
GEGEN
HAPTENISIERTES
HAEMOGLOBIN
62
4.3.5.
1
,4-BENZOCHINON-HAEMOGLOBIN
WIRD
VON
DAGEGEN
SENSIBILISIERTEN
T-ZELLEN
ERKANNT
63
4.3.6.
1
,4-BENZOCHINON
INDUZIERT
DIE
PRAESENTATION
KRYPTISCHER
PEPTIDE
64
4.4.
KREUZREAKTIVITAET
GEGEN
HAPTENE
AUS
DER
GRUPPE
DER
PARA-STOFFE
70
4.5.
HAEMOGLOBIN
AUS
BENZOLEXPONIERTEN
MAEUSEN
WIRKT
ANTIGEN
IM
PLKT
73
5.
DISKUSSION
75
5.1.
T-ZELLEN
KOENNEN
GEGEN
DAS
1
,4-BENZOCHINON-ADDUKT
DES
SELBST-PROTEINS
GLOBIN
SENSIBILISIERT
WERDEN
75
5.2.
1
,4-BENZOCHINON
IST
EIN
HAPTEN
76
5.3.
HAEMOGLOBIN
WIRD
DIFFERENTIELL
DURCH
1
,4-BENZOCHINON
HAPTENISIERT
77
5.4.
AUS
1
,4-BENZOCHINON-GLOBIN
WERDEN
KRYPTISCHE
PEPTIDE
AUSGESCHNITTEN
UND
AN
T-ZELLEN
PRAESENTIERT
78
5.5.
T-ZELLKLONE
KOENNEN
GEGEN
VERSCHIEDENE
HAPTENE
KREUZREAGIEREN
80
5.6.
IST
EINE
T-ZELLSENSIBILISIERUNG
GEGEN
IN
VIVO
GEBILDETES
1
,4-BENZOCHINON
MOEGLICH?
84
5.7.
AUSBLICK
86
5
SEITE
6.
LITERATURVERZEICHNIS
88
ANHANG
109
ERKLAERUNG
109
LEBENSLAUF
110
KONGRESSBEITRAEGE
111
DANKSAGUNG
112 |
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