Membranpotentialbestimmungen an Müllerzellen und ihren Mitochondrien:
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2000
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INHALTSVERZEICHNIS
ABKTTRZUNGSVERZEICHNIS 3
1 EINLEITUNG 4
1.1 RETINA 4
1.2 MUELLERSCHE GLIAZELLE ALS MAKROGLIA DER RETINA 5
1.2.1 ALLGEMEINE CHARAKTERISIERUNG DER ZELLE 5
1.2.2 BEITRAG DER MUELLERZELLE ZUR KALIUMHOMOEOSTASE IN DER RETINA 8
1.2.3 ASPEKTE DES STOFFWECHSELS DER MUELLERZELLE 10
1.3 MEMBRANPOTENTIAL UND IMAGING 11
1.4 ABLEITUNG DER EIGENEN AUFGABENSTELLUNG 14
2 MATERIALIEN UND METHODEN 16
2.1 ZELLISOLATION UND PROBENPRAEPARATION 16
2.1.1 FRISCH ISOLIERTE EINZELZELLEN 16
2.1.2 FIXIERTE EINZELZELLEN 17
2.1.3 ELEKTRONENMIKROSKOPIE 17
2.2 PUFFERLOESUNGEN 18
2.3 GINKGO BILOBA-EXTRAKT EGB 761 19
2.4 IMAGINGVERFAHREN 20
2.4.1 IMAGINGMESSPLATZ 20
2.4.2 IMAGING AM KONFOKALEN MIKROSKOP 21
2.5 ELEKTRONENMIKROSKOPIE 22
2.6 PHOTOMETRISCHE VERFAHREN 22
2.6.1 MTT-TEST 22
2.6.2 SPEKTRALES VERHALTEN DES TMRM 23
2.7 FLUORESZENZFARBSTOFFE 23
2.7.1 MEMBRANPOTENTIALMESSUNGEN 23
2.7.2 MITOCHONDRIENFAERBUNG 25
2.7.2.1 LEBENDE ZELLEN 25
2
.
1.22 FIXIERTE ZELLEN 25
2.7.3 NACHWEIS FREIER RADIKALE 26
L
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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3 ERGEBNISSE 27
3.1 EINFLUSS VON AENDERUNGEN IN DER EXTRAZELLULAERLOESUNG AUF DAS
MEMBRANPOTENTIAL 27
3.1.1 V ERAENDERTE KALIUMKONZENTRATIONEN 3 0
3.1.2 BLOCK DER NA
+/K+-PUMPE BZW. VON KANAELEN SOWIE STIMULATION
DER NA
+/K+-PUMPE 35
3.2 EINFLUSS VON STOFFWECHSELVERAENDERUNGEN AUF DAS MEMBRANPOTENTIAL 40
3.2.1 UEBERBLICK 40
3.2.2 JODACETAT 40
3.2.3 ANTIMYCINA 42
3.2.4 ANDERE SUBSTANZEN 45
3.3 ANFANGSHYPERPOLARISATION 47
3.3.1 SPEKTRALES VERHALTEN DES TMRM 47
3.3.2 ABSCHAETZUNG DES MITOCHONDRIALEN MEMBRANPOTENTIALS 50
3.3.3 UNTERSUCHUNGEN ZUR FARBSTOFFFREISETZUNG 5 6
3.3.4 UNTERSUCHUNGEN ZUM FARBSTOFFVERHALTEN 57
3.3.5 WIRKUNG DES RADIKALFAENGERS UND ANTIOXIDANS EGB 761 60
3.4 EINFLUSS DER TAEGLICHEN GABE VON EGB 761 AUF DIE MITOCHONDRIEN 64
3.4.1 MITOCHONDRIENPOTENTIAL UND SCHEINBARE HYPERPOLARISATION 64
3.4.2 GABA-TRANSAMINASE 66
3.4.3 MITOCHONDRIALE AKTIVITAET (MTT-TEST) 67
3.4.4 AENDERUNGEN DER ULTRASTRUKTUR 68
4 DISKUSSION 71
4.1 UNTERSUCHUNG DES PLASMAMEMBRANPOTENTIALS DER MFILLERZELLEN MIT TMRM
71
4.2 STIMULATION UND BLOCK DER NA
+/K+-ATPASE 73
4.3 EINORDNUNG DER POTENTIALENTWICKLUNG IN ABHAENGIGKEIT VON DER
STOFFWECHSELSITUATION 75
4.4 VERHALTEN HOHER KONZENTRATIONEN VON TMRM 79
4.5 FARBSTOFFFREISETZUNG 81
4.6 MEMBRANPOTENTIAL DER MITOCHONDRIEN DES MEERSCHWEINCHENS 83
4.7 AUSWIRKUNGEN DER UNTERSUCHUNGEN ZUR FARBSTOFFFREISETZUNG 83
4.8 ALTERSBEDINGTE VERAENDERUNGEN UND DER EINFLUSS DES EGB 761 84
5 ZUSAMMENFASSUNG 88
6 LITERATURVERZEICHNIS 91
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